Name: Multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań i częstotliwości ze skanowaniem liniowym (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-01T14:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Poznaj multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań VSFG i częstotliwości ze skanowaniem liniowym. Ta metoda umożliwia badanie struktur biologicznych z rozdzielczością mikroskopijną.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Rozwój instrumentu jest wspierany przez Grant NSF CHE-1828666. ZW, JCW i WX są wspierane przez National Institutes of Health, National Institute of General Medical Sciences, Grant 1R35GM138092-01. BY jest wspierany przez Stowarzyszenie Promocji Innowacji Młodzieży Chińskiej Akademii Nauk (CAS, 2021183).

Using a VSFG Microscope for Multimodal, Rapid, Hyperspectral Chemical Analysis

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Najbardziej krytyczne kroki to od 1,42 do 1,44. Bardzo ważne jest, aby dobrze ustawić soczewkę obiektywu, aby uzyskać optyczną rozdzielczość przestrzenną. Ważne jest również, aby zebrać emitowany sygnał, przekaźnik i wyświetlić wiązkę skanującą jako linię w szczelinach wejściowych. Odpowiednie wyrównanie gwarantowałoby najlepszą rozdzielczość i stosunek sygnału do szumu. W przypadku typowej próbki, takiej jak arkusze SDS@2 β-CD 100 μm na 100 μm, obraz o dobrej rozdzielczości (rozdzielczość ~1 μm) z wysokim stosunkiem syg...

Generowanie drgań o sumie częstotliwości (VSFG), nieliniowa technika optyczna drugiego rzędu1,2, była szeroko stosowana jako narzędzie spektroskopowe do chemicznego profilowania próbek dopuszczonych do symetrii3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19, 20,21,22. Tradycyjnie, VSFG był stosowany do układów międzyfazowych8,9,10,11 (tj. gaz-ciecz, ciecz-ciecz, gaz-ciało stałe, ciało stałe-ciecz), które nie mają symetrii inwersji - wymogu aktywności VSFG. Ta aplikacja VSFG dostarczyła bogactwo szczegółów molekularnych zakopanych interfejsów12,13, konfiguracje cząsteczek wody na interfejsach14,15,16,17,18, oraz związki chemiczne na interfejsach19,20,21,22.
Chociaż VSFG był potężny w określaniu gatunków molekularnych i konfiguracji na stykach, jego potencjał w pomiarze struktur molekularnych materiałów pozbawionych centrów inwersji nie został wykorzystany. Dzieje się tak częściowo dlatego, że materiały mogą być niejednorodne pod względem środowiska chemicznego, składu i układu geometrycznego, a tradycyjny spektrometr VSFG ma duży obszar oświetlenia rzędu 100μm2. W związku z tym tradycyjna spektroskopia VSFG dostarcza uśrednionych zespołowo informacji o próbce w typowym obszarze oświetlenia 100μm2. To uśrednianie zespołów może prowadzić do anulowania sygnałów między dobrze uporządkowanymi domenami o przeciwstawnych orientacjach i błędnej charakterystyki lokalnych heterogeniczności15,20,23,24.
Dzięki postępom w zakresie obiektywów mikroskopowych o wysokiej aperturze numerycznej (NA), opartych na refleksach (geometrie Schwarzschilda i Cassegraina), które są prawie wolne od aberracji chromatycznych, rozmiar ostrości dwóch wiązek w eksperymentach VSFG może zostać zmniejszony ze 100μm2 do 1-2μm2, a w niektórych przypadkach submikron25. Uwzględniając ten postęp technologiczny, nasza grupa i inni rozwinęli VSFG w platformę mikroskopową20,23,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36. Ostatnio wdrożyliśmy odwrócony układ optyczny i schemat wykrywania szerokopasmowego37, który umożliwia bezproblemowe zbieranie obrazów multimodalnych (VSFG, generacja drugiej harmonicznej (SHG) i optyczne jasne pole). Obrazowanie multimodalne umożliwia szybką inspekcję próbek za pomocą obrazowania optycznego, korelację różnych typów obrazów ze sobą i lokalizowanie pozycji sygnałów na obrazach próbek. Dzięki achromatycznej optyce oświetlenia i wyborowi impulsowego źródła oświetlenia laserowego, ta platforma optyczna pozwala na przyszłą bezproblemową integrację dodatkowych technik, takich jak między innymi mikroskopia fluorescencyjna38 i mikroskopia Ramana.
W tym nowym układzie badano próbki takie jak organizacje hierarchiczne i klasa molekularnych samoorganizacji (MSA). Materiały te obejmują kolagen i biomimetykę, w których zarówno skład chemiczny, jak i organizacja geometryczna są ważne dla ostatecznej funkcji materiału. Ponieważ VSFG jest nieliniowym sygnałem optycznym drugiego rzędu, jest szczególnie wrażliwy na układy międzycząsteczkowe39,40, takie jak odległość międzycząsteczkowa lub kąty skrętu, co czyni go idealnym narzędziem do ujawniania zarówno składu chemicznego, jak i układów molekularnych. Niniejsza praca opisuje modalności VSFG, SHG i jasnego pola głównego instrumentu składającego się z lasera na ciele stałego domieszkowanego iterbem, który pompuje optyczny wzmacniacz parametryczny (OPA), domowego multimodalnego mikroskopu odwróconego i monochromatorowego analizatora częstotliwości sprzężonego z dwuwymiarowym detektorem ładowanego urządzenia sprzężonego (CCD)27. Dostępne są procedury budowy i wyrównywania krok po kroku oraz pełna lista części konfiguracji. Dogłębna analiza MSA, której podstawowa podjednostka molekularna składa się z jednej cząsteczki siarczanu sodu i dodecylu (SDS), powszechnego środka powierzchniowo czynnego, oraz dwóch cząsteczek β-cyklodekstryny (β-CD), znanej w niniejszym dokumencie jako SDS@2 β-CD, jest również podana jako przykład, aby pokazać, w jaki sposób VSFG może ujawnić specyficzne dla cząsteczki szczegóły geometryczne zorganizowanej materii. Wykazano również, że specyficzne dla substancji chemicznych szczegóły geometryczne MSA można określić za pomocą podejścia opartego na solverze funkcji sieci neuronowych.

