Name: Modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane MOG35-55 (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T13:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 44 s
Description: Poznaj model EAE u myszy C57BL/6J obu płci z użyciem peptydu MOG 35-55. Ta metoda umożliwia badanie mechanizmów neurozapalnych i testowanie terapii w stwardnieniu rozsianym.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca została wsparta przez Ministero dell'Istruzione, dell'Università e della Ricerca - MIUR project Dipartimenti di Eccellenza 2018-2022 and 2023-2027 dla Departamentu Neuronauki Rity Levi Montalcini; Cavalieri-Ottolenghi Foundation, Orbassano, Włochy. BB był członkiem INFRA-P w regionie Piemontu (nr 378-35) (2022-2023) oraz PRIN w latach 2020 - 20203AMKTW. Dziękujemy Fondazione per la Ricerca Biomedica Onlus (FORB) za wsparcie. Opłaty za publikację zostały wsparte darowizną rzeczową Distretto Rotaract 2031, a w szczególności Rotaract Club Torino Nord-Est. Dziękujemy Elaine Miller za korektę naszego manuskryptu.

Induction and Evaluation of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in Mouse

<ol><li>Thompson, A. J., Baranzini, S. E., Geurts, J., Hemmer, B., Ciccarelli, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Multiple sclerosis.</a> Lancet. 391 (10130), 1622-1636 (2018).</li>
<li>Gold, S. M., Willing, A., Leypoldt, F., Paul, F., Friese, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+autoimmune+disorders+of+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+immunopathol%22%5BJournal%5D)">Sex differences in autoimmune disorders of the central nervous system.</a> Semin immunopathol. 41 (2), 177-188 (2019).</li>
<li>Smith, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc%22%5BJournal%5D)">Animal models of multiple sclerosis.</a> Curr Protoc. 1 (6), 185(2021).</li>
<li>Procaccini, C., De Rosa, V., Pucino, V., Formisano, L., Matarese, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+Multiple+Sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models of Multiple Sclerosis.</a> Eur J Pharmacol. 759, 182-191 (2015).</li>
<li>Torre-Fuentes, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+demyelination+and+remyelination%5BTitle%5D)+AND+%22Neurologia%22%5BJournal%5D)">Experimental models of demyelination and remyelination.</a> Neurologia. 35 (1), 32-39 (2020).</li>
<li>Kipp, M., Nyamoya, S., Hochstrasser, T., Amor, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+sclerosis+animal+models%3A+a+clinical+and+histopathological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Multiple sclerosis animal models: a clinical and histopathological perspective.</a> Brain Pathol. 27 (2), Zurich, Switzerland. 123-137 (2017).</li>
<li>Racke, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE).</a> Curr Protoc Neurosci. , Chapter 9, Unit 9.7 (2001).</li>
<li>Constantinescu, C. S., Farooqi, N., O'Brien, K., Gran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+as+a+model+for+multiple+sclerosis+%28MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS).</a> Br J Pharmacol. 164 (4), 1079-1106 (2011).</li>
<li>Montarolo, F., Perga, S., Martire, S., Bertolotto, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nurr1+reduction+influences+the+onset+of+chronic+EAE+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Inflamm+Res%22%5BJournal%5D)">Nurr1 reduction influences the onset of chronic EAE in mice.</a> Inflamm Res. 64 (11), 841-844 (2015).</li>
<li>Montarolo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoxazolo-pyridinone+7e%2C+a+potent+activator+of+the+Nurr1+signaling+pathway%2C+on+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effects of isoxazolo-pyridinone 7e, a potent activator of the Nurr1 signaling pathway, on experimental autoimmune encephalomyelitis in mice.</a> PLoS One. 9 (9), 108791(2014).</li>
<li>Furlan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+gadolinium+retention+in+the+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+murine+model+of+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trace+Elem+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Analysis of the gadolinium retention in the experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) murine model of multiple sclerosis.</a> J Trace Elem Med Biol. 68, 126831(2021).</li>
<li>Desole, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering%2C+characterization%2C+and+biological+evaluation+of+an+antibody+targeting+the+HGF+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Engineering, characterization, and biological evaluation of an antibody targeting the HGF receptor.</a> Front Immunol. 12, 775151(2021).</li>
<li>Voskuhl, R. R., MacKenzie-Graham, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+is+an+excellent+model+to+study+neuroaxonal+degeneration+in+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Chronic experimental autoimmune encephalomyelitis is an excellent model to study neuroaxonal degeneration in multiple sclerosis.</a> Front Mol Neurosci. 15, 1024058(2022).</li>
<li>McCombe, P. A., Greer, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+biological+sex+and+pregnancy+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%3A+It%27s+complicated%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Effects of biological sex and pregnancy in experimental autoimmune encephalomyelitis: It's complicated.</a> Front Immunol. 13, 1059833(2022).</li>
