Name: Badanie strategii łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12 (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T14:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Poznaj strategię łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12. Ta metoda oferuje prosty i niezawodny sposób na optymalizację skuteczności fitoterapii w badaniach nad hipoksją.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie zostało sfinansowane przez kluczowe projekty badawczo-rozwojowe Departamentu Nauki i Technologii Prowincji Syczuan (2020YFS0325).

<ol><li>Mendelevich, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cerebral+ischemia%2C+and+dizziness%5BTitle%5D)+AND+%22Zhurnal+Nevrologii+i+Psikhiatrii+Imeni+SS+Korsakova%22%5BJournal%5D)">Chronic cerebral ischemia, and dizziness.</a> Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii Imeni SS Korsakova. 122 (3), 22-26 (2022).</li>
<li>Gao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+on+the+diagnosis+and+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+integrated+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Expert consensus on the diagnosis and treatment of chronic cerebral ischemia with integrated traditional Chinese and western medicine.</a> Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 38 (10), 1161-1167 (2018).</li>
<li>Luyu, S., Heng, L., Dengke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+treatment+of+45+cases+of+cerebral+infarction+with+Astragalus+and+Dengzhan+Xixin+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Combined treatment of 45 cases of cerebral infarction with Astragalus and Dengzhan Xixin injection.</a> Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine. 27 (4), 23-24 (2007).</li>
<li>Bei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+study+of+Dengzhanxixin+injection+combined+with+Astragalus+injection+in+the+treatment+of+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Basic+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical study of Dengzhanxixin injection combined with Astragalus injection in the treatment of acute ischemic stroke.</a> Journal of Basic Chinese Medicine. 21 (9), 1123-1127 (2015).</li>
<li>Tian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+ratio+of+Astragalus+injection+combined+with+Dengzhan+Xixin+injection+against+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+rats+by+baseline+equal-ratio+increase-decrease+design+method%5BTitle%5D)+AND+%22China+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Optimal ratio of Astragalus injection combined with Dengzhan Xixin injection against cerebral ischemia-reperfusion injury in rats by baseline equal-ratio increase-decrease design method.</a> China Pharmacy. 30 (14), 1885-1889 (2019).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+and+mechanism+of+Astragalus+combined+with+Erigeron+breviscapusin+the+best+proportion+on+cerebral+ischemia+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Protective effect and mechanism of Astragalus combined with Erigeron breviscapusin the best proportion on cerebral ischemia rats.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 35 (2), 104-108 (2019).</li>
<li>Yan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+oxidative+damage+of+PC12+cells+with+hypoxia+and+hypoglycemia+based+on+the+combination+of+Astragalus+and+Dengzhan+Asarum+based+on+the+Nrf2%2FHO-1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Study on the oxidative damage of PC12 cells with hypoxia and hypoglycemia based on the combination of Astragalus and Dengzhan Asarum based on the Nrf2/HO-1 pathway.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 38 (2), 159-164 (2022).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Dengzhan Asarum Granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69</a> 924(2020).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Astragalus granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8</a> 1592(2020).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-linoleyltyrosine+protects+PC12+cells+against+oxidative+damage+via+autophagy%3A+Possible+involvement+of+CB1+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">N-linoleyltyrosine protects PC12 cells against oxidative damage via autophagy: Possible involvement of CB1 receptor regulation.</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (5), 1827-1837 (2020).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gab1+regulates+SDF-1-induced+progression+via+inhibition+of+apoptosis+pathway+induced+by+PI3K%2FAKT%2FBcl-2%2FBAX+pathway+in+human+chondrosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Tumor+Biology%22%5BJournal%5D)">Gab1 regulates SDF-1-induced progression via inhibition of apoptosis pathway induced by PI3K/AKT/Bcl-2/BAX pathway in human chondrosarcoma.</a> Tumor Biology. 37 (1), 1141-1149 (2016).</li>
<li>Meng, M., Zhang, L., Ai, D., Wu, H., Peng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Asarone+ameliorates+%CE%B2-Amyloid-induced+neurotoxicity+in+PC12+cells+by+activating+P13K%2FAkt%2FNrf2+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">β-Asarone ameliorates β-Amyloid-induced neurotoxicity in PC12 cells by activating P13K/Akt/Nrf2 signaling pathway.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 659955(2021).</li>
<li>Li, J., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Xinjiang+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in the treatment of chronic cerebral ischemia with traditional Chinese and western medicine.</a> Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine. 39 (3), 115-118 (2021).</li>
<li>Yu, M., Zhan, Q., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discussion+on+the+therapeutic+value+of+traditional+Chinese+medicine+on+cognitive+dysfunction+caused+by+chronic+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine+Modern+Distance+Education+of+China%22%5BJournal%5D)">Discussion on the therapeutic value of traditional Chinese medicine on cognitive dysfunction caused by chronic cerebral ischemia.</a> Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 11 (19), 155-157 (2013).</li>
<li>Wang, M., Liu, J., Yao, M., Ren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+research+on+pharmacological+and+neuroprotective+effects+of+traditional+Chinese+medicine+after+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Advances in research on pharmacological and neuroprotective effects of traditional Chinese medicine after cerebral ischemia.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (3), 513-517 (2020).</li>