<table><tbody><tr><td>1x Kamera</td><td>Por Thorlabs</td><td>WFA4100</td><td>podłącz kamerę do mikroskopu lub układu optycznego</td></tr><tr><td>Lustro pryzmatyczne kątowe 25,0 mm, chronione złoto</td><td>Thorlabs</td><td>MRA25-M01</td><td>odbijają światło i wytwarzają odbicie wsteczne, przekierowując światło z powrotem wzdłuż jego pierwotnej ścieżki</td></tr><tr><td>3" Uniwersalny uchwyt na słupek-5 sztuk</td><td>Thorlabs</td><td>UPH3-P5</td><td>przytrzymuje i podpiera słupki o różnych rozmiarach i konfiguracjach</td></tr><tr><td>Płyta klatki od 30 mm do 60 mm, grubość 4 mm</td><td>Thorlabs</td><td>LCP4S</td><td>przekształca się między systemem koszykowym 30 mm a systemem klatek 60 mm</td></tr><tr><td>Korpus Cerna o wysokości 500 mm z CEA1500 ramienia Epi zapewniają</td><td></td><td></td><td>funkcję umożliwiania technik oświetlenia najwyższej jakości w mikroskopii</td></tr><tr><td>60 mm montowany w klatce i oslash; 50,0 mm Iris</td><td>Thorlabs</td><td>LCP50S</td><td>kontrolują ilość światła przechodzącego przez układ optyczny</td></tr><tr><td>Wspornik montażowy klatki 60 mm</td><td>Thorlabs</td><td>LCP01B</td><td>montuje i ustawia system klatki 60 mm w konfiguracjach optycznych</td></tr><tr><td>Etalon</td><td>SLS Optics Ltd.</td><td>Dostosowane</td><td>generowanie wąskopasmowego światła 1030 nm&nbsp;</td></tr><tr><td>Wspornik montażowy płyty klatki</td><td>Thorlabs</td><td>KCB2</td><td>przytrzymaj i wyreguluj lustra pod precyzyjnym kątem</td></tr><tr><td>CCD</td><td>Andor Technologies</td><td>Newton&nbsp;</td><td>Przetwornik CCD 2D dla częstotliwości i rozdzielczości przestrzennej</td></tr><tr><td>Współliniowy optyczny wzmacniacz parametryczny</td><td>Konwersja światła</td><td>Orpheus-One-HP</td><td>Przestrajalny generator światła MID</td></tr><tr><td>Chlorek miedzi</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>A16064.30</td><td>Komponent do samodzielnego montażu</td></tr><tr><td>Dostosowane lustro dichroiczne</td><td>Newport</td><td>Dostosowane</td><td>selektywnie odbija lub przepuszcza światło w oparciu o jego długość fali lub polaryzację</td></tr><tr><td>Adapter Ext do M32 Int</td><td>Thorlabs</td><td>SM1A34</td><td>zapewnia kompatybilność i ułatwia łączenie komponentów o różnych typach gwintów</td></tr><tr><td>Obiektyw refrakcyjny z korekcją nieskończoności</td><td>Zeiss</td><td>420150-9900-000</td><td>Obiektyw</td></tr><tr><td>Schwarzschilda z korekcją nieskończoności Pike</td><td>Technologies Inc.</td><td>891-0007</td><td>Obiektyw odblaskowy</td></tr><tr><td>Węglik laserowy</td><td>, konwersja światła</td><td>C18212</td><td>Źródło lasera</td></tr><tr><td>M32x0,75 Zewnętrzne do wewnętrznego RMS</td><td>Thorlabs</td><td>M32RMSS</td><td>dostosować lub przekonwertować rozmiar gwintu lub typ obiektywów mikroskopowych&nbsp;</td></tr><tr><td>M32x0,75 Zewnętrzne do M27x0,75 Wewnętrzne torby do grawerowania</td><td></td><td>M32M27S</td><td>dostosować lub przekonwertować rozmiar gwintu lub typ obiektywów mikroskopu&nbsp;</td></tr><tr><td>Ręczny moduł ostrości kondensatora o średniej wysokości</td><td>Thorlabs</td><td>ZFM1030</td><td>regulację ostrości elementu optycznego</td></tr><tr><td>Monochromator</td><td>Andor Technologies</td><td>Shamrock 500i</td><td>Zapewnia rozdzielczość częstotliwości dla każdego skanowania liniowego</td></tr><tr><td>Zmotoryzowany moduł z 1" skokiem dla ramion montowanych na krawędzi</td><td>Thorlabs</td><td>ZFM2020</td><td>kontrolować pionowe położenie obiektywu do obrazowania</td></tr><tr><td>Nanopozycjoner</td><td>szalony Laboratoria miejskie Inc.