Name: Nowatorskie techniki obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo do oceny postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Poznaj nieinwazyjną mikrotomografię komputerową in vivo do monitorowania postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby u myszy. Ta metoda umożliwia analizę naczyniowej sieci wątrobowej i ocenę objętości krwi względnej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Rysunek 1 został utworzony za pomocą BioRender.com. Prace te były wspierane przez Grecką Fundację Badań i Innowacji (#3222 do A.C.). Anna Hadjihambi jest finansowana przez Instytut Hepatologii Rogera Williamsa, Fundację Badań nad Wątrobą.

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Obecnie zalecaną metodą diagnozowania i oceny stopnia zaawansowania NAFLD u ludzi jest biopsja wątroby, która niesie ze sobą ryzyko złożoności krwawienia, a także niedokładności pobierania próbek40. Wręcz przeciwnie, w modelach zwierzęcych taka diagnoza jest przeprowadzana za pomocą histologii post mortem, chociaż protokoły biopsji wątroby, która daje się przeżyć, są obecnie dostępne i zalecane, gdy pozwala na to projekt badania41. Zastosowanie histologii pośmiertnej oznacz...

Niealkoholowa stłuszczeniowa choroba wątroby (NAFLD) jest chorobą metaboliczną, która dotyka około 25% populacji i >80% osób chorobliwie otyłych1. Szacuje się, że jedna trzecia tych osób rozwija się w niealkoholowe stłuszczeniowe zapalenie wątroby (NASH), które charakteryzuje się stłuszczeniem wątroby, stanem zapalnym i zwłóknieniem2. NASH jest stadium choroby o znacznie wyższym ryzyku rozwoju marskości wątroby i raka wątrobowokomórkowego (HCC)3,4. Z tego powodu NASH jest obecnie drugą najczęstszą przyczyną przeszczepu wątroby i oczekuje się, że wkrótce stanie się najważniejszym predyktorem przeszczepu wątroby5,6,7. Pomimo rozpowszechnienia i nasilenia choroby, żadna terapia specyficzna dla choroby nie jest dostępna dla NAFLD, a istniejące metody leczenia mają na celu jedynie zwalczanie patologii związanych z chorobą, takich jak insulinooporność i hiperlipidemia5,6.
W ostatnich latach patofizjologiczna rola i adaptacje śródbłonka i ogólnie sieci naczyniowej tkanek metabolicznych, takich jak tkanka tłuszczowa i wątroba, zyskują coraz większe znaczenie w badaniach, zwłaszcza podczas otyłości i rozregulowania metabolizmu7,8. Śródbłonek jest monowarstwą komórkową, która wewnętrznie wyściela sieć naczyniową, działając jako bariera funkcjonalna i strukturalna. Przyczynia się również do różnych procesów fizjologicznych i patologicznych, takich jak zakrzepica, transport metabolitów, stan zapalny i angiogeneza9,10. W przypadku wątroby sieć naczyniowa charakteryzuje się między innymi obecnością wysoce wyspecjalizowanych komórek, określanych jako sinusoidalne komórki śródbłonka wątroby (LSEC). Komórki te nie mają błony podstawnej i mają wiele okien, co pozwala na łatwiejsze przenoszenie substratów między krwią a miąższem wątroby. Ze względu na ich charakterystyczne położenie anatomiczne i charakterystykę, LSEC prawdopodobnie odgrywają kluczową rolę w procesach patofizjologicznych wątroby, w tym w rozwoju zapalenia wątroby i zwłóknienia podczas NAFLD/NASH. Rzeczywiście, patologiczne, molekularne i komórkowe adaptacje, którym podlegają LSEC w przebiegu NAFLD, przyczyniają się do progresji choroby11. W szczególności zależna od LSEC angiogeneza wątrobowa, która ma miejsce podczas NAFLD, jest istotnie związana z rozwojem stanu zapalnego i progresją choroby do NASH lub nawet HCC12. Poza tym wczesna NAFLD związana z otyłością charakteryzuje się rozwojem insulinooporności w LSEC, co poprzedza rozwój zapalenia wątroby lub innych zaawansowanych objawów NAFLD13.
