3 listopada 2023
Ten artykuł ma na celu dostarczenie badaczom szczegółowego i przystępnego przewodnika, jak skonfigurować model wstrząsu krwotocznego u niemowląt świń.
Wstrząs krwotoczny jest główną przyczyną zgonów dzieci w krajach rozwiniętych. Badanie to daje możliwość porównania odpowiedzi na różne terapie wstrząsu krwotocznego. Jest to prosty i wysoce powtarzalny model, który umożliwia aktywację mechanizmów w odpowiedzi na silne krwotoki u niedojrzałego osobnika.
W tym protokole przełożenie wyników jest wysokie, a co pomaga lepiej określić wybór płynów i odpoczynku do resuscytacji pod względem mniejszego efektu niepożądanego. Model ten pozwala na badanie wpływu różnych płynów resuscytacyjnych i leków wazoaktywnych na różne układy, takie jak mikrokrążenie, krzepnięcie, śródbłonek i glikokaliks. Zacznij od umieszczenia znieczulonego zwierzęcia na stole operacyjnym z kocem rozgrzewającym.
Następnie zmierz obwodowe nasycenie tlenem za pomocą czujnika przypiętego do ucha świni. Rozpocząć ciągłe trzyodprowadzeniowe monitorowanie elektrokardiograficzne. Wprowadzić cewnik do żył obwodowych do żyły usznej, wcześniej dezynfekując skórę co najmniej trzema naprzemiennymi rundami peelingu jodowidonowego lub chlorheksydyny i alkoholu.
Następnie ułóż zwierzę w pozycji grzbietowej leżącej i natychmiast rozpocznij wentylację maski torebkowej za pomocą maski dla psa. Aby rozpocząć procedurę intubacji dotchawiczej, upewnij się, że niezbędny sprzęt i narzędzia chirurgiczne są wysterylizowane i gotowe do użycia. Lekko wyciągnij język i przytrzymaj szczękę otwartą za pomocą gazy krawatowej umieszczonej za górnymi i dolnymi kłami.
Włóż laryngoskop. A gdy nagłośnia jest widoczna, dociśnij ją do góry w kierunku języka za pomocą końcówki laryngoskopu. Po uwidocznieniu strun głosowych delikatnie przesuń rurkę z lekkim obrotem do tchawicy.
Zdejmij trzpień i użyj pięciomililitrowej strzykawki, aby napompować mankiet. Aby zapewnić prawidłowe umieszczenie rurki dotchawiczej, obserwuj symetryczne unoszenie się klatki piersiowej, odpowiednie nasycenie tlenem między 95 a 100% oraz prawidłowy kształt fali i odczyt dwutlenku węgla na końcu oddechu. Po potwierdzeniu intubacji należy rozpocząć wentylację mechaniczną z częstością oddechów 20 oddechów na minutę.
Tytułowa objętość ośmiu mililitrów na kilogram, frakcja wdychanego tlenu 40% i dodatnie końcowe ciśnienie wydechowe czterech centymetrów wody. Dostosuj wentylację, aby osiągnąć ciśnienie parcjalne dwutlenku węgla między 35 a 45 milimetrów słupa rtęci. Utrzymuj głębokie znieczulenie przez cały czas trwania eksperymentu poprzez ciągłą infuzję fentanylu, propofolu i atrakurium.
Aby przygotować obszar kości udowej do cewnikowania naczynia, zdezynfekuj okolicę pachwinową co najmniej trzema naprzemiennymi rundami jodu powidonu lub chlorheksydyny i alkoholem. Następnie oceń naczynia udowe za pomocą ultradźwięków i użyj techniki Dopplera, aby odróżnić tętnicę od żyły. W ciągłym badaniu ultrasonograficznym i przy użyciu techniki Seldingera wprowadzić igłę do 5,5 do 7,5 francuskiego cewnika do żyły centralnej w jednej z żył udowych.
Następnie nakłuj żyłę i pobierz krew. Wyjąć strzykawkę i wprowadzić prowadnik do igły. Gdy prowadnik znajdzie się na swoim miejscu w żyle, wyjmij go i wprowadź cewnik, aż dotrze do żyły.
Natychmiast po umieszczeniu cewnika podłącz do systemu przetwornika, aby zmierzyć centralne ciśnienie żylne. Następnie upewnij się, że elektrolit o szybkości wlewu glukozy 20 mililitrów na godzinę jest podłączony do jednego z centralnych portów liniowych. Następnie przez pozostały port podaje się sól fizjologiczną, aby zapobiec niedrożności cewnika.
Następnie wprowadź igłę 4-francuskiego cewnika tętniczego do tętnicy udowej. Następnie włóż przewód prowadnikowy pod kontrolą ultradźwięków, a następnie włóż cewnik. Po wprowadzeniu cewnika tętniczego podłącz przewód tętniczy systemu monitorowania rzutu serca i głowicy tętniczej bezpośrednio do portu monitora.
W tym samym czasie podłącz żylną jednostkę pomiarową monitora do centralnego przetwornika żylnego. Następnie zdezynfekuj okolice szyi za pomocą co najmniej trzech naprzemiennych rund jodu powidonu lub chlorheksydyny i alkoholu. Wykonaj 10-centymetrowe lewe nacięcie przytchawicze, przecinając linię między rękojeścią a kątem szczęki.