</td>Skaner rezonansowy <td>MMP3</td><td>3D</td></tr><tr><td>próbka</td><td>EOPC</td><td>SC-25</td><td>325 Hz skaner wiązki rezonansowej</td></tr><tr><td>Kolorowa kamera CCD RGB Kamera</td><td>Thorlabs</td><td>DCU224C</td><td>Brightfield, wycofana, ale inne kamery będą działać równie dobrze</td></tr><tr><td>Soczewka tubusu RGB</td><td>Thorlabs</td><td>ITL200</td> kolekcja <td>białego światła</td></tr><tr><td>Kątowa kinematyczna płytka stykowa</td><td>Thorlabs</td><td>OPX2400</td><td>zawierają mechanizm przesuwny z dwiema stałymi pozycjami</td></tr><tr><td>Kątowe mocowanie lustra kinematycznego, 30 mm</td><td>Thorlabs</td><td>KCB1</td><td>przytrzymują i regulują lustra pod precyzyjnym kątem</td></tr><tr><td>Kątowe mocowanie lustra kinematycznego, 60 mm</td><td>Thorlabs</td><td>KCB2</td><td>przytrzymują i regulują lustra pod precyzyjnym kątem</td></tr><tr><td>SM2, ramię klatkowe 60 mm do stolika ostrości Cerna</td><td>Thorlabs</td><td>CSA2100</td><td>bezpiecznie montować i ustawiać kondensatory</td></tr><tr><td>Zatrzaskowa osłona klatki do klatki 60 mm, 24 cale długości,</td> <td>Thorlabs</td><td>C60L24</td><td>zamyka i chroni elementy wewnątrz klatki</td></tr><tr><td>Dodecylosiarczan sodu</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>J63394. AK</td><td>Element do samodzielnego montażu</td></tr><tr><td>Trzykanałowy kontroler i skrzynka pokręteł do 1" Cerna Travel Stages</td><td>Thorlabs</td><td>MCM3001</td><td>sterowania ZFM2020</td></tr><tr><td>Soczewka tubusu</td><td>Thorlabs</td><td>LA1380-AB - Odbiór sygnału N-BK7</td><td>SFG</td></tr><tr><td>Zestaw widocznych diod LED</td><td>Thorlabs</td><td>WFA1010</td><td>zapewniają oświetlenie w konfiguracji obrazowania</td></tr><tr><td>Źródło światła białego</td><td>Thorlabs</td><td>WFA1010</td><td>Źródło oświetlenia światłem białym do obrazowania w jasnym polu</td></tr><tr><td>WPH05M-1030 - &Oslash; 1/2" Płyta półfalowa o zerowym rzędzie, & Oslash; Montaż 1", 1030 nm&nbsp;</td><td>Thorlabs</td><td>WPH05M-1030</td><td>zmienia stan polaryzacji przechodzącego przez niego światła</td></tr><tr><td>WPLQ05M-3500 - &Oslash; 1/2" montowana płyta ćwierćfalowa niskiego rzędu, 3,5 i mikro; m&nbsp;</td><td>Thorlabs</td><td>WPLQ05M-3500</td><td>zmieniają stan polaryzacji przechodzącego przez nie światła</td></tr><tr><td>Oś X Stalowe stopnie suwakowe o długim skoku</td><td>Optosigma</td><td>TSD-65122CUU</td><td>, które zapewniają wydłużony skok w kierunku poziomym (X)</td></tr><tr><td>XT95 4-calowy nośnik szynowy</td><td>Thorlabs</td><td>XT95RC4</td><td>montażu i pozycjonowania elementów optycznych</td></tr><tr><td>Etap translacji osi XY z obrotem</td> <td>o 360 stopniThorlabs</td><td>XYR1</td><td>precyzyjny ruch i pozycjonowanie obiektów w dwóch wymiarach, wraz z możliwością obracania platformy</td></tr><tr><td>Translator liniowy XY(1/2") z centralnym otworem przelotowym SM1</td><td>Thorlabs</td><td>XYT1</td><td>zapewniają precyzyjny ruch i pozycjonowanie w dwóch wymiarach</td></tr><tr><td>Konwersja światła</td><td>lasera półprzewodnikowego domieszkowanego Yb</td><td>CB3-40W</td><td>Laser nasienny</td></tr><tr><td>&beta;-Cyklodekstryna</td><td>Thermo Fischer Naukowy</td><td>J63161.22</td><td>Komponent do samodzielnego montażu</td></tr></tbody></table>

multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań i częstotliwości ze skanowaniem liniowym

Multimodal Nonlinear Hyperspectral Chemical Imaging Using Line-Scanning Vibrational Sum-Frequency Generation Microscopy

Generowanie oscylacyjnej sumy częstotliwości (VSFG), nieliniowy sygnał optyczny drugiego rzędu, jest tradycyjnie używany do badania cząsteczek na granicy faz jako technika spektroskopowa o rozdzielczości przestrzennej ~100 μm. Jednak spektroskopia nie jest czuła na niejednorodność próbki. Aby badać mezoskopowo heterogeniczne próbki, wraz z innymi przesunęliśmy granicę rozdzielczości spektroskopii VSFG do poziomu ~1 μm i skonstruowaliśmy mikroskop VSFG. Ta technika obrazowania może nie tylko określić morfologię próbki poprzez obrazowanie, ale także zarejestrować szerokopasmowe widmo VSFG w każdym pikselu obrazów. Będąc nieliniową techniką optyczną drugiego rzędu, jej reguła wyboru umożliwia wizualizację niecentrosymetrycznych lub chiralnych samoorganizujących się struktur powszechnie spotykanych między innymi w biologii, materiałoznawstwie i bioinżynierii. W tym artykule publiczność zostanie poprowadzona przez konstrukcję odwróconej transmisji, która pozwala na obrazowanie nieustalonych próbek. Praca ta pokazuje również, że mikroskopia VSFG może rozwiązywać specyficzne chemicznie informacje geometryczne poszczególnych samodzielnie składających się arkuszy, łącząc je z solverem funkcji sieci neuronowych. Na koniec, obrazy uzyskane w konfiguracjach jasnego pola, SHG i VSFG różnych próbek pokrótce omawiają unikalne informacje ujawnione przez obrazowanie VSFG.

<img alt="Schemat molekularny z układem spektroskopii VSFG do analizy sygnału, przedstawiający widoki z góry i z boku." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65388/65388fig05.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 5"> 
Rycina 5: Struktura molekularna, morfologia i potencjalna orientacja SDS@β-CD. (A) Widok z góry oraz (B) widok z boku struktury chemicznej SDS@β-CD. (C</s...