Dodatkowo, LSEC pojawiły się ostatnio jako centralne regulatory przepływu krwi w wątrobie i adaptacji sieci naczyniowej podczas chorób wątroby o różnych etiologiach14,15. Rzeczywiście, przewlekła choroba wątroby charakteryzuje się wyraźnym zwężeniem naczyń krwionośnych wewnątrz wątroby i zwiększonym oporem przepływu krwi, co przyczynia się do rozwoju nadciśnienia wrotnego16. W przypadku NAFLD do tego zjawiska przyczynia się kilka mechanizmów związanych z LSEC. Na przykład, insulinooporność specyficzna dla LSEC, jak wspomniano powyżej, jest związana ze zmniejszonym insulinozależnym rozszerzeniem naczyń krwionośnych wątroby13. Poza tym w trakcie choroby unaczynienie wątroby staje się bardziej wrażliwe na czynniki zwężające naczynia krwionośne, co dodatkowo przyczynia się do upośledzenia przepływu krwi w wątrobie i prowadzi do pojawienia się stresu ścinającego, co skutkuje zaburzeniem mikrokrążenia sinusoidalnego17. Fakty te sugerują, że układ naczyniowy jest kluczowym celem w chorobach wątroby. Niemniej jednak czynnikami ograniczającymi terminową diagnozę i monitorowanie NAFLD/NASH, a także opracowywanie potencjalnych terapii, są braki w spójnej charakterystyce mikrośrodowiska wątroby i struktury (mikro)naczyniowej, a także punktacji stopnia zaawansowania choroby w sposób czasoprzestrzenny i nieinwazyjny.
Obrazowanie mikrotomografii komputerowej (CT) jest obecnie złotym standardem nieinwazyjnej metody obrazowania do dokładnego przedstawiania informacji anatomicznych w żywym organizmie. Mikrotomografia komputerowa i rezonans magnetyczny to dwie uzupełniające się metody obrazowania, które mogą obejmować szeroki zakres patologii i zapewniają wyjątkową rozdzielczość i szczegółowość obrazowanych struktur i tkanek. Mikrotomografia komputerowa, w szczególności, jest bardzo szybkim i dokładnym narzędziem, które jest często używane do badania patologii, takich jak choroby kości i związane z nimi zmiany powierzchni kości18, oceny postępu zwłóknienia płuc w czasie19, diagnozowania raka płuc i jego stopnia zaawansowania20, a nawet badania patologii stomatologicznych21, bez specjalnego przygotowania (lub niszczenia) obrazowanych próbek.
Technologia obrazowania mikro-CT opiera się na różnych właściwościach tłumienia różnych organów pod względem interakcji promieniowania rentgenowskiego z materią. Narządy wykazujące duże różnice w tłumieniu promieniowania rentgenowskiego są przedstawiane na obrazach TK z wysokim kontrastem (tj. płuca wydają się ciemne, a kości jasne). Narządy o bardzo podobnych właściwościach tłumienia (różne tkanki miękkie) są trudne do odróżnienia na obrazach CT22. Aby rozwiązać to ograniczenie, specjalistyczne środki kontrastowe na bazie jodu, złota i bizmutu zostały szeroko przebadane pod kątem stosowania in vivo. Czynniki te zmieniają właściwości tłumiące tkanek, w których się gromadzą, są powoli usuwane z krążenia i umożliwiają równomierne i stabilne zmętnienie całego układu naczyniowego lub wybranych tkanek23.
W diagnostyce ludzi, obrazowanie CT i porównywalne techniki, takie jak frakcja tłuszczu o gęstości protonów pochodząca z MRI, są już używane do określania zawartości tłuszczu w wątrobie24,25. W kontekście NAFLD wysoki kontrast tkanek miękkich jest niezbędny do dokładnego rozróżnienia zmian patologicznych lub małych naczyń. W tym celu stosuje się środki kontrastowe zapewniające zwiększony kontrast charakterystyki tkanki wątroby. Takie narzędzia i materiały pozwalają na badanie wielu cech wątroby i możliwych przejawów patologii, takich jak architektura i gęstość sieci naczyniowej, odkładanie się lipidów/stłuszczenie oraz funkcjonalny wychwyt tkankowy/transfer lipidów (chylomikron) w wątrobie. Dodatkowo można również ocenić względną objętość krwi w wątrobie i średnicę żyły wrotnej. W bardzo krótkim czasie skanowania wszystkie te parametry dostarczają różnych i uzupełniających się informacji na temat oceny i progresji NAFLD, które można wykorzystać do opracowania nieinwazyjnej i szczegółowej diagnozy.
W tym artykule przedstawiamy krok po kroku protokół użycia nowatorskich technik obrazowania in vivo mikro-CT jako nieinwazyjnej metody oceny etapów progresji NAFLD. Korzystając z tego protokołu, można przeprowadzić podłużną analizę stłuszczenia wątroby i wychwytu funkcjonalnego tkanki, a także ocenę względnej objętości krwi, średnicy żyły wrotnej i gęstości sieci naczyniowej, i zastosować ją w mysich modelach choroby wątroby.

