Model izolacji społecznej: nieinwazyjny model stresu i lęku u gryzoni

Model ten naśladuje ludzkie, społeczne, izolatywne życie i jest nieinwazyjnym i prostym sposobem na stworzenie modelu lęku i łagodnego upośledzenia poznawczego. Ta technika wymaga jedynie odpowiednich warunków przetrzymywania i ślimaka zabiegowego i nie wymaga żmudnych procesów, takich jak zastrzyki czy manipulacje genetyczne. Aby odizolować zwierzęta od społeczeństwa, weź standardową klatkę dla myszy o powierzchni 75 cali kwadratowych.

Dodaj połowę ilości pościeli i jednocalowy kwadratowy kawałek bawełny do zagnieżdżenia. Owiń zewnętrzną stronę ścian klatki w nieprzezroczyste czarne plastikowe torby bez segmentu worka dostępnego od wewnątrz. Zabezpiecz torbę taśmą i upewnij się, że środowisko zewnętrzne zwierzęcia lub otoczenie nie jest widoczne.

Pozostaw górną i dolną część klatki rozwiniętą, chyba że myszy widzą przez nie sąsiednie zwierzęta. Myszy kontrolne należy trzymać w grupach po dwie lub trzy osoby w normalnych warunkach trzymania w klatkach w standardowej klatce dla myszy z pełną ilością ściółki, dwucalowym kwadratowym kawałkiem bawełny lub odpowiednikiem do zagnieżdżania, bez owijania nieprzezroczystymi torbami. Upewnij się, że myszy trzymane w grupie są kompatybilne bez konfliktu.

Jeśli nie, wyklucz agresora z analizy. Wymieniaj klatki tylko raz w tygodniu podczas ciemnego cyklu, z tą samą plastikową torbą ponownie owiniętą do nowej klatki, chyba że występują znaczne uszkodzenia. W przypadku myszy kontrolnych zmieniaj klatki dwa razy w tygodniu lub częściej podczas ciemnego cyklu.

Kontynuuj izolowanie myszy przez co najmniej cztery tygodnie, aby zaobserwować optymalne wyniki. Aby przygotować zabieg, dodaj 3% agar do wody dejonizowanej i rozpuść go w temperaturze około 90 stopni Celsjusza za pomocą płyty grzewczej lub kuchenki mikrofalowej. Zapobiegaj rozlaniu lub wykipieniu bulgoczącego roztworu.

Mieszaj roztwór, aż stanie się jednorodny. Gdy roztwór jest jeszcze ciepły, dodaj 5% sacharozy. Zamieszaj jednorodny roztwór przed wlaniem roztworu do formy.

Pozwól mu ostygnąć i zestalić się w temperaturze pokojowej lub 4 stopnie Celsjusza. W przypadku leczenia wrażliwego na światło należy chronić pleśń przed światłem. Po zestaleniu agar pokrój w kostkę o wymiarach 0,5 na 0,5 na 0,5 centymetra i przechowuj w temperaturze 4 stopni Celsjusza do podania.

Podawaj leczenie w zaplanowanym czasie i z zaplanowaną częstotliwością, przy jak najmniejszym obchodzeniu się z nim. Cicho i ostrożnie umieść pojedynczą kostkę na małej łodzi lub jej odpowiedniku, takim jak nasadka 50-mililitrowej tubki kroniki podczas ciemnej fazy jasnego cyklu ciemnego, nie dotykając myszy. Pozwól myszy spożyć agar.

Po potwierdzeniu całkowitego spożycia agaru, ostrożnie wyjmij łódź z klatki i powtórz w razie potrzeby. Myszy izolowane społecznie spędzają znacznie mniej czasu w otwartym ramieniu i znacznie dłużej w zamkniętym ramieniu w porównaniu z grupą kontrolną. W teście na otwartym polu myszy izolowane społecznie pokonywały mniejszy dystans, mniej się hodowały i spędzały więcej czasu w rogach.

Podobnie, spędzali mniej czasu w centralnym obszarze niż w grupie kontrolnej, co wskazuje na zwiększone zachowanie podobne do lęku. Myszy izolowane społecznie wykazywały również zmniejszone rozpoznawanie nowych obiektów i nowego kontekstu w porównaniu z grupą kontrolną, co sugeruje upośledzenie funkcji poznawczych. Ta technika pozwala nam badać rozwój lęku i zaburzeń poznawczych, a nie tylko wynik zaburzeń.