<li>Wang, N., Sun, H., Ma, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+doses+of+astragalus+injection+on+neurological+rehabilitation+of+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Clinical+Rational+Drug+Use%22%5BJournal%5D)">Effects of different doses of astragalus injection on neurological rehabilitation of stroke patients.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 9 (13), 67-69 (2016).</li>
<li>Sun, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+astragalus+injection+on+apoptosis+after+cerebral+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hebei+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effects of astragalus injection on apoptosis after cerebral ischemia-reperfusion in rats.</a> Hebei Medicine. 22 (7), 1147-1149 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengzhan+Xixin+injection+derived+from+a+traditional+Chinese+herb+Erigeron+breviscapusameliorates+cerebral+ischemia%2Freperfusion+injury+in+rats+via+modulation+of+mitophagy+and+mitochondrial+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Dengzhan Xixin injection derived from a traditional Chinese herb Erigeron breviscapusameliorates cerebral ischemia/reperfusion injury in rats via modulation of mitophagy and mitochondrial apoptosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 288, 114988(2022).</li>
<li>Liao, Y., Ni, X., Zhan, C., Cai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+research+progress+of+Dengzhanhua+preparation+in+prevention+and+treatment+of+ischemic+stroke+and+transient+ischemic+attack%5BTitle%5D)+AND+%22Guangdong+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Clinical research progress of Dengzhanhua preparation in prevention and treatment of ischemic stroke and transient ischemic attack.</a> Guangdong Medical Journal. 41 (9), 963-967 (2020).</li>
<li>Li, C., Li, J., Xu, G., Sun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+chronic+ethanol+consumption+on+apoptosis+and+autophagy+following+transient+focal+cerebral+ischemia+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of chronic ethanol consumption on apoptosis and autophagy following transient focal cerebral ischemia in male mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 6164(2020).</li>
<li>El Khashab, I. H., Abdelsalam, R. M., Elbrairy, A. I., Attia, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chrysin+attenuates+global+cerebral+ischemic+reperfusion+injury+via+suppression+of+oxidative+stress%2C+inflammation+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Chrysin attenuates global cerebral ischemic reperfusion injury via suppression of oxidative stress, inflammation and apoptosis.</a> Biomedicine Pharmacotherapy. 112, 108619(2019).</li>
<li>Su, X., He, S., Chen, Z., Xie, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+breviscapine+aglycone+on+PI+3+K%2FAkt+conduction+pathway+in+neonatal+rats+with+hypoxic-ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Armed+Police+Logistics+College+%28Medical+Edition%29%22%5BJournal%5D)">Effect of breviscapine aglycone on PI 3 K/Akt conduction pathway in neonatal rats with hypoxic-ischemic brain injury.</a> Journal of Armed Police Logistics College (Medical Edition). 27 (2), 93-96 (2018).</li>
<li>Wang, X., Shi, C., Pan, H., Meng, X., Ji, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-22+exerts+its+neuroprotective+and+angiogenic+functions+via+regulating+PI3K%2FAkt+signaling+pathway+in+cerebral+ischemia-reperfusion+rats%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Transmission%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-22 exerts its neuroprotective and angiogenic functions via regulating PI3K/Akt signaling pathway in cerebral ischemia-reperfusion rats).</a> Journal of Neural Transmission. 127 (1), 35-44 (2020).</li>
<li>Luca, M., Luca, A., Calandra, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+oxidative+damage+in+the+pathogenesis+and+progression+of+alzheimer%27s+disease+and+vascular+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The role of oxidative damage in the pathogenesis and progression of alzheimer's disease and vascular dementia.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2015, 504678(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lupeol+alleviates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+correlation+with+modulation+of+PI3K%2FAkt+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychiatric+Disease+and+Treatment%22%5BJournal%5D)">Lupeol alleviates cerebral ischemia-reperfusion injury in correlation with modulation of PI3K/Akt pathway.</a> Neuropsychiatric Disease and Treatment. 16 (8), 1381-1390 (2020).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+phosphocreatine+on+oxidative+stress+and+mitochondrial+dysfunction+induced+apoptosis+in+vitro+and+in+vivo%3A+Involvement+of+dual+PI3K%2FAkt+and+Nrf2%2FHO-1+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of phosphocreatine on oxidative stress and mitochondrial dysfunction induced apoptosis in vitro and in vivo: Involvement of dual PI3K/Akt and Nrf2/HO-1 pathways.</a> Free Radical Biology and Medicine. 120, 228-238 (2018).</li>
<li>Muñoz-Sánchez, J., Chánez-Cárdenas, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+cobalt+chloride+as+a+chemical+hypoxia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">The use of cobalt chloride as a chemical hypoxia model.</a> Journal of Applied Toxicology. 39 (4), 556-570 (2019).</li>
<li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside+attenuates+CoCl2-simulated+hypoxia+injury+in+PC12+cells+partly+by+mitochondrial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Salidroside attenuates CoCl2-simulated hypoxia injury in PC12 cells partly by mitochondrial protection.</a> European Journal of Pharmacology. 912 (10), 174617(2021).</li>
<li>Yin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+potency+of+Tofu+bio-processed+using+Actinomucor+elegans+against+hypoxic+injury+induced+by+cobalt+chloride+in+PC12+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective potency of Tofu bio-processed using Actinomucor elegans against hypoxic injury induced by cobalt chloride in PC12 cells.</a> Molecules. 26 (10), 2983(2021).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