<table><tbody><tr><td>eXIA160</td><td>Binitio Biomedyczne, Inc.</td><td></td><td>https://www.binitio.com/?Page=Products</td></tr><tr><td>Dieta wysokotłuszczowa zawierająca 60% kilokalorii z tłuszczu</td><td>Research Diets, Nowy Brunszwik, NJ, USA</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Syrop kukurydziany o wysokiej zawartości fruktozy&nbsp;</td><td>Najlepsze smaki, maść</td><td>okulistyczna CA hfcs-1gallon</td><td></td></tr><tr><td>Lacrinorm&nbsp;</td><td>Bausch & Lomb</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Normalna dieta z 10% kilokalorii z tłuszczu&nbsp;</td><td>Research Diets, Nowy Brunszwik, NJ, USA</td><td>D12450</td><td></td></tr><tr><td>Viscover ExiTron nano 12000&nbsp;</td><td>Milteny Biotec, Bergisch Gladbach, Niemcy</td><td>130-095-698</td><td></td></tr><tr><td>VivoQuant</td><td>Invicro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>X-CUBE&nbsp;</td><td>Molecubes, Belgia</td><td></td><td>https://www.molecubes.com/systems/</td></tr></tbody></table>

nowatorskie techniki obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo do oceny postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby

Novel In Vivo Micro-Computed Tomography Imaging Techniques for Assessing the Progression of Non-Alcoholic Fatty Liver Disease

Niealkoholowa stłuszczeniowa choroba wątroby (NAFLD) jest rosnącym globalnym problemem zdrowotnym, a wpływ NAFLD jest potęgowany przez obecny brak skutecznych metod leczenia. Istotnymi czynnikami ograniczającymi terminową i trafną diagnozę (w tym klasyfikację) i monitorowanie NAFLD, a także opracowywanie potencjalnych terapii, są obecne braki w charakterystyce struktury mikrośrodowiska wątroby oraz punktacji stopnia zaawansowania choroby w sposób czasoprzestrzenny i nieinwazyjny. Korzystając z mysiego modelu NAFLD indukowanego dietą, zbadaliśmy zastosowanie technik obrazowania mikrotomografii komputerowej (CT) in vivo jako nieinwazyjnej metody oceny etapów progresji NAFLD, koncentrując się głównie na sieci naczyniowej wątroby ze względu na jej znaczący udział w dysregulacji wątroby związanej z NAFLD. Ta metodologia obrazowania pozwala na podłużną analizę stłuszczenia wątroby i funkcjonalnego wychwytu tkankowego, a także ocenę względnej objętości krwi, średnicy żyły wrotnej i gęstości sieci naczyniowej. Zrozumienie adaptacji sieci naczyniowej wątroby podczas progresji NAFLD i skorelowanie tego z innymi sposobami charakteryzowania postępu choroby (stłuszczenie, zapalenie, zwłóknienie) przy użyciu proponowanej metody może utorować drogę do ustanowienia nowych, bardziej wydajnych i powtarzalnych podejść do badań NAFLD u myszy. Oczekuje się również, że protokół ten zwiększy wartość przedklinicznych modeli zwierzęcych w badaniach nad rozwojem nowych terapii zapobiegających postępowi choroby.

W tym reprezentatywnym badaniu obrazowanie mikro-CT bez użycia środka kontrastowego wykazało wyższy procent tłuszczu w wątrobie myszy z NAFLD w porównaniu z grupą kontrolną (Tabela 2), co potwierdziło patologię. Przy zastosowaniu środka kontrastowego ExiTron oraz opisanej powyżej analizy architektury i gęstości sieci naczyniowej wątroby stwierdzono, że całkowita gęstość objętościowa sieci naczyniowej wątroby była wyższa u myszy z NAFLD w porównaniu z kontrolą (Rysunek 6,<str...

Korzystając z mysiego modelu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby (NAFLD) wywołanego dietą, opisujemy użycie nowatorskich technik obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo jako nieinwazyjnej metody oceny etapów progresji NAFLD, koncentrując się głównie na sieci naczyniowej wątroby ze względu na jej znaczący udział w dysregulacji wątroby związanej z NAFLD.