Multimodalny, szybki system obrazowania hiperspektralnego został opracowany w celu uzyskania szerokopasmowych obrazów generowania oscylacyjnej sumy częstotliwości (VSFG), wraz z modalnościami obrazowania jasnego pola i generacji drugiej harmonicznej (SHG). Ze względu na to, że częstotliwość podczerwieni rezonansuje z drganiami molekularnymi, ujawnia się mikroskopijna wiedza o morfologii strukturalnej i mezoskopowej próbek dopuszczonych do symetrii.

Multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań i częstotliwości ze skanowaniem liniowym

Vibrational sum-frequency generation (VSFG), a second-order nonlinear optical signal, has traditionally been used to study molecules at interfaces as a ...

Naszym celem jest zbadanie mezoskopowo niejednorodnych próbek samoorganizujących się, takich jak tkanki biologiczne, w celu ujawnienia ich składu chemicznego i układów molekularnych. Badamy, w jaki sposób mikroskopijny układ i mezoskopowa morfologia tych materiałów własnych odnoszą się do ich mikroskopijnych właściwości. Dzięki postępom w zakresie obiektywów mikroskopowych o dużej aperturze numerycznej i odbiciu, wraz z innymi zademonstrowaliśmy oscylacyjny mikroskop generujący o sumie częstotliwości o rozdzielczości jednego mikrona kwadratowego, który może jednocześnie rejestrować obrazy miękkich materiałów, a także przestrzennie rozdzielać widmo, tworząc tak zwane obrazy hiperspektralne.Obrazowanie hiperspektralne rejestruje dane eksperymentalne w wielu wymiarach, dwa w przestrzeniach, jeden w częstotliwości i ewentualnie jeden w czasie. Jednak szybkie gromadzenie, przechowywanie i analizowanie tak dużych zbiorów danych w celu maksymalizacji informacji pozostaje wyzwaniem. Próbkowanie obrazu tylko w celu zebrania przydatnych punktów danych jest również trudne.Opracowując szybszą technologię skanowania liniowego, mogliśmy 100-krotnie przyspieszyć czas pozyskiwania danych. Ponadto mikroskop jest kompatybilny z generacją częstotliwości sumarycznej (SFG), generacją drugiej harmonicznej (SHG), a także z obrazowaniem szerokokątnym. Obrazowanie multimodalne umożliwia szybką inspekcję próbek za pomocą obrazowania optycznego i korelacji różnych modalności obrazowania.Obrazowanie SHG wspomaga technikę optyczną naszej techniki, ale bez spektralnej zdolności rozdzielczej, jest szeroko stosowane w biofizyce. Nasz mikroskop SFG będzie teraz w stanie dostarczyć potężnych informacji na poziomie molekularnym, których obecnie brakuje w badaniach biofizycznych tkanek miękkich.

multimodal-nonlinear-hyperspectral-chemical-imaging-using-line

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Obrazowanie spektralne stało się niezawodnym rozwiązaniem do identyfikacji i separacji wielu sygnałów fluorescencyjnych w jednej próbce i może łatwo odróżnić interesujące sygnały od tła lub autofluorescencji. Obrazowanie hiperspektralne ze skanowaniem wzbudzenia ulepsza tę technikę, skracając niezbędny czas akwizycji obrazu przy jednoczesnym zwiększeniu stosunku sygnału do szumu.

Mikroskopia obrazowania hiperspektralnego ze skanowaniem wzbudzenia w celu skutecznego rozróżniania sygnałów fluorescencyjnych

W tym manuskrypcie opisana jest implementacja mikroskopu z wymuszonym rozpraszaniem Ramana (SRS), uzyskanego przez integrację eksperymentalnego zestawu SRS z laserowym mikroskopem skaningowym. Mikroskop SRS oparty jest na dwóch femtosekundowych (fs) źródłach laserowych, Ti-Sapphire (Ti:Sa) i zsynchronizowanym optycznym oscylatorze parametrycznym (OPO).

Wdrożenie mikroskopu nieliniowego opartego na wymuszonym rozpraszaniu Ramana

Ten artykuł przedstawia integrację modułu spektralnego ogniskowania i lasera impulsowego o podwójnym wyjściu, umożliwiającego szybkie obrazowanie hiperspektralne nanocząsteczek złota i komórek rakowych. Praca ta ma na celu zademonstrowanie szczegółów multimodalnych nieliniowych technik optycznych na standardowym laserowym mikroskopie skaningowym.