We współczesnej praktyce klinicznej nadal brakuje idealnych leków stosowanych w leczeniu niedokrwienia mózgu2. Pod kierunkiem suplementacji qi i aktywacji metody krążenia krwi, Ast, Eri i inne preparaty były stosowane w połączeniu w praktyce klinicznej TCM i osiągnęły dobre wszechstronne zalety 13,14,15. Duża liczba badań wykazała, że Ast może poprawić przepuszczalność bariery krew-mózg, zwiększyć przepły...

Przewlekłe niedokrwienie mózgu, spowodowane hipoperfuzją mózgu, jest powszechną chorobą u osób w średnim i starszym wieku1. Jako długotrwała utajona choroba niedokrwienna może prowadzić do postępującej lub uporczywej dysfunkcji neurologicznej. Główne mechanizmy patologiczne obejmują apoptozę komórek i uszkodzenia oksydacyjne, prowadzące do postępującej lub utrzymującej się dysfunkcji neurologicznej; jest to patologiczna podstawa choroby Alzheimera, otępienia naczyniowego i innych chorób, która poważnie wpływa na jakość życia pacjentów. Jednak we współczesnej medycynie wciąż brakuje idealnych leków do leczenia przewlekłego niedokrwienia mózgu2. W tym samym czasie, połączenie Astragalus mongholicus (Ast) i Erigeron breviscapus (Eri) jest szeroko stosowane w praktyce klinicznej tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM)4. Strategia skojarzona znacznie poprawiła się w promowaniu odzyskiwania funkcji nerwów po niedokrwieniu mózgu, co jest lepsze niż w przypadku pojedynczego leku; Istnieją jednak duże różnice w proporcjach dawkowania w połączeniu tych dwóch leków<klasa SUP='xref'>4. Skuteczne składniki i mechanizm działania nie są dobrze określone, co jest kluczową kwestią ograniczającą jego zastosowanie kliniczne.
Poprzednie badania wykazały synergiczny efekt kombinacji preparatu polegającego na wstrzyknięciu Ast i wstrzyknięciu Eri w leczeniu niedokrwienia mózgu u szczurów. Może regulować w górę ekspresję białka p-Akt i zmniejszać ekspresję białka promotora śmierci związanego z Bcl-2 (BAD) 5,6, które jest jednym z białek z rodziny B-limphoblastoma 2 (Bcl-2) i ma wpływ na promowanie apoptozy. Nie jest jednak jasne, jakie są materialne podstawy i mechanizm jego synergicznego działania. Ponadto ustalono model uszkodzenia komórek PC12 za pomocą pożywki bezglukozowej połączonej z CoCl2, a optymalna kombinacja składników w Ast i Eri została przebadana i zdefiniowana7.
W tym badaniu, skuteczne dawki Ast i Eri są badane przy użyciu uszkodzonego modelu komórek PC12. Optymalna kombinacja tych dwóch leków jest badana przy użyciu tego modelu w połączeniu z metodą projektowania jednorodnego. Model komórkowy służy do dalszej oceny różnic w skutkach i mechanizmach kombinacji preparatów i kombinacji składników w uszkodzonych komórkach PC12. Strategia ta ma na celu zbadanie efektu ochronnego i mechanizmu regulacyjnego dwóch typów kombinacji na uszkodzonych komórkach PC12 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt/Nrf2 w celu określenia najlepszego trybu kombinacji. Badanie to stanowi punkt odniesienia dla optymalizacji najlepszego trybu aplikacji TCM.