Nowatorskie techniki obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo do oceny postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a growing global health issue, and the impact of NAFLD is compounded by the current lack of effective ...

Uważamy ten protokół za istotny, ponieważ demonstruje nieinwazyjną, prostą i łatwą metodę oceny kluczowych wskaźników w czasie kluczowych wskaźników diagnozy chorób wątroby. Ta metodologia obrazowania pozwala na analizę w czasie stanu wątroby, ocenę względnej objętości krwi, średnicy żyły wrotnej, intensywności sieci naczyniowej, wszystkich ważnych parametrów patologii wątroby. Zrozumienie adaptacji wątrobowej sieci naczyniowej podczas progresji NAFLD i skorelowanie tego z określonymi markerami, takimi jak stłuszczenie, stan zapalny i zwłóknienie, może pomóc w ustaleniu nowych, skutecznych schematów terapii.Technika ta pomaga w identyfikacji takich markerów, a także zwiększa wartość myszy w badaniach przedklinicznych koncentrujących się na opracowaniu nowych terapii przeciwko postępowi choroby. Na początek umieść znieczulone zwierzę w kołysce tomografu komputerowego. Nałóż maść okulistyczną, zabezpiecz stożek nosowy i ustaw parametry skanowania na tomografie komputerowym.Przygotuj cewnik do żyły ogonowej i umieść mysz na łóżku, aby ogrzać ogon w ciepłej wodzie. Wprowadzić cewnik do żyły ogonowej i podać pierwszy środek kontrastowy w postaci wstrzyknięcia, wykonywanego powoli i ręcznie, trwającego od jednej do trzech minut. Następnie uzyskaj skany całego ciała i wątroby w różnych punktach czasowych.Postępuj zgodnie z tą samą procedurą przy podawaniu drugiego środka kontrastowego, 10 dni po ostatnim odczycie z pierwszym środkiem kontrastowym. Po załadowaniu pliku DICOM skanu przed kontrastem dostosuj kontrast, aby wyraźnie widzieć wątrobę, śledzionę i białą tkankę tłuszczową. W narzędziu 3D ROI wybierz opcję dodaj ROI, aby wygenerować wiele ROI w celu wykonania próbkowania w obszarach, w których wątroba, śledziona i tkanka tłuszczowa wydają się czyste, bez widocznych naczyń krwionośnych i tłuszczu.W trybie malowania wybierz opcję Sfera. Zaznacz pole Tylko 2D i wybierz średnicę ośmiu pikseli z menu rozwijanego, aby namalować ROI na danych. Z funkcji rozszerzania erozji wybierz opcję minus jedna erozja.Próbkowanie można przeprowadzić, segmentując obszary zainteresowania 2D za pomocą narzędzia Sfera na płaszczyźnie poprzecznej. Przejdź do nawigacji i wybierz opcję pokaż tabelę, aby wyświetlić tabelę kwantyfikacji zawierającą obliczone wartości jednostek pola psów gończych dla każdego zwrotu z inwestycji. Następnie wprowadź wartości do tego równania.Oblicz procentową zawartość tłuszczu w wątrobie. Załaduj plik DICOM eXIA scan i dostosuj kontrast, aby wyraźnie widzieć wątrobę, śledzionę i lewą komorę. W narzędziu 3D ROI wybierz opcję dodaj ROI, aby podzielić na segmenty wiele ROI dla wątroby.W trybie malowania wybierz opcję Tylko 2D, a następnie wybierz opcję Sfera dodaj średnicę ośmiu pikseli, aby namalować ROI na danych. Z funkcji rozszerzania erozji wybierz opcję minus jedna erozja. Określ nazwę i kolor dla każdego zwrotu z inwestycji, a następnie wybierz opcję pokaż tabelę, aby wyświetlić tabelę kwantyfikacji zawierającą obliczone wartości HU dla każdego ROI.Po powtórzeniu tych kroków w celu