Aby odsłonić żyłę szyjną zewnętrzną, należy wyciąć tkankę boczną mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego i odizolować żyłę od otaczającej powięzi. Następnie użyj dwóch niewchłanialnych jedwabnych szwów zapętlonych wokół żyły, aby zamocować naczynie przed nakłuciem. Naciąć żyłę igłą venflonową o rozmiarze 18.
Po wejściu do żyły wycofaj igłę i włóż drut doprowadzający przez rurkę Venflon. Wyjmij rurkę venflon i włóż osłonę z 5-francuskim wprowadzaczem na przewód. Po włożeniu osłony wyjmij zarówno wprowadzacz, jak i przewód.
Natychmiast po włożeniu przepłukać osłonki 0,9% chlorkiem sodu, aby zapobiec tworzeniu się skrzepliny. Następnie zawiąż proksymalny szew jedwabny wokół osłony, aby zabezpieczyć go na miejscu. Następnie przymocuj uchwyt pochewki do mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego i zamknij skórę zszywkami.
Aby uzyskać wartości indeksu sercowego, należy wlać pięć mililitrowych bolusów 0,9% normalnej soli fizjologicznej przez centralny cewnik żylny. Na koniec zapisz średnią z dwóch kolejnych pomiarów. Po osiągnięciu stanu ustalonego po oprzyrządowaniu i zebraniu danych wyjściowych wywołaj wstrząs hipowolemiczny poprzez pobranie 30 mililitrów krwi na kilogram z żyły szyjnej w ciągu 30 minut.
Odczekaj 30 minut na stabilizację i nie podejmuj w tym czasie żadnych wysiłków resuscytacyjnych, aby naśladować opóźnienie w przybyciu zespołów ratownictwa medycznego. Model ten wykazał, że kontrolowany krwotok powodował zauważalne zmiany w parametrach hemodynamicznych, a także w perfuzji mózgowej i tkankowej. Po odstawieniu objętości obserwowano znaczną tachykardię i spadek średniego ciśnienia tętniczego krwi, wskaźnika objętości wyrzutowej, parametrów objętości krwi i przepływu krwi w tętnicy szyjnej, przy jednoczesnym wzroście wskaźnika ogólnoustrojowego oporu naczyniowego.
Wlew albuminy z hipertonicznym roztworem soli fizjologicznej powodował większe i dłuższe rozszerzanie objętości niż sama sól fizjologiczna normalna lub hipertoniczna ze znaczącymi różnicami w częstości akcji serca, wskaźniku objętości wyrzutowej i zmienności tętna ciśnienia. Wlew płynu wykazał również brak postępującego spadku po zwiększeniu objętości ciśnienia krwi i globalnego wskaźnika końcowej objętości rozkurczowej. Parametry perfuzji ogólnoustrojowej wykazały wzrost stężenia mleczanu, zmniejszenie wysycenia żył centralnych, wskaźnika dotlenienia tkanki skórnej i mózgowej.
Albumina hipertoniczna poprawiła parametry perfuzji wraz ze wzrostem przepływu krwi w tętnicy szyjnej i wskaźnika natlenienia tkanki mózgowej oraz znacznym spadkiem poziomu mleczanu. Utrzymuj głębokie znieczulenie przez cały czas trwania eksperymentu, aby osiągnąć stan stabilny przed indukcją wstrząsu, w tym temperaturę ciała i utrzymać stały rytm podczas pobierania krwi. Rejestracja i dalsza analiza mikrokrążenia podjęzykowego jest bardzo interesująca dla zbadania różnicy między krążeniem makro i mikro.
Z drugiej strony, te testy szkolne do oceny krzepnięcia są przydatne do analizy upośledzenia wywołanego hemodilucją po rozszerzeniu objętości.
Niniejszy artykuł stanowi szczegółowy przewodnik dla badaczy dotyczący opracowania modelu wstrząsu hemoragicznego u prosiąt. Model ten został zaprojektowany w celu badania efektów stosowania różnych płynów resuscytacyjnych i terapii w kontrolowanym środowisku.
Ustanowienie powtarzalnego modelu wstrząsu krwotocznego z kontrolowaną objętością u prosiąt rozwiązuje kluczowy problem w translacyjnych badaniach pediatrycznych, umożliwiając systematyczną ocenę strategii reanimacyjnych w sytuacjach, gdy badania kliniczne są ograniczone. Model ten zwiększa pewność prognostyczną w wyborze terapii i dostarcza informacji niezbędnych do dostosowania ryzyka przy wdrażaniu interwencji płynowych i lekowych w pediatrycznym wstrząsie. Jego ilościowe wyniki ułatwiają porównania między badaniami i całymi portfelami projektów, wzmacniając proces podejmowania decyzji na wczesnym etapie badań i rozwoju (R&D) w sektorze biofarmaceutycznym.
Model ten wpisuje się w kontinuum od etapu odkryć do badań przedklinicznych, umożliwiając testowanie hipotez, walidację celów terapeutycznych oraz analitykę porównawczą interwencji w wstrząsie krwotocznym u dzieci.