<table><tbody><tr><td>Szafa bezpieczeństwa biologicznego klasy II serii 1300</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>1374</td><td></td></tr><tr><td>bromek 3-(4,5-dimetylotiazol-2-ylo)-2,5-difenylotetrazolium</td><td>Guangzhou saiguo biotech Company</td><td>1334GR001</td><td>MTT</td></tr><tr><td>ACEA NovoExpress&nbsp; 1.4.0</td><td>ACEA Biosciences,</td> <td>Inc-Akt</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>10176-2-AP</td><td></td></tr><tr><td>Analityczna cytometria przepływowa</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>62-2-1810-1027-0</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do wykrywania apoptozy Annexin V-FITC</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>C1062L</td><td></td></tr><tr><td>Astragalus iniekcja</td><td>Heilongjiang Zhenbao Wyspiarska firma farmaceutyczna</td><td>A03190612144</td><td>Ast do wstrzykiwań</td></tr><tr><td>Astragaloside A</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>84687-43-4</td><td></td></tr><tr><td>Bax</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>60267-1-Ig</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do oznaczania ilościowego białka</td><td>BCA Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0012</td><td></td></tr><tr><td>Bcl-2</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>26593-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Inkubatory dwutlenku węgla</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>0816-2014</td><td></td></tr><tr><td>Caspase-3</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>19677-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Kwas chlorogenowy</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>327-97-9</td><td></td></tr><tr><td>Sześciowodny chlorek kobaltu</td><td>Merck Biotechnology, Inc.</td><td>7791-13-1</td><td>CoCl2</td></tr><tr><td>sulftlenek dimetylu</td><td>Guangzhou saiguo biotech Company</td><td>2020112701</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Dwunastowodny wodorofosforan disodowy</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2020090101</td><td></td></tr><tr><td>DMEM o wysokiej zawartości cukru</td><td>Thermo scientific Hyclone</td><td>2110050</td><td></td></tr><tr><td>DMEM podłoże bez cukru</td><td>Beijing Solarbio firma zajmująca się naukami przyrodniczymi</td><td></td><td></td>2029548</tr><tr><td>Płyn świetlny ECL</td><td>Lianshuo Biological Company</td><td>WBKLS0500</td><td></td></tr><tr><td>Waga elektroniczna</td><td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>FA1204</td><td></td></tr><tr><td>Przyrząd do elektroforezy</td><td>Bio-Rad Laboratories (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1658026</td><td></td></tr><tr><td>Kapsułka Erigeron breviscapus</td><td>Firma farmaceutyczna Yunnan Biogu</td><td>Z53021671</td><td>Kapsułka Eri</td></tr><tr><td>Surowica bydlęca płodu</td> Instytut <td>Inżynierii Biologicznej</td><td>20210402</td><td>FBS</td></tr><tr><td>Mikroskop fluorescencyjny</td><td>Olympms Corporation</td><td>IX71-F32PH</td><td></td></tr><tr><td>Obrazownik żelowy</td><td>Bio-Rad Laboratories (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1708265</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało wtórne przeciwko myszom Koza</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>SA00001-1</td><td></td></tr><tr><td>Drugorzędowe przeciwciało przeciw królikom</td><td>z Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>SA00001- 2</td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS Statistics wersja 26.0</td><td>International Business Machines Corporation, USA-ImageJ</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>1.8.0</td><td>National Institutes of Health, USA-oprogramowanie</td><td></td> <td>do obrazowania</td></tr><tr><td>Immunol&nbsp; fluorescencja&nbsp; zestaw do barwienia</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0196</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2021070901</td><td></td></tr><tr><td>Marker</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>26616</td><td></td></tr><tr><td>Czytnik mikropłytek</td><td>Perkin Elmer Corporate Management (Shanghai) Co.</td><td></td><td></td>HH35L2018296</tr><tr><td>Motic Mikroskop odwrócony</td><td>Nanda Scientific Instruments Co.</td><td></td><td></td>AE2000LED</tr><tr><td>NaCl</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2014081301</td><td></td></tr><tr><td>Mleko beztłuszczowe</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0216</td><td></td></tr><tr><td>Nrf2</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>16396-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>P-Akt</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>66444-1-IG</td><td></td></tr><tr><td>PC12 komórki</td><td>Chińska Akademia Nauk</td><td></td><td></td>CBP60430</tr><tr><td>Roztwór penicyliny i streptomycyny</td><td>Thermo scientific Mieszanina</td><td></td> inhibitorów proteazy fosfatazy SV30010 <td></td></tr><tr><td></td><td>hydroklonu Beyotime Biotechnology Company</td><td>P1045</td><td></td></tr><tr><td>Diwodorofosforan potasu</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2015082901</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do oznaczania reaktywnych form tlenu</td><td>Firma</td> <td>Biotechnologiczna BeyotimeS0033S Roztwór</td><td></td></tr><tr><td>do lizy RI-PA</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>Scutellarin</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>27740-01-8</td><td></td></tr><tr><td>Bufor do ładowania próbek SDS-PAGE, 5x</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0015L</td><td></td></tr><tr><td>Sterylne końcówki filtra (0,22 i mikro; m)</td> <td>Merck Biotechnology, Inc.</td><td></td><td></td>SLGP033RB</tr><tr><td>Firma biotechnologiczna Saiguo</td><td>z siedzibą w Kantonie</td><td>1115GR500&nbsp;</td><td>Tbs</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Thermo naukowy J190013</td><td></td><td></td>hyklon</tr><tr><td>Tween-20</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2021051301</td><td></td></tr><tr><td>oscylator Vortex</td><td>OHAUS International Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>VXMNAL</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-aktyna</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>66009-1-IG</td><td></td></tr></tbody></table>