uzyskania narządu PV t0, wprowadź wartości do równania pokazanego na ekranie, aby wyodrębnić kontrast procentowy odpowiadający funkcjonalnemu transferowi lipidów wychwytu tkankowego. Załaduj plik DICOM skanowania ExiTron i dostosuj kontrast, aby wyraźnie zobaczyć sieć naczyniową wątroby. Wybierz opcję dodaj zwrot z inwestycji, aby wygenerować zwrot z inwestycji 3D dla wątroby.Zdefiniuj zwrot z inwestycji w wątrobę, zaznaczając żądany obszar. Następnie wybierz ROI w tle z selektora ROI. Kliknij ikonę Wykonaj cięcie, aby usunąć tło bez zmiany zwrotu z inwestycji w wątrobę.Aktywuj przeglądarkę projekcji o maksymalnej intensywności. Następnie, w obszarze algorytmów segmentacji oznaczonych ikoną magicznej różdżki, wybierz połączone próg, aby ponownie segmentować zwrot z inwestycji w wątrobę. Ustaw progi, wprowadzając wartości minimalne i maksymalne, a następnie uzyskaj sieć naczyniową.Ponownie usuń tło tkanki wątroby, aby uzyskać wyraźną reprezentację sieci naczyniowej. Po załadowaniu pliku DICOM skanowania ExiTron dostosuj kontrast, aby wyraźnie widzieć wątrobę, śledzionę i lewą komorę. Wybierz opcję dodaj ROI i podziel na segmenty ROI dla wątroby i dużego naczynia krwionośnego.Zdefiniuj warstwy segmentacji, aby wygenerować zwrot z inwestycji 2D dla każdej tkanki. Powtórz kroki dla pliku DICOM przed kontrastem, aby uzyskać średnią jasność wątroby przed wstrzyknięciem środka kontrastowego. W przypadku średnicy żyły wrotnej zlokalizuj płaszczyzny poprzeczne trzech do czterech warstw powyżej skrzyżowania żył krezkowych górnych i śledziony, a następnie przejdź do nawigacji, a następnie do sanityzacji odległości, wybierz linię, aby zmierzyć dokładną odległość między dwoma punktami.Średnie wartości kontrastu są prezentowane przez te pogrupowane dane. Test funkcjonalnego wychwytu tkankowego wykazał większą akumulację i wolniejszy klirens środka kontrastowego eXIA u myszy z niealkoholową stłuszczeniową chorobą wątroby w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej. Te reprezentatywne wyniki wskazują na różnice w procentowej zawartości tłuszczu w wątrobie, objętości sieci naczyniowej wątroby, średnicy żyły wrotnej i względnej objętości krwi w wątrobie między myszami z niealkoholową stłuszczeniową chorobą wątroby a zdrowymi osobami z grupy kontrolnej.Obrazowanie mikro-CT bez żadnego środka kontrastowego wykazało wyższy procent tłuszczu w wątrobie u myszy z niealkoholową stłuszczeniową chorobą wątroby w porównaniu z grupą kontrolną. Podobnie, u myszy z niealkoholową stłuszczeniową chorobą wątroby stwierdzono większą objętość wątrobowej sieci naczyniowej, względną objętość krwi wątroby i większą średnicę żyły wrotnej w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej. Najważniejszą rzeczą, o której należy pamiętać podczas próbowania tej techniki, jest ciągłe dokładne odwzorowywanie wybranego obszaru anatomicznego.Wybór niewłaściwego miejsca anatomicznego może prowadzić do niedokładnych wyników. Postępując zgodnie z tą metodologią i protokołem, można przeprowadzić dokładną ocenę stopnia zaawansowania choroby wątroby. W związku z tym może działać jako określona platforma do oceny skuteczności nowych leków.Technika ta toruje drogę nowym, łatwiejszym i dokładniejszym sposobom oceny patologii wątroby i inicjowania odpowiednich testów rozwoju leków.