Obrazowanie biomolekularne wychwytu komórkowego nanocząstek przy użyciu multimodalnej nieliniowej mikroskopii optycznej

Ten artykuł bezpośrednio porównuje rozdzielczość, czułość i kontrasty obrazowania stymulowanego rozpraszania Ramana (SRS) i spójnego rozpraszania anty-Stokesa Ramana (CARS) zintegrowanych w tej samej platformie mikroskopowej. Wyniki pokazują, że CARS ma lepszą rozdzielczość przestrzenną, SRS daje lepsze kontrasty i rozdzielczość spektralną, a obie metody mają podobną czułość.

Bezpośrednie porównanie hiperspektralnie stymulowanego rozpraszania Ramana i koherentnej mikroskopii rozpraszania Ramana antystokesa do obrazowania chemicznego

Przedstawiamy protokół do pozyskiwania obrazów chemicznych za pomocą mikroskopii SRS (ang. broadband stimulated Raman scattering). Opierając się na mikroskopie SRS, który działa z różnicową detekcją wielokanałową typu lock-in, protokół opisuje przygotowanie próbki, regulację aparatury SRS i chemometrię w celu rozplątania różnych składników chemicznie niejednorodnych próbek.

Multipleksowe obrazowanie chemiczne oparte na szerokopasmowej mikroskopii rozpraszania Ramana stymulowanego

Korzystając z platformy multimodalnej łączącej metody obrazowania optycznego bez znaczników, opracowaliśmy protokół do wizualizacji i ilościowego określania dynamiki komórkowej i metabolizmu. Dzięki obrazowaniu za pomocą fluorescencji wielofotonowej, generowania drugiej harmonicznej i wymuszonej mikroskopii rozpraszania Ramana możemy uzyskać całościowy przegląd środowiska komórkowego i molekularnego.

Multimodalna platforma obrazowania optycznego do badania metabolizmu komórkowego

Mikroskop szerokokątowy z transformatem Fouriera, oparty na kompaktowym i ultrastabilnym interferometrze dwułamannym, umożliwia równoległe pozyskiwanie widm dla wszystkich pikseli detektora 2D. Podejście w dziedzinie czasowej umożliwia rozplątanie sygnałów fotoluminescencyjnych i Ramana oraz umożliwia szybkie mapowanie Ramana (~5 ms/piksel) z rozdzielczością przestrzenną ~1 μm i spektralną 23 cm-1 .

Wielomodalny mikroskop Ramana z szeroką polową transformacją Fouriera

Protokół ten przedstawia przewodnik krok po kroku dotyczący techniki mikroskopowej SLAM (Simultaneous Label-free Autofluorescence Multi-harmonic), w tym szczegółowe informacje na temat generowania laserowego źródła światła, przygotowania próbki tkanki, przeprowadzania obrazowania i analizowania danych. SLAM rozwija mikroskopię nieliniową, mierząc cztery komplementarne kontrasty bez znaczników w celu zbadania mikrośrodowiska tkankowego.

Jednoczesna autofluorescencyjna mikroskopia wieloharmoniczna bez znaczników

Chemia biomimetyczna oparta na rodnikach została zastosowana do tworzenia bibliotek niezbędnych do rozwoju biomarkerów.

Wolne rodniki w biologii chemicznej: od zachowania chemicznego do rozwoju biomarkerów

Opisany jest prosty protokół do określania neutralnej zawartości lipidów w komórkach glonów za pomocą procedury barwienia czerwienią Nilu. Ta oszczędzająca czas technika stanowi alternatywę dla tradycyjnych protokołów kwantyfikacji lipidów opartych na grawimetrii. Został zaprojektowany z myślą o konkretnym zastosowaniu monitorowania wydajności bioprocesów.

Prosty i szybki protokół pomiaru neutralnych lipidów w komórkach glonów za pomocą fluorescencji

Poznaj multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań VSFG i częstotliwości ze skanowaniem liniowym. Ta metoda umożliwia badanie struktur biologicznych z rozdzielczością mikroskopijną.

Multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań i częstotliwości ze skanowaniem liniowym (Wideo) | JoVE Journal

Multimodalne nieliniowe hiperspektralne obrazowanie chemiczne przy użyciu mikroskopii generacji drgań i częstotliwości ze skanowaniem liniowym

Przeglądaj więcej filmów