badanie strategii łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek pc12

Exploring the Two Herb Combination Strategy to Treat Injured PC12 Cells

Ze względu na korzyści płynące z połączenia tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM) w leczeniu niedokrwienia mózgu, badaliśmy różnice w skuteczności i mechanizmie między kombinacją preparatów a kombinacją składników, aby zbadać strategię kombinacji dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12. Chlorek kobaltu (CoCl2) w połączeniu z podłożem bezglukozowym zastosowano w celu wywołania uszkodzenia oksydacyjnego komórek PC12. Następnie wybrano optymalną kombinację iniekcji Astragalus mongholicus (Ast) i Erigeron breviscapus (Eri) i połączono je zgodnie z jednolitymi metodami projektowania po przeprowadzeniu badań przesiewowych ich bezpiecznego i skutecznego stężenia na komórkach PC12. Ponadto przesiewana kombinacja składników zawiera 10 μM astragalozydu A, 40 μM scutellariny i 75 μM kwasu chlorogenowego w dwóch ziołach. Następnie zastosowano MTT, aneksynę V-FITC/PI, immunofluorescencję i analizę Western blot w celu oceny skuteczności i mechanizmu kombinacji preparatów i kombinacji składników na uszkodzonych komórkach PC12. Wyniki wykazały, że optymalną kombinacją preparatów dla pro-przeżycia komórek była iniekcja Ast i kapsułka Eri o stężeniu 6:1,8 (μM). Kombinacja składników (10 μM astragalozydu A, 40 μM scutellariny i 75 μM kwasu chlorogenowego) była bardziej skuteczna niż kombinacja preparatów. Obie kombinacje znacznie zmniejszyły szybkość apoptozy, intensywność fluorescencji kaspazy-3 i poziom wewnątrzkomórkowych reaktywnych form tlenu (ROS); tymczasem zwiększyli poziomy ekspresji p-Akt / Akt, Bcl-2 / Bax i Nrf2. Efekty te były bardziej widoczne w kombinacji składników. Podsumowując, obie kombinacje mogą hamować uszkodzenia wywołane przez CoCl2 w połączeniu z pożywką wolną od glukozy na komórkach PC12, sprzyjając w ten sposób przeżyciu komórek. Jednak skuteczność kombinacji składników w porównaniu z kombinacją preparatów może wynikać z silniejszej regulacji szlaku sygnałowego PI3K/Akt/Nrf2 związanego ze stresem oksydacyjnym i apoptozą.