novel-vivo-micro-computed-tomography-imaging-techniques-for-assessing

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Ta metoda opisuje użycie Kwantowej Mikrotomografii Komputerowej (MicroCT) do oceny morfologii, funkcji, perfuzji, metabolizmu i żywotności serca za pomocą jodowego środka kontrastowego u myszy z eksperymentalnie wywołanym niedokrwieniem mięśnia sercowego. Technika ta może być stosowana do nieniszczącego, wysokoprzepustowego, podłużnego obrazowania in vivo różnych zwierzęcych modeli chorób ludzkiego serca.

In vivo (in vivo) Ilościowa ocena struktury, funkcji, perfuzji i żywotności mięśnia sercowego za pomocą mikrotomografii komputerowej serca

Opisano montaż i użycie multimodalnego mikroendoskopu, który może rejestrować dane obrazu tkanek powierzchownych z parametrami fizjologicznymi tkanek, w tym stężeniem hemoglobiny, stężeniem melaniny i nasyceniem tlenem. Technika ta może być przydatna do oceny struktury tkanki i perfuzji oraz może być zoptymalizowana pod kątem indywidualnych potrzeb badacza.

Multimodalna platforma obrazowania i spektroskopii mikroendoskopii z wiązkami włókien do nieinwazyjnej analizy tkanek in vivo

Tutaj opisane są zoptymalizowane metody generowania in vivo i in vitro modeli stłuszczenia wątroby oraz analizy fenotypów stłuszczeniowych i związanych z nimi parametrów fizjologicznych.

Zoptymalizowana analiza stłuszczenia wątroby in vivo i in vitro

Opisujemy nieinwazyjne podejście do obrazowania multimodalnego oparte na Micro-CT i fluorescencyjnej tomografii molekularnej do podłużnej oceny modelu zwłóknienia płuc myszy wywołanego podwójnym wkropleniem dotchawiczym bleomycyny.

Multimodalne podejście do obrazowania oparte na mikrotomografii komputerowej i fluorescencyjnej tomografii molekularnej do podłużnej oceny zwłóknienia płuc wywołanego bleomycyną u myszy

Ten protokół opisuje użycie ulepszonej techniki ultradźwiękowej do nieinwazyjnej obserwacji i ilościowego oznaczania zmian w tkance wątroby w modelach niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby u gryzoni.

Zastosowanie obrazowania ultrasonograficznego i elastografii fali poprzecznej w szczurzym modelu NAFLD/NASH

Obecny protokół optymalizuje metody perfuzji/decelularyzacji wątroby in situ i mikroskopii dwufotonowej w celu stworzenia niezawodnej platformy do wizualizacji dynamiki przebudowy macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM) podczas niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH).

Obrazowanie 3D macierzy zewnątrzkomórkowej wątroby w mysim modelu niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby

Niniejsze badanie opisuje oparte na decelularyzacji metodologie wizualizacji i ilościowego określania wewnątrzmięśniowej tkanki tłuszczowej (IMAT) poprzez nienaruszoną objętość mięśni, a także ilościowe określanie metryk poszczególnych adipocytów składających się na IMAT.

Kwantyfikacja nacieku tkanki tłuszczowej mięśni szkieletowych na podstawie decelularyzacji

W tym protokole omawiamy implementację modelu udanego ortotopowego przeszczepu wątroby (OLT) u myszy. Dodatkowo omówiono adiuwanty do dalszej analizy drożności przeszczepu allogenicznego po udanym OLT u myszy, w szczególności z wykorzystaniem skanów tomografii mikrokomputerowej (microCT).

Udany ortotopowy przeszczep wątroby u myszy z wykorzystaniem angiografii tomografii mikrokomputerowej

To badanie wprowadza unikalną metodę kwantyfikacji 3D rozkładu frakcji tłuszczowej wątroby (LFF) przy użyciu rezonansu magnetycznego Dixona (Dixon MRI). Mapy LFF, pochodzące z obrazów w fazie i w fazie wodnej, są zintegrowane z konturami wątroby 3D w celu rozróżnienia wzorców LFF między wątrobą normalną a stłuszczoną, umożliwiając precyzyjną ocenę zawartości tłuszczu w wątrobie.

Technika kwantyfikacji 3D do analizy rozkładu frakcji tłuszczowej wątroby przy użyciu rezonansu magnetycznego Dixona

Protokół ten wprowadza nowoczesne, wielokrotnego użytku narzędzie do obrazowania wątroby (RHIT) do mikroskopii śródżyciowej (IVM) żywych myszy, które zwiększa stabilność tkanek podczas szybkich i ostrych eksperymentów. Konstrukcja RHIT, drukowana w 3D, oferuje opłacalną produkcję, skalowalność i wszechstronność, umożliwiając długotrwałą obserwację procesów metabolicznych u myszy o różnych rozmiarach.

Wielokrotnego użytku narzędzie do obrazowania wątroby: wielokrotnego użytku narzędzie drukowane w 3D do mikroskopii śródżyciowej wątroby

Poznaj nieinwazyjną mikrotomografię komputerową in vivo do monitorowania postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby u myszy. Ta metoda umożliwia analizę naczyniowej sieci wątrobowej i ocenę objętości krwi względnej.

Nowatorskie techniki obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo do oceny postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby (Wideo) | JoVE Journal

Nowatorskie techniki obrazowania mikrotomografii komputerowej in vivo do oceny postępu niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby

Przeglądaj więcej filmów