<li>Ascherio, A., Munger, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+multiple+sclerosis%3A+from+risk+factors+to+prevention-an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of multiple sclerosis: from risk factors to prevention-an update.</a> Semin Neurol. 36 (2), 103-114 (2016).</li>
<li>Spence, R. D., Voskuhl, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+estrogens+and+androgens+in+CNS+inflammation+and+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of estrogens and androgens in CNS inflammation and neurodegeneration.</a> Front Neuroendocrinol. 33 (1), 105-115 (2012).</li>
<li>Laffont, S., Garnier, L., Lélu, K., Guéry, J. -C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen-mediated+protection+of+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%3A+Lessons+from+the+dissection+of+estrogen+receptor-signaling+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+J%22%5BJournal%5D)">Estrogen-mediated protection of experimental autoimmune encephalomyelitis: Lessons from the dissection of estrogen receptor-signaling in vivo.</a> Biomed J. 38 (3), 194-205 (2015).</li>
<li>Avila, M., Bansal, A., Culberson, J., Peiris, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+sex+hormones+in+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Neurol%22%5BJournal%5D)">The role of sex hormones in multiple sclerosis.</a> Eur Neurol. 80 (1-2), 93-99 (2018).</li>
<li>Collongues, N., Patte-Mensah, C., De Seze, J., Mensah-Nyagan, A. -G., Derfuss, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testosterone+and+estrogen+in+multiple+sclerosis%3A+from+pathophysiology+to+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Neurother%22%5BJournal%5D)">Testosterone and estrogen in multiple sclerosis: from pathophysiology to therapeutics.</a> Expert Rev Neurother. 18 (6), 515-522 (2018).</li>
<li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+the+ARRIVE+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: the ARRIVE guidelines for reporting animal research.</a> PLoS Biol. 8 (6), 1000412(2010).</li>
<li>Shaw, M. K., Zhao, X., Tse, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+unresponsiveness+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+resistant+mouse+strains+by+adoptive+transfer+and+antigenic+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Overcoming unresponsiveness in experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) resistant mouse strains by adoptive transfer and antigenic challenge.</a> J Vis Exp. (62), e3778(2012).</li>
<li>Bittner, S., Afzali, A. M., Wiendl, H., Meuth, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+oligodendrocyte+glycoprotein+%28MOG35-55%29+induced+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+%28EAE%29+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG35-55) induced experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in C57BL/6 mice.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li>
<li>Downton, P., Early, J. O., Gibbs, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms+in+adaptive+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms in adaptive immunity.</a> Immunology. 161 (4), 268-277 (2020).</li>
<li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+vaginal+lavage%2C+crystal+violet+staining%2C+and+vaginal+cytological+evaluation+for+mouse+estrous+cycle+staging+identification%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Performing vaginal lavage, crystal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mouse estrous cycle staging identification.</a> J Vis Exp. (67), e4389(2012).</li>
<li>Rahn, E. J., Iannitti, T., Donahue, R. R., Taylor, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+a+mouse+model+of+multiple+sclerosis%3A+neuropathic+pain+behavior+in+females+but+not+males+and+protection+from+neurological+deficits+during+proestrus%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Sex+Differ%22%5BJournal%5D)">Sex differences in a mouse model of multiple sclerosis: neuropathic pain behavior in females but not males and protection from neurological deficits during proestrus.</a> Biol Sex Differ. 5 (1), 4(2014).</li>
<li>Bonaldo, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+perinatal+exposure+to+bisphenol+A+or+S+in+EAE+model+of+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of perinatal exposure to bisphenol A or S in EAE model of multiple sclerosis.</a> Cell Tissue Res. 392 (2), 467-480 (2023).</li>
<li>vanden Berg, R., Laman, J. D., van Meurs, M., Hintzen, R. Q., Hoogenraad, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rotarod+motor+performance+and+advanced+spinal+cord+lesion+image+analysis+refine+assessment+of+neurodegeneration+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Rotarod motor performance and advanced spinal cord lesion image analysis refine assessment of neurodegeneration in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> J Neurosci Methods. 262, 66-76 (2016).</li>
<li>Bolton, C., Smith, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+and+regulating+acute+inflammatory+lesion+formation+during+the+pathogenesis+of+multiple+sclerosis+and+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neurol+Disord+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Defining and regulating acute inflammatory lesion formation during the pathogenesis of multiple sclerosis and experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> CNS Neurol Disord Drug Targets. 14 (7), 915-935 (2015).</li>
<li>Glaser, J. R., Glaser, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuron+imaging+with+Neurolucida--a+PC-based+system+for+image+combining+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Comput+Med+Imaging+Graph%22%5BJournal%5D)">Neuron imaging with Neurolucida--a PC-based system for image combining microscopy.</a> Comput Med Imaging Graph. 14 (5), 307-317 (1990).</li>
<li>Kennedy, H. S., Puth, F., Van Hoy, M., Le Pichon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+removing+the+brain+and+spinal+cord+as+one+unit+from+adult+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">A method for removing the brain and spinal cord as one unit from adult mice and rats.</a> Lab Anim (NY). 40 (2), 53-57 (2011).</li>
<li>Watson, C., Paxinos, G., Kayalioglu, G., Heise, C. Chapter 16 - Atlas of the mouse spinal cord. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWatson%2C+C+%22The+Spinal%22">The Spinal</a>. Watson, C., Paxinos, G., Kayalioglu, G. , Academic Press. 308-379 (2009).</li>
<li>Khan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+TRPV1%2FTRPM8%2FP2Y+nociceptors+by+withametelin+via+downregulating+MAPK+signaling+in+mouse+model+of+vincristine-induced+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Suppression of TRPV1/TRPM8/P2Y nociceptors by withametelin via downregulating MAPK signaling in mouse model of vincristine-induced neuropathic pain.</a> Int J Mol Sci. 22 (11), 6084(2021).</li>
<li>Bergamaschi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+factors+in+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Prognostic factors in multiple sclerosis.</a> Int Rev Neurobiol. 79, 423-447 (2007).</li>
<li>Harbo, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genes+in+the+HLA+class+I+region+may+contribute+to+the+HLA+class+II-associated+genetic+susceptibility+to+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Antigens%22%5BJournal%5D)">Genes in the HLA class I region may contribute to the HLA class II-associated genetic susceptibility to multiple sclerosis.</a> Tissue Antigens. 63 (3), 237-247 (2004).</li>
<li>Ryan, L., Mills, K. H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+regulate+immune+responses+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+multiple+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Sex differences regulate immune responses in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis.</a> Eur J Immunol. 52 (1), 24-33 (2022).</li>
<li>Lasrado, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+sex+hormones+in+autoimmunity%3A+focus+on+EAE%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Sex+Differ%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of sex hormones in autoimmunity: focus on EAE.</a> Biol Sex Differ. 11 (1), 50(2020).</li>
<li>Hofstetter, H. H., Shive, C. L., Forsthuber, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis+toxin+modulates+the+immune+response+to+neuroantigens+injected+in+incomplete+Freund%27s+adjuvant%3A+induction+of+Th1+cells+and+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+the+presence+of+high+frequencies+of+Th2+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Pertussis toxin modulates the immune response to neuroantigens injected in incomplete Freund's adjuvant: induction of Th1 cells and experimental autoimmune encephalomyelitis in the presence of high frequencies of Th2 cells.</a> J Immunol. 169 (1), 117-125 (2002).</li>
<li>Maria, Z., Turner, E., Agasing, A., Kumar, G., Axtell, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis+toxin+inhibits+encephalitogenic+T-cell+infiltration+and+promotes+a+B-cell-driven+disease+during+Th17-EAE%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pertussis toxin inhibits encephalitogenic T-cell infiltration and promotes a B-cell-driven disease during Th17-EAE.</a> Int J Mol Sci. 22 (6), 2924(2021).</li>
<li>Krementsov, D. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+do+not+support+developmental+bisphenol+a+exposure+as+an+environmental+factor+in+increasing+multiple+sclerosis+risk%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Studies in experimental autoimmune encephalomyelitis do not support developmental bisphenol a exposure as an environmental factor in increasing multiple sclerosis risk.</a> Toxicol Sci. 135 (1), 91-102 (2013).</li>
<li>Kummari, E., Nichols, J. M., Yang, E. -J., Kaplan, B. L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroinflammation+and+B-cell+phenotypes+in+cervical+and+lumbosacral+regions+of+the+spinal+cord+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+the+absence+of+pertussis+toxin%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroimmunomodulation%22%5BJournal%5D)">Neuroinflammation and B-cell phenotypes in cervical and lumbosacral regions of the spinal cord in experimental autoimmune encephalomyelitis in the absence of pertussis toxin.</a> Neuroimmunomodulation. 26 (4), 198-207 (2019).</li>
<li>Huntemann, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+and+validated+protocol+for+inducing+chronic+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+in+C57BL%2F6J+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">An optimized and validated protocol for inducing chronic experimental autoimmune encephalomyelitis in C57BL/6J mice.</a> J Neurosci Methods. 367, 109443(2022).</li>
</ol>

Żaden z autorów nie ma żadnych konfliktów interesów, które mógłby zadeklarować w odniesieniu do badań, autorstwa i/lub publikacji tego artykułu.

Opisany przez nas protokół EAE indukowany przez MOG35-55 doprowadził do rozwoju przewlekłej postaci stwardnienia rozsianego u myszy C57BL / 6J 7,8,13. W tych reprezentatywnych wynikach wskazaliśmy, że u zwierząt obu płci, które poddano procedurze immunizacji, rozwinęła się przewlekła postać choroby (tj. nie wracają w pełni do zdrowia po wystąpieniu choroby, kumulują deficyty i utrzymują CS na poziomie co najmniej 1,5 ...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65778">Modeling Multiple Sclerosis in the Two Sexes: MOG35-55-Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis</a>. The Authors section was updated. An additional affiliation (School of Pharmacy, Pharmacology Unit, University of Camerino) was added for author Antonino Casile.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65778">Modeling Multiple Sclerosis in the Two Sexes: MOG35-55-Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis</a>. The Authors section was updated.

Erratum: Modeling Multiple Sclerosis in the Two Sexes: MOG35-55-Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Stwardnienie rozsiane (SM) jest przewlekłą autoimmunologiczną chorobą zapalną atakującą ośrodkowy układ nerwowy (OUN). Wskazuje na obecność okołonaczyniowego nacieku komórek zapalnych, demielinizacji, utraty aksonów i glejozy1. Jego etiologia pozostaje nieznana, a aspekty kliniczne, cechy radiologiczne i patologiczne sugerują niezwykłą heterogeniczność choroby2.
Ze względu na jego nieznaną etiologię i złożoność, obecnie żaden model zwierzęcy nie podsumowuje wszystkich klinicznych i radiologicznych cech wyświetlanych u człowieka MS3,4. Jednak różne modele zwierzęce są wykorzystywane do badania różnych aspektów MS3,4. W tych modelach inicjacja choroby jest zazwyczaj bardzo sztuczna, a ramy czasowe wystąpienia objawów klinicznych są różne u ludzi i myszy. Na przykład u ludzi procesy patofizjologiczne leżące u podstaw choroby pozostają niewykryte przez wiele lat przed wystąpieniem objawów klinicznych. I odwrotnie, eksperymentatorzy mogą wykryć objawy w modelach zwierzęcych w ciągu kilku tygodni lub nawet dni po indukcji SM4.
Trzy podstawowe modele zwierzęce wytwarzają cechy demielinizacji, które są charakterystyczne dla SM: te, które są wywołane przez wirusa (np. wirus mysiego zapalenia mózgu i rdzenia Theilera), te, które są indukowane przez czynniki toksyczne (np. kupryzone, lizolecytyna) oraz różne warianty eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE)5. Każdy model pomaga badać pewne specyficzne aspekty choroby, ale żaden nie replikuje wszystkich cech MS6. Dlatego tak ważne jest, aby wybrać właściwy model, biorąc pod uwagę konkretne potrzeby eksperymentalne i pytania naukowe, którymi należy się zająć.
Dzięki procedurom immunizacji przeciwko antygenom pochodzącym z mieliny, EAE jest indukowane poprzez wywołanie autoimmunologicznej odpowiedzi na składniki OUN u podatnych myszy. Wzajemne oddziaływanie między szerokim zakresem mechanizmów immunopatologicznych i neuropatologicznych powoduje rozwój głównych cech patologicznych SM (tj. zapalenie, demielinizacja, utrata aksonów i glejoza) u immunizowanych myszy7,8. Myszy zaczynają wykazywać objawy kliniczne około drugiego tygodnia po szczepieniu i na ogół wykazują paraliż wstępujący od ogona do kończyny i kończyny przedniej. Wynik kliniczny (tj. kwantyfikacja akumulacji deficytów związanych z chorobą) jest zazwyczaj oceniany za pomocą 5-punktowej skali7.
Aktywna immunizacja białkiem lub peptydem lub pasywny transfer encefalitogennych limfocytów T może być użyty do wywołania EAE u myszy o różnym pochodzeniu genetycznym (np. SJL/J, C57BL/6 i myszy bez otyłości i cukrzycy (NOD)). Białko proteolipidowe mieliny (PLP), podstawowe białko mieliny (MBP) i glikoproteina oligodendrocytów mieliny (MOG) są przykładami białek własnego OUN, z których zwykle wytwarzane są immunogeny. W szczególności myszy SJL / J uodpornione immunodominującym epitopem PLP (PLP139−151) rozwijają przebieg choroby rzutowo-remisyjnej (RR), podczas gdy myszy C57BL / 6J immunizowane immunodominującym peptydem MOG35-55 wykazują EAE o charakterze przewlekłym1. Pomimo pewnych ograniczeń, takich jak dostarczanie bardzo mało informacji na temat progresji stwardnienia rozsianego, roli limfocytów B w chorobie, mechanizmów inside-out czy trudności w badaniu remielinizacji, modele EAE w ogromnym stopniu przyczyniły się do zrozumienia procesów autoimmunologicznych i