Badanie przesiewowe optymalnej kombinacji wstrzyknięcia Ast i kapsułki Eri jest pokazane w Rysunek 1. Wskaźnik przeżycia komórek po wstrzyknięciu Ast i kapsułce Eri na normalnych komórkach PC12 jest pokazany w Rysunek 1A. Żywotność komórek była niższa niż 95% przy wstrzyknięciu Ast w stężeniach większych niż 12 μM (<silna klasa="xfig">Figura 1A) i kapsułce Eri w stężeniach większych niż 5 μM (<silna klasa="xfig">Figura 1A), co wskazuje, że maksymalne nietoksyczn...

Ten protokół zapewnia strategię kombinacji dwóch ziół do leczenia uszkodzonych komórek PC12. Protokół stanowi odniesienie do optymalizacji najlepszego trybu aplikacji tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM).

Badanie strategii łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12

In view of the advantages of the combination of traditional Chinese medicine (TCM) in the treatment of cerebral ischemia, we studied the differences in ...

Protokół w tym badaniu zawiera strategię kombinacji dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych przez niedotlenienie komórek PC12 oraz odniesienie do optymalizacji najlepszego trybu łączenia ziół. Technika ta może zapewnić prostą, niezawodną i wydajną metodę eksperymentalną in vitro do badania przesiewowego skutecznej kombinacji składników z ziół przeciwko komórkom niedotlenionym. Strategia ta może być również zastosowana do badania przesiewowego kombinacji składników przeciwko komórkom niedotlenionym z innych kombinacji preparatów ziołowych i zilustrowania ich mechanizmu ochronnego.Na początek subkulturuj komórki PC12 co dwa do trzech dni w temperaturze 37 stopni Celsjusza w inkubatorze uzupełnionym 5% dwutlenkiem węgla, aby uzyskać pasaż od 4 do 8 dla wszystkich kolejnych eksperymentów. Potraktuj 70 do 80% zlewających się komórek PC12 jednym mililitrem 0,25% trypsyny i obserwuj komórki pod mikroskopem pod kątem oderwania komórek. Następnie przerwij trawienie trypsyny, dodając trzy mililitry kompletnej pożywki.Wiruj przeniesione komórki w 15-mililitrowej probówce wirówkowej o pojemności 840 x g przez pięć minut. Po odrzuceniu supernatantu ponownie zawiesić osad komórkowy z kompletną pożywk

exploring-two-herb-combination-strategy-to-treat-injured-pc12

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Uraz rdzenia kręgowego zaburza komunikację z mózgiem. Aby przywrócić utraconą łączność, wykorzystujemy przeszczep nerwu obwodowego, który stanowi podłoże dla regenerujących się włókien, w połączeniu z czynnikami neurotroficznymi i enzymami modyfikującymi macierz, które usuwają cząsteczki hamujące w celu promowania wzrostu na duże odległości.

Połączenie przeszczepu nerwu obwodowego i modulacji macierzy w celu naprawy uszkodzonego rdzenia kręgowego szczura

Plastyczność neuronalna jest coraz bardziej rozpoznawaną, ale niedostatecznie poznaną cechą przewodu pokarmowego (GI). Tutaj, na przykładzie zaburzeń trzustki u człowieka, przedstawiamy test neuroplastyczności in vitro do badania plastyczności neuronalnej w przewodzie pokarmowym zarówno na poziomie morfologicznym, jak i funkcjonalnym.

Symulacja neuroplastyczności trzustki: test plastyczności podwójnych neuronów in vitro

Uraz rdzenia kręgowego to traumatyczny stan, który powoduje ciężką zachorowalność i wysoką śmiertelność. W niniejszej pracy szczegółowo opisano model kontuzji rdzenia kręgowego u myszy, po którym następuje przeszczepienie nerwowych komórek macierzystych.

Przeszczepienie nerwowych komórek macierzystych w eksperymentalnym modelu kontuzyjnym uszkodzenia rdzenia kręgowego

W organizmach wielokomórkowych wydzielane rozpuszczalne czynniki wywołują reakcje różnych typów komórek w wyniku sygnalizacji parakrynnej. Systemy kohodowli typu insert oferują prosty sposób oceny zmian, w których pośredniczą wydzielane czynniki rozpuszczalne przy braku kontaktu komórka-komórka.

Opracowanie systemu kohodowli inkubacyjnej dwóch typów komórek przy braku kontaktu komórka-komórka

Udostępniamy protokoły oceny mezenchymalnych komórek macierzystych wyizolowanych z miazgi zębowej i interakcji komórek raka prostaty w oparciu o bezpośrednie i pośrednie metody wspólnej hodowli. Membrany Condition Medium i trans-well są odpowiednie do analizy pośredniej aktywności parakrynnej. Wysiewanie różnie barwionych komórek razem jest odpowiednim modelem bezpośredniej interakcji komórka-komórka.

Izolacja mezenchymalnych komórek macierzystych z tkanki miazgi i współhodowla z komórkami nowotworowymi w celu zbadania ich interakcji

W tym protokole pokazujemy i rozwijamy, jak używać ludzkich indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych do różnicowania i oczyszczania kardiomiocytów, a ponadto, jak poprawić efektywność ich przeszczepu za pomocą wstępnego leczenia inhibitorem kinazy białkowej związanej z Rho w modelu zawału mięśnia sercowego u myszy.

Zwiększenie wszczepienia indukowanych przez człowieka pluripotencjalnych kardiomiocytów pochodzących z komórek macierzystych poprzez przejściowe hamowanie aktywności kinazy Rho

Ten protokół demonstruje metodologie dla mysiego modelu urazowego mózgu z otwartą czaszką i przeszczepu hodowanych ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych do miejsca urazu. W skrócie opisano również testy behawioralne i histologiczne wyników tych procedur.

Kontrolowany model wpływu kory mózgowej uszkodzenia mózgu myszy z terapeutycznym przeszczepem ludzkich pluripotencjalnych komórek nerwowych pochodzących z komórek macierzystych

Tutaj prezentujemy protokół zastosowania nanosekundowego impulsowego pola elektrycznego (nsPEF) do stymulacji komórek Schwanna in vitro. Zdolność syntezy i wydzielania odpowiednich czynników i zmian w zachowaniu komórek potwierdziła udaną stymulację za pomocą nsPEF. Badanie pozytywnie ocenia metodę regeneracji nerwów obwodowych.

Regulacja wzrostu komórek Schwanna za pomocą nanosekundowego pulsacyjnego pola elektrycznego do regeneracji nerwów obwodowych in vitro

W tym badaniu opracowano i scharakteryzowano kompozytowe hydrożele mimetyczne nerwowe, które mogą być wykorzystywane do badania i wykorzystania proregeneracyjnego zachowania komórek macierzystych pochodzących z tłuszczu do naprawy urazu rdzenia kręgowego.

Rozwój kombinatorycznych terapii w leczeniu urazów rdzenia kręgowego z wykorzystaniem dostarczania komórek macierzystych

Strategia genetyki molekularnej w celu znalezienia mutacji de novo powodujących powszechne zaburzenia, takie jak autyzm i schizofrenia.

Strategia identyfikacji mutacji de novo w powszechnych zaburzeniach, takich jak autyzm i schizofrenia

Poznaj strategię łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12. Ta metoda oferuje prosty i niezawodny sposób na optymalizację skuteczności fitoterapii w badaniach nad hipoksją.

Badanie strategii łączenia dwóch ziół w leczeniu uszkodzonych komórek PC12

Przeglądaj więcej filmów