Name: Badania przesiewowe kanałów jonowych w komórkach nowotworowych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-16T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: Poznaj metody badania kanałów jonowych w komórkach nowotworowych i ich znaczenie dla terapii onkologicznej. Odkryj, jak modulatory receptorów GABAA mogą osłabiać komórki rakowe.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują za wsparcie ze strony Fundacji Rodzinnej Thomasa E. i Pameli M. Mischell dla S.S. oraz Fundacji Harolda C. Schotta fundującej Harold C. Schott Endowed Chair, UC College of Medicine, dla S.S.

Pharmacological Targeting of Ion Channels to Treat Solid Tumors

<ol><li>Prevarskaya, N., Skryma, R., Shuba, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channels+in+cancer%3A+Are+cancer+hallmarks+oncochannelopathies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Ion channels in cancer: Are cancer hallmarks oncochannelopathies.</a> Physiological Reviews. 98 (2), 559-621 (2018).</li>
<li>Rao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand-gated+neurotransmitter+receptors+as+targets+for+treatment+and+management+of+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Ligand-gated neurotransmitter receptors as targets for treatment and management of cancers.</a> Frontiers in Physiology. 13, 839437(2022).</li>
<li>Mohr, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer-associated+intermediate+conductance+Ca2%2B-activated+K%2B+channel+KCa3.1%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Cancer-associated intermediate conductance Ca2+-activated K+ channel KCa3.1.</a> Cancers. 11 (1), 109(2019).</li>
<li>Fels, B., Bulk, E., Petho, Z., Schwab, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+TRP+channels+in+the+metastatic+cascade%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals%22%5BJournal%5D)">The role of TRP channels in the metastatic cascade.</a> Pharmaceuticals. 11 (2), 48(2018).</li>
<li>Eil, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionic+immune+suppression+within+the+tumour+microenvironment+limits+T+cell+effector+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Ionic immune suppression within the tumour microenvironment limits T cell effector function.</a> Nature. 537 (7621), 539-543 (2016).</li>
<li>Haustrate, A., Hantute-Ghesquier, A., Prevarskaya, N., Lehen'kyi, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoclonal+antibodies+targeting+ion+channels+and+their+therapeutic+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Monoclonal antibodies targeting ion channels and their therapeutic potential.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 606(2019).</li>
<li>Kischel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channels%3A+New+actors+playing+in+chemotherapeutic+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Ion channels: New actors playing in chemotherapeutic resistance.</a> Cancers. 11 (3), 376(2019).</li>
<li>Tuszynski, J., Tilli, T. M., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channel+and+neurotransmitter+modulators+as+electroceutical+approaches+to+the+control+of+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Design%22%5BJournal%5D)">Ion channel and neurotransmitter modulators as electroceutical approaches to the control of cancer.</a> Current Pharmaceutical Design. 23 (32), 4827-4841 (2017).</li>
<li>Kale, V. P., Amin, S. G., Pandey, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+ion+channels+for+cancer+therapy+by+repurposing+the+approved+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">Targeting ion channels for cancer therapy by repurposing the approved drugs.</a> Biochimica Biophysica Acta. 1848 (10), 2747-2755 (2015).</li>
<li>Wickenden, A., Priest, B., Erdemli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ion+channel+drug+discovery%3A+Challenges+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Medicinal+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Ion channel drug discovery: Challenges and future directions.</a> Future Medicinal Chemistry. 4 (5), 661-679 (2012).</li>
<li>Rocha, P. R. F., Elghajiji, A., Tosh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasensitive+system+for+electrophysiology+of+cancer+cell+populations%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectricity%22%5BJournal%5D)">Ultrasensitive system for electrophysiology of cancer cell populations: A review.</a> Bioelectricity. 1 (3), 131-138 (2019).</li>
<li>Sengupta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B15-GABAA+receptors+negatively+regulate+MYC-amplified+medulloblastoma+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">α5-GABAA receptors negatively regulate MYC-amplified medulloblastoma growth.</a> Acta Neuropathologica. 127 (4), 593-603 (2014).</li>
<li>Jonas, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+in+vivo+testing+of+compounds+targeting+Group+3+medulloblastomas+using+an+implantable+microdevice+as+a+new+paradigm+for+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">First in vivo testing of compounds targeting Group 3 medulloblastomas using an implantable microdevice as a new paradigm for drug development.</a> Journal of Biomedical Nanotechnology. 12 (6), 1297-1302 (2016).</li>
<li>Kallay, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulating+native+GABAA+receptors+in+medulloblastoma+with+positive+allosteric+benzodiazepine-derivatives+induces+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurooncology%22%5BJournal%5D)">Modulating native GABAA receptors in medulloblastoma with positive allosteric benzodiazepine-derivatives induces cell death.</a> Journal of Neurooncology. 142 (3), 411-422 (2019).</li>
<li>Pomeranz Krummel, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanoma+cell+intrinsic+GABAA+receptor+enhancement+potentiates+radiation+and+immune+checkpoint+response+by+promoting+direct+and+T+cell-mediated+anti-tumor+activity%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology%2C+Biology%2C+Physics%22%5BJournal%5D)">Melanoma cell intrinsic GABAA receptor enhancement potentiates radiation and immune checkpoint response by promoting direct and T cell-mediated anti-tumor activity.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 109 (4), P1040-P1053 (2021).</li>
<li>Bhattacharya, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutically+leveraging+GABAA+receptors+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Therapeutically leveraging GABAA receptors in cancer.</a> Experimental Biology and Medicine. 246 (19), 2128-2135 (2021).</li>
<li>Mazia, D., Schatten, G., Sale, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adhesion+of+cells+to+surfaces+coated+with+polylysine.+Applications+to+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Adhesion of cells to surfaces coated with polylysine. Applications to electron microscopy.</a> Journal of Cell Biology. 66 (1), 198-200 (1975).</li>
<li>Wiatrak, B., Kubis-Kubiak, A., Piwowar, A., Barg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PC12+cell+line%3A+Cell+types%2C+coating+of+culture+vessels%2C+differentiation+and+other+culture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">PC12 cell line: Cell types, coating of culture vessels, differentiation and other culture conditions.</a> Cells. 9 (4), 958(2020).</li>
<li>Baker, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fixation+in+cytochemistry+and+electron-microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+and+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Fixation in cytochemistry and electron-microscopy.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 6 (5), 303-308 (1958).</li>
<li>Chung, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histomorphological+and+molecular+assessments+of+the+fixation+times+comparing+formalin+and+ethanol-based+fixatives%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+and+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Histomorphological and molecular assessments of the fixation times comparing formalin and ethanol-based fixatives.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 66 (2), 121-135 (2018).</li>
<li>Crowley, L. C., Christensen, M. E., Waterhouse, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+mitochondrial+transmembrane+potential+by+TMRE+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Measuring mitochondrial transmembrane potential by TMRE staining.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2016 (12), (2016).</li>
<li>Cory, A. H., Owen, T. C., Barltrop, J. A., Cory, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+an+aqueous+soluble+tetrazolium%2Fformazan+assay+for+cell+growth+assays+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Communications%22%5BJournal%5D)">Use of an aqueous soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth assays in culture.</a> Cancer Communications. 3 (7), 207-212 (1991).</li>
<li>Maro, B., Marty, M. C., Bornens, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+and+in+vitro+effects+of+the+mitochondrial+uncoupler+FCCP+on+microtubules%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">In vivo and in vitro effects of the mitochondrial uncoupler FCCP on microtubules.</a> EMBO Journal. 1 (11), 1347-1352 (1982).</li>
<li>IUPHAR/BPS Guide to Pharmacology. , Available from: 
 <a target="_blank" href="www.guidetopharmacology.org/GRAC/ReceptorFamiliesForward?type=IC">www.guidetopharmacology.org/GRAC/ReceptorFamiliesForward?type=IC</a> (2022).</li>
<li>Zheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+for+regulation+of+melanoma+cell+death+via+activation+of+thermo-TRPV4+and+TRPV%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Mechanism for regulation of melanoma cell death via activation of thermo-TRPV4 and TRPV.</a> Journal of Oncology. 2019, 7362875(2019).</li>
<li>Konno, K., Watanabe, M. Immunohistochemistry for ion channels and their interacting molecules: Tips for improving antibody accessibility. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKonno%2C+K+%22Receptor+and+Ion+Channel+Detection+in+the+Brain%22">Receptor and Ion Channel Detection in the Brain</a>. Luján, R., Ciruela, F. , Humana Press. New York, NY. (2016).</li>
<li>Mortensen, M., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-channel+recording+of+ligand-gated+ion+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Single-channel recording of ligand-gated ion channels.</a> Nature Protocols. 2 (11), 2826-2841 (2007).</li>
<li>Franken, N. A., Rodermond, H. M., Stap, J., Haveman, J., van Bree, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonogenic+assay+of+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Clonogenic assay of cells in vitro.</a> Nature Protocols. 1 (5), 2315-2319 (2006).</li>
<li>Rafehi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonogenic+assay%3A+Adherent+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Clonogenic assay: Adherent cells.</a> Journal of Visualized Experiments. (49), 2573(2011).</li>
<li>Scudiero, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+soluble+tetrazolium%2Fformazan+assay+for+cell+growth+and+drug+sensitivity+in+culture+using+human+and+other+tumor+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines.</a> Cancer Research. 48 (17), 4827-4833 (1988).</li>
<li>Wang, P., Henning, S. M., Heber, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+of+MTT+and+MTS-based+assays+for+measurement+of+antiproliferative+activity+of+green+tea+polyphenols%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Limitations of MTT and MTS-based assays for measurement of antiproliferative activity of green tea polyphenols.</a> PLoS One. 5, e10202(2010).</li>
<li>Berridge, M. V., Tan, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+cellular+reduction+of+3-%284%2C5-dimethylthiazol-2-yl%29-2%2C5-diphenyltetrazolium+bromide+%28MTT%29%3A+subcellular+localization%2C+substrate+dependence%2C+and+involvement+of+mitochondrial+electron+transport+in+MTT+reduction%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Biochemistry+and+Biophysics%22%5BJournal%5D)">Characterization of the cellular reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT): subcellular localization, substrate dependence, and involvement of mitochondrial electron transport in MTT reduction.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 303 (2), 474-482 (1993).</li>
<li>Plumb, J. A., Milroy, R., Kaye, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+pH+dependence+of+3-%284%2C5-dimethylthiazol-2-yl%29-2%2C5-diphenyl-tetrazolium+bromide-formazan+absorption+on+chemosensitivity+determined+by+a+novel+tetrazolium-based+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of the pH dependence of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide-formazan absorption on chemosensitivity determined by a novel tetrazolium-based assay.</a> Cancer Research. 49 (16), 4435-4440 (1989).</li>
<li>Chakrabarti, R., Kundu, S., Kumar, S., Chakrabarti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamin+A+as+an+enzyme+that+catalyzes+the+reduction+of+MTT+to+formazan+by+vitamin+C%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Vitamin A as an enzyme that catalyzes the reduction of MTT to formazan by vitamin C.</a> Journal of Cellular Biochemistry. 80 (1), 133-138 (2000).</li>
<li>Dong, G. W., Preisler, H. D., Priore, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+limitations+of+in+vitro+clonogenic+drug+sensitivity+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Chemotherapy+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Potential limitations of in vitro clonogenic drug sensitivity assays.</a> Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 13 (3), 206-210 (1984).</li>
<li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((STIM1-+and+Orai1-Mediated+Ca2%2Boscillation+orchestrates+invadopodium+formation+and+melanoma+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">STIM1- and Orai1-Mediated Ca2+oscillation orchestrates invadopodium formation and melanoma invasion.</a> Journal of Cell Biology. 207 (4), 535-548 (2014).</li>
</ol>

D.A.P.K. jest współzałożycielem, prezesem i dyrektorem generalnym Amlal Pharmaceuticals Inc. S.S. jest współzałożycielem Amlal Pharmaceuticals Inc. i zasiada w Radzie Monitorującej Bezpieczeństwa Leków Bexion Pharmaceuticals, Inc.

Zmiany w funkcji kanałów jonowych zmieniają wewnątrzkomórkowe kaskady sygnalizacyjne, co może wpływać na ogólne funkcjonowanie komórki. W ciągu ostatniej dekady stało się coraz bardziej jasne, że kanały jonowe są ważne dla wzrostu komórek rakowych i przerzutów. Co ważne, wiele kanałów jonowych jest głównymi celami zatwierdzonych terapii ukierunkowanych na szeroki zakres zaburzeń24. Badacze badali, czy kanały jonowe mogą być celami przeciwnowotworowymi, a wstępne wyniki są obiecujące<sup class='xre...

Białka transportujące błonę są kluczowe dla komunikacji między komórkami, jak również dla utrzymania homeostazy komórkowej. Wśród białek transportujących błonę, kanały jonowe służą do napędzania wzrostu i rozwoju komórek oraz do utrzymania stanu komórek w trudnych i zmieniających się środowiskach. Doniesiono również, że kanały jonowe napędzają i wspierają rozwój guzów litych, zarówno ogólnoustrojowo, jak i w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN)1,2. Na przykład kanały KCa3.1 są odpowiedzialne za regulację potencjału błonowego i kontrolowanie objętości komórek, co jest ważne w regulacji cyklu komórkowego. Doniesiono, że wadliwe kanały KCa3.1 przyczyniają się do nieprawidłowej proliferacji komórek nowotworowych3. Ponadto kanały jonowe mogą przyczyniać się do przerzutowego rozprzestrzeniania się nowotworów. Na przykład kanały przejściowego potencjału receptorowego (TRP) są zaangażowane w napływ Ca2+ i Mg2 +; Ten napływ aktywuje kilka kinaz i białek szoku cieplnego, które działają w celu regulacji macierzy zewnątrzkomórkowej otaczającej guz, co z kolei jest ważne dla inicjowania przerzutów raka4.
Ponieważ kanały jonowe mogą przyczyniać się do rozwoju nowotworów, mogą być również celem leczenia raka związanego z lekami. Na przykład oporność na metody leczenia, w tym chemioterapię i nowatorską immunoterapię, jest związana z dysregulacją funkcji kanałów jonowych5,6,7. Ponadto kanały jonowe stają się ważnymi celami leków hamujących wzrost i rozwój nowotworów, przy czym badane są leki małocząsteczkowe (zatwierdzone przez FDA), a także biopolimery, w tym przeciwciała monoklonalne1,2,8,9. Chociaż poczyniono znaczne postępy na tym froncie, odkrywanie leków na raka z kanałem jonowym pozostaje słabo rozwinięte. Wynika to częściowo z wyjątkowych wyzwań związanych z badaniem kanałów jonowych w komórkach nowotworowych. Na przykład istnieją ograniczenia techniczne w tworzeniu testów elektrofizjologicznych dla związków wolno działających oraz czasowe różnice w aktywacji kanału i działaniu leków. Co więcej, rozpuszczalność związków może również hamować postęp, ponieważ większość powszechnie stosowanych obecnie zautomatyzowanych systemów elektrofizjologii wykorzystuje podłoża hydrofobowe, które mogą przyczyniać się do powstawania artefaktów w wyniku adsorpcji związków. Ponadto duże bioorganiczne terapie molekularne, takie jak produkty naturalne, peptydy i przeciwciała monoklonalne, są technicznie trudne do zbadania przy użyciu konwencjonalnych testów elektrofizjologicznych10. Wreszcie, właściwości bioelektryczne komórek nowotworowych pozostają słabo poznane11.
Tymczasem, barwienie immunofluorescencyjne kanałów jonowych jest często trudne. Wynika to częściowo ze złożoności ich struktur i kontekstu w błonie, które wpływają na zdolność zarówno do wytwarzania, jak i wykorzystywania przeciwciał do badań mikroskopowych. Szczególnie ważne jest, aby przeciwciała używane do barwienia kanałów jonowych zostały zweryfikowane pod kątem swoistości, powinowactwa i odtwarzalności. Komercyjne przeciwciała dla kanałów jonowych powinny być brane pod uwagę w oparciu o ich strategię walidacji i wyniki publikacji. Doświadczenia powinny obejmować kontrole ujemne w celu wykazania braku niespecyficznego wiązania przez knockdown lub knockout białka docelowego. Alternatywnie, linie komórkowe, w których białko docelowe jest nieobecne lub występuje w niskiej liczebności na podstawie oznaczeń mRNA lub białka, mogą służyć jako kontrole negatywne. Na przykład badanie to pokazuje lokalizację podjednostki receptora (GABA) Gabra5 w linii komórkowej rdzeniaka zarodkowego (D283). Komórki D283 z knockdownem siRNA i komórki Daoy, inna linia komórkowa rdzeniaka zarodkowego móżdżku, zostały wybarwione pod kątem Gabra5 i nie wykazały znaczącego zabarwienia (dane nie pokazane).
Tutaj prezentowane są metody analizy i oceny funkcji kanałów jonowych, a także wpływu modulatorów kanałów jonowych na komórki nowotworowe. Przewidziano protokoły dla (1) barwienia komórek pod kątem kanału jonowego, (2) testowania spolaryzowanego stanu mitochondriów, (3) ustalania funkcji kanałów jonowych za pomocą elektrofizjologii oraz (4) walidacji leków in vitro. Protokoły te kładą nacisk na badania receptora kwasu gamma-aminomasłowego (GABAA) typu A2,12,13,14,15,16, kanał anionowy chlorków i główny receptor neuroprzekaźnika hamującego. Jednak przedstawione tutaj metody mają zastosowanie do badania wielu innych komórek nowotworowych i kanałów jonowych.

<table><tbody><tr><td>Czytnik płytek ABS SpectraMax</td><td>Urządzenia molekularne</td><td>ABS</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Invitrogen</td><td>00-4555-56</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Flor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A32723</td><td>Koza Anti-Rabbit</td></tr><tr><td>Antybiotyk-Przeciwgrzybicza</td><td>Gibco</td><td>15240-062</td><td>100x</td></tr><tr><td>Suplement B27</td><td>Gibco</td><td>12587-010</td><td>Brak</td></tr><tr><td>bezpieczeństwa biologicznego witaminy A Szafka</td><td>LABCONCO</td><td>302381101</td><td>klasa II, typ A2</td></tr><tr><td>Albumina surowicy bydlęcej</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1606-100</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator CO2</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-998-211</td><td>Heracell VIOS 160i</td></tr><tr><td>Chlorek wapnia</td><td>Fisher Scientific</td><td>C7902</td><td></td></tr><tr><td>Dwuwodne naczynia do hodowli komórkowych, 150 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-600-004</td> Kolby do hodowli <td>komórkowych poddane działaniu hodowli komórkowych</td></tr><tr><td>, 75 cm2</td><td>Fisher Scientific</td><td>430641U</td> Płytki do hodowli komórkowych <td>poddane hodowli komórkowej</td></tr>, <tr><td>6-dołkowe</td><td>Fisher Scientific 353046</td><td></td><td>Płytki</td></tr> do <tr><td>hodowli komórkowych, 96 dołków</td><td>Fisher Scientific</td><td>353072</td><td>Wirówka do hodowli komórkowych</td></tr><tr><td></td><td>Eppendorf</td><td>EP-5804R</td><td>Chłodzone</td></tr><tr><td>Corning CoolCell</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-210-0006</td><td></td></tr><tr><td>Szkiełka nakrywkowe, 22 x 22 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-553-450</td><td>Marka Corning</td></tr><tr><td>D283 Med</td><td>ATCC</td><td>HTB-185</td><td></td></tr><tr><td>DABCO Media</td><td>montażowe EMS</td><td>17989-97</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Sigma Life Sciences</td><td>D9434</td><td></td></tr><tr><td>Dimetyl Sulfoxide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D2650</td><td>Klasa hodowli komórkowych</td></tr><tr><td>DMEM/F12, podłoże bazowe</td><td>Fisher Scientific</td><td>11330-032</td><td>Z czerwienią fenolową</td></tr><tr><td>DMEM / F12, bez czerwieni fenolowej</td><td>Fisher Scientific</td><td>21041-025</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>Naskórkowy czynnik wzrostu</td><td>STEMCELL</td><td>78006.1</td><td></td></tr><tr><td>FCCP</td><td>Abcam</td><td></td><td></td>AB120081</tr><tr><td>Płodowa surowica bydlęca, kwalifikowana</td><td>Gibco</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Czynnik wzrostu fibroblastów, Podstawowe</td> przeciwciało <td>miliporowe</td><td>GF003</td><td></td></tr><tr><td>GARBA5</td><td>Aviva</td><td>ARP30687_P050</td><td>Poliklonalny</td></tr><tr><td>królik Glutamax</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Podłoże montażowe glicerolu</td><td>EMS</td><td>17989-60</td><td>z DAPI + DABCO</td></tr><tr><td>Hemocytometr</td><td>Millipore Sigma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparyna</td><td>STEMCELL</td><td>7980</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>HyClone</td><td>SH3023701</td><td>Solution</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP310-500</td><td>Solid</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Otwarta platforma</td><td></td><td>Z wtyczkami Fiji</td></tr><tr><td>Immuno Mount DAPI</td><td>EMS</td><td>17989-97</td><td></td></tr><tr><td>KRM-II-08</td><td></td><td></td><td>Eksperymentalne związki niedostępne w źródle komercyjnym</td></tr><tr><td>Leica Application Suite X</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Czynnik hamujący białaczkę</td><td>Novus</td><td>N276314100U</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamina</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek magnezu</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M9272</td><td>Hexahydrate</td></tr><tr><td>Mikroskop, konfokalny</td> mikroskop <td>Leica</td><td>SP8</td><td></td></tr><tr><td>, światło</td><td>VWR</td><td>76382-982</td><td>DMiL odwrócony</td></tr><tr><td>MTS - Promega One Step</td><td>Promega</td><td>G3581</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta wielokanałowa, 0,5-10 i mikro; L</td><td>Eppendorf</td><td>Z683914</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta wielokanałowa, 10-100 &mikro; L</td><td>Eppendorf</td><td>Z683930</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta wielokanałowa, 30-300 i mikro; L</td><td>Eppendorf</td><td>Z683957</td><td></td></tr><tr><td>Nest-O-Patch</td><td>Heka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium</td><td>Gibco</td><td>10888022</td><td>Bez witaminy A</td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium</td><td>Gibco</td><td>12348-017</td> Aminokwasy endogenne <td>bez czerwieni fenolowej</td></tr><tr><td></td><td>Gibco</td><td>11140-050</td><td></td></tr><tr><td>NOR-QH-II-66</td><td></td><td></td><td>związki eksperymentalne nie dostępne ze źródła komercyjnego</td></tr><tr><td>Parafilm Fisher</td><td>Scientific</td><td>50-998-944</td> 4 <td>szerokość 4 cali</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>EMS</td><td>RT-15710</td><td></td></tr><tr><td>PATHCHMASTER</td><td>Heka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penicylina-Streptomycyna</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>System perfuzyjny</td><td>Nanion</td><td>4000120</td><td></td></tr><tr><td>PFA</td><td>EMS</td><td>RT-15710</td><td></td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna z fosforanami</td><td>Fisher Scientific</td><td>AAJ75889K2</td><td>Klasa odczynnika</td></tr><tr><td>Poli-D-Lizyna</td><td>Fisher Scientific</td><td>A3890401</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lizyna</td><td>Sigma Life Sciences</td><td>P4707</td><td></td></tr><tr><td>Port-a-Patch</td><td>Nanion</td><td>21000072</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek potasu</td><td>Sigma Life Sciences</td><td>P5405</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało pierwotne</td><td>Invitrogen</td><td>MA5-34653</td><td>Pryzmat monoklonalny królika</td></tr><tr><td></td><td>GraphPad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Propofol</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC0758676</td><td>1 ml ampułki</td></tr><tr><td>QH-II-66</td><td></td><td></td><td>eksperymentalne związki niedostępne w komercyjnym źródle</td></tr><tr><td>Zbiorniki na odczynniki</td><td>VWR</td><td>89094-664</td><td>Sterylne</td></tr><tr><td>szkiełka podstawowe, 75 x 25 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-544-7</td><td>Matowy jednostronnie</td></tr><tr><td>Wodorowęglan sodu</td><td>Corning</td><td>25-035-Cl</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-3</td><td></td></tr><tr><td>Pirogronian sodu</td><td>Gibco</td><td>11360-070</td><td></td></tr><tr><td>Synth-a-Freeze Medium</td><td>Gibco</td><td>R00550</td><td>Kriokonserwacja</td></tr><tr><td>TMRE</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-196-4741</td><td>Zestaw</td></tr><tr><td>odczynników TMRE Zestaw</td><td>Abcam</td><td>AB113852</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma Aldrich</td><td>NC0704309</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Gibco</td><td>15-250-061</td><td>Roztwór, 0,4%</td></tr> <tr><td>trypsyna/EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-072</td><td>, 0,25%</td></tr> <tr><td>mieszalnik wirowy</td><td>VWR</td><td>97043-562</td><td></td></tr><tr><td>Bibuła filtracyjna Whatman</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-927-841</td><td></td></tr></tbody></table>

badania przesiewowe kanałów jonowych w komórkach nowotworowych

Screening Ion Channels in Cancer Cells

Kanały jonowe są kluczowe dla rozwoju komórek i utrzymania homeostazy komórek. Zaburzenia funkcji kanałów jonowych przyczyniają się do rozwoju szerokiego zakresu zaburzeń lub kanałopatii. Komórki rakowe wykorzystują kanały jonowe do kierowania własnym rozwojem, a także do doskonalenia się jako guz i asymilacji w mikrośrodowisku, które obejmuje różne komórki nienowotworowe. Co więcej, wzrost poziomu czynników wzrostu i hormonów w mikrośrodowisku guza może powodować zwiększoną ekspresję kanałów jonowych, co przyczynia się do proliferacji i przeżycia komórek rakowych. W związku z tym farmakologiczne celowanie w kanały jonowe jest potencjalnie obiecującym podejściem do leczenia litych nowotworów złośliwych, w tym pierwotnych i przerzutowych nowotworów mózgu. W niniejszym artykule opisano protokoły charakteryzujące funkcję kanałów jonowych w komórkach nowotworowych oraz podejścia do analizy modulatorów kanałów jonowych w celu określenia ich wpływu na żywotność raka. Obejmują one barwienie komórki (komórek) pod kątem kanału jonowego, testowanie spolaryzowanego stanu mitochondriów, ustalanie funkcji kanałów jonowych za pomocą elektrofizjologii oraz wykonywanie testów żywotności w celu oceny siły działania leku.

Powyżej przedstawiono wybrane procedury, które można zastosować do charakterystyki kanałów jonowych w komórkach nowotworowych. Pierwszy protokół skupia się na barwieniu kanału jonowego. Jak szczegółowo opisano, istnieje wiele wyzwań podczas barwienia kanału jonowego lub jakiegokolwiek białka obecnego w błonie zewnątrzkomórkowej. Na Rysunku 1 przedstawiono barwienie podjednostki pentamerycznego receptora GABAA. Drugi protokół podkreśla wyniki badania stanu polaryzacji mitochondriów...

Farmakologiczne celowanie w kanały jonowe jest obiecującym podejściem do leczenia guzów litych. Podano szczegółowe protokoły charakteryzujące funkcję kanałów jonowych w komórkach nowotworowych i oznaczające wpływ modulatorów kanałów jonowych na żywotność raka.

Badania przesiewowe kanałów jonowych w komórkach nowotworowych

Ion channels are critical for cell development and maintaining cell homeostasis. The perturbation of ion channel function contributes to the development ...

Funkcja kanałów jonowych jest kluczowa w biologii komórki i znacząco wpływa na wzrost raka. Nasz zespół koncentruje się na celowaniu w kanały jonowe, aby wspomóc leczenie raka. Naukowcy z tej dziedziny uzyskali ostatnio lepsze zrozumienie mikrośrodowiska guza i tego, w jaki sposób komórki rakowe gromadzą się w zdrowych tkankach, podkreślając znaczenie kanałów jonowych w raku.Jednym z największych wyzwań w obecnym eksperymencie jest dostępność immunokompetentnego modelu zwierzęcego, który może skutecznie testować terapie. Ustaliliśmy, że receptor GABAA jest podatny terapeutycznie na różne nowotwory i zidentyfikowaliśmy nową klasę aktywatorów receptora GABAA, które skutecznie upośledzają komórki rakowe. Kanały jonowe odgrywają kluczową rolę w regulacji zachowania komórek rakowych i mają ogromny potencjał jako cel leczenia raka.Nasze badania pokazały, w jaki sposób uznana klasa leków może być stosowana do skutecznego leczenia raka. Na początek utrzymuj komórki w kolbie hodowlanej o powierzchni 75 centymetrów kwadratowych. Odessać pożywkę hodowlaną i przepłukać komórki PBS bez wapnia i magnezu.Następnie dodaj dwa mililitry 0,25% trypsyny-EDTA, aby odłączyć komórki przylegające. Inkubować przez pięć minut w temperaturze pokojowej i ponownie zawiesić komórki w 10 mililitrach pożywki. Następnie zbierz komórki z kolby do 15-mililitrowej probówki wirówkowej, odwiruj w 480G przez pięć minut w temperaturze pokojowej i odessaj pożywkę.Ponownie zawiesić komórki w pięciu do 10 mililitrach pożywki w oparciu o pierwotne zbieganie się kultury. Usuń 100 mikrolitrów komórek i dodaj do 1,5 mililitrowej probówki ze 100 mikrolitrami 0,4% błękitu trypanowego. Dodaj komórki do hemocytometru i policz je, obserwując pod mikroskopem i używając ręcznego licznika zliczeń.Rozcieńczyć komórki do trzech razy 10 czwartych komórek na mililitr w pożywce hodowlanej bez czerwieni fenolowej. Dodaj 2,5 mililitra zawiesiny komórek do każdego dołka sześciodołkowej płytki z szkiełkiem nakrywkowym pokrytym poli-D-lizyną zgodnie ze wskazówkami producenta. Hoduj komórki przez noc w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla w nawilżonym inkubatorze, aby umożliwić przymocowanie komórek do szkiełka nakrywkowego.Następnego dnia zbadaj przyczep komórek pod odwróconym mikroskopem za pomocą 20-krotnego obiektywu. Przygotować roztwory podstawowe do traktowania o pożądanych stężeniach i utworzyć kontrolę tylko dla pożywki, kontrolę tylko dla nośnika o stężeniu odpowiadającym badanemu związkowi oraz kontrolę z jonoforem FCCP i związkami badanymi. Pracując z jednym szkiełkiem nakrywkowym na raz, dodaj do komórek 1,8 mililitra pożywki dla badanego stanu.Inkubować komórki potraktowane związkiem kontrolnym lub testowym w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla w wilgotnym środowisku przez żądany czas. Po okresie leczenia dodaj do komórek 200 mikrolitrów 10x TMRE. Inkubować przez 15 do 30 minut w temperaturze 37 stopni Celsjusza w środowisku nawilżonym 5% dwutlenkiem węgla.Delikatnie zassaj pożywkę i przepłucz komórki dwa razy PBS, aby zminimalizować zakłócenia tła. Następnie odwróć szkiełko nakrywkowe na szkiełko mikroskopowe oznaczone warunkami zabiegu. Wyobraź sobie, że komórki żyją przy wzbudzeniu 549 nanometrów i emisji 575 nanometrach.Wykorzystaj mikroskop konfokalny, aby uchwycić kilka pól stosu Z z szybkim przechwytywaniem obrazu, zanim integralność komórki zostanie utracona. Zapisz i zapisz plik obrazu do późniejszej analizy. Komórki z aktywnymi mitochondriami zachowały barwienie TMRE i wykazały wysoką fluorescencję.Zdepolaryzowane lub nieaktywne mitochondria mają zmniejszony potencjał błonowy, nie zatrzymują TMRE i wykazują niski sygnał fluorescencyjny. Na początek umieść komórki w 75 mikrolitrach na studzienkę pożywki wolnej od antybiotyków bez buforu HEPES, aby określić IC 50. Drugiego dnia przygotować roztwór kontrolny i roztwory testowe, wykonując seryjne rozcieńczenia roztworów podstawowych o wysokim stężeniu.Po dodaniu roztworów kontrolnych i testowych do komórek, inkubuj komórki w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla w wilgotnym środowisku przez 48 godzin. Rozpocznij test proliferacji komórek, najpierw wirując odczynnik MTS, aby całkowicie rozpuścić wytrącony odczynnik przed użyciem w trzecim dniu eksperymentu. Przenieś rozmrożone odczynniki MTS do sterylnego zbiornika na odczynniki o pojemności 25 mililitrów.Odpipetować 20 mikrolitrów odczynnika MTS do każdego dołka z 96-dołkowej płytki zawierającej próbki i 100 mikrolitrów pożywki hodowlanej. Inkubuj płytkę w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla w wilgotnym środowisku przez jedną do czterech godzin. Następnie odwirować płytkę w temperaturze pokojowej, aby usunąć wszelkie pęcherzyki, które mogą zakłócać odczyt absorbancji.Zmierzyć absorbancję przy 490 nanometrach za pomocą czytnika mikropłytek lub spektrofotometru. Przedstawiono 96-dołkową płytkę przedstawiającą wyniki kolorymetryczne testu MTS przy rosnących stężeniach leku. Krzywa odpowiedzi na dawkę wykazała, że badany czynnik upośledza żywotność komórek nowotworowych w sposób zależny od dawki.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Badania nad rakiem

Przedstawiono metody opracowania i walidacji ilościowego testu fluorescencyjnego do pomiaru aktywności kanałów potasowych prostujących do wewnątrz (Kir) w celu wysokoprzepustowego przesiewu związków.

Wysokoprzepustowe badanie przesiewowe w celu poszukiwania małocząsteczkowych modulatorów potasowych kanałów prostujących do wewnątrz

Ten film demonstruje metodologię badania głównych profili śmierci komórek w liniach komórek nowotworowych wywołanych promieniowaniem jonizującym (IR) za pomocą testu barwienia DAPI. Jądra barwione DAPI komórek docelowych przechodzących śmierć komórkową wykazują odrębną morfologię i można je łatwo zidentyfikować za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej.

Badania przesiewowe śmierci komórki za pomocą barwienia DAPI: metoda szybkiego badania przesiewowego klonogennej śmierci komórek wywołanej podczerwienią w liniach komórek nowotworowych

Osiągnięcie zrozumienia procesów komórkowych na poziomie systemowym jest celem współczesnej biologii komórki. Opisujemy tutaj strategie multipleksowania reporterów lucyferazy różnych punktów końcowych funkcji komórkowych w celu zbadania funkcji genów przy użyciu bibliotek RNAi w skali genomu.

Multipleksowana platforma przesiewowa oparta na lucyferazie do badania transdukcji sygnału związanego z rakiem w hodowanych komórkach

Tutaj, monitorowanie metabolizmu komórek nowotworowych w czasie rzeczywistym, w połączeniu z modelem przerzutów in vivo błony kosmówkowo-omocznikowej (CAM) zarodka kurczaka, są wykorzystywane do oceny nowych celów/środków przeciwnowotworowych pod kątem ich zdolności do uwrażliwiania komórek nowotworowych na chemoterapeutyki uszkadzające DNA.

Ocena skuteczności uczulenia na leki przeciwnowotworowe in vitro i in vivo

Identyfikacja nowych celów leków, które przechodzą od testów przedklinicznych do badań na ludziach, jest priorytetem naukowym. W tym celu opisujemy tutaj podejście genomiki funkcjonalnej do badania wpływu wyczerpania genów na sferoidy linii komórek nowotworowych, które bardziej odpowiednio modelują nowotwory u ludzi in vivo.

Wykorzystanie badań przesiewowych genomiki funkcjonalnej do identyfikacji potencjalnie nowych celów leków w hodowlach sferoidalnych komórek nowotworowych

Protokół tutaj opisuje interakcje oczyszczonego białka kanału jonowego hEAG1 z małocząsteczkowym ligandem lipidowym fosfatydyloinozytolem 4,5-bisfosforanem (2). Pomiar pokazuje, że BLI może być potencjalną metodą badań przesiewowych ligandów kanałów jonowych małych cząsteczek.

Uchwycenie kinetyki oddziaływania białka kanału jonowego z małymi cząsteczkami za pomocą testu interferometrii biowarstwowej

Tutaj opisujemy protokół do wykorzystania wysokoprzepustowego badania przesiewowego RNAi w celu odkrycia celów gospodarza, które mogą być manipulowane w celu wzmocnienia terapii wirusami onkolitycznymi, w szczególności terapii wirusem rabodu i krowianki, ale można go łatwo dostosować do innych platform wirusów onkolitycznych lub do odkrywania genów gospodarza, które ogólnie modulują replikację wirusa.

Badania przesiewowe RNAi całego genomu w celu identyfikacji czynników gospodarza, które modulują terapię wirusem onkolitycznym

Ten protokół wykorzystuje opartą na sondzie reakcję łańcuchową polimerazy w czasie rzeczywistym (PCR), test sulforodaminy B (SRB), klonowanie 3' nietranslowanych regionów (3' UTR) oraz test lucyferazy w celu weryfikacji docelowych genów interesującego miRNA i zrozumienia funkcji miRNA.

Protokół in vitro do oceny poziomów, funkcji i powiązanych genów docelowych w komórkach nowotworowych

To jest skuteczna metoda do wykrywania supresorów lub czynników powodujących przerzuty raka. Komórki, transdukowane biblioteką ekspresji, są wstrzykiwane do układu naczyniowego błony kosmówkowo-omoczniowej kurczaka w celu utworzenia kolonii przerzutowych. Kolonie o zmniejszonej lub zwiększonej inwazyjności są wycinane, namnażane, ponownie wstrzykiwane w celu potwierdzenia ich fenotypu, a na koniec analizowane przy użyciu sekwencjonowania o wysokiej przepustowości.

Odkrycie regulatorów przerzutów przy użyciu szybkiego i ilościowego modelu błony nazębiowej przyżyciowej kurcząt

Opracowaliśmy międzygatunkowe porównawcze podejście onkogenomiczne, wykorzystując analizy genomiczne i funkcjonalne badania genomowe do identyfikacji i porównania celów terapeutycznych w nowotworach powstających w genetycznie modyfikowanych modelach mysich i odpowiadającym im typie nowotworu ludzkiego.

Profilowanie genetyczne i badania przesiewowe w skali genomu w celu identyfikacji celów terapeutycznych w mysich modelach złośliwego guza osłonki nerwów obwodowych

Opisujemy test fluorescencyjny, który może szybko i tanio potwierdzić zdolność nowych związków do chelatowania żelaza. Test mierzy zdolność związków do konkurowania z aktywnością wiązania żelaza przez słabą sondę fluorescencyjną chelatującą żelazo Calceinę, co skutkuje wymiernym wzrostem fluorescencji, gdy zachodzi chelatacja.

Ilościowa i niedroga bezkomórkowa metoda fluorescencyjna potwierdzająca zdolność nowych związków do chelatowania żelaza

Poznaj metody badania kanałów jonowych w komórkach nowotworowych i ich znaczenie dla terapii onkologicznej. Odkryj, jak modulatory receptorów GABAA mogą osłabiać komórki rakowe.

Badania przesiewowe kanałów jonowych w komórkach nowotworowych

Przeglądaj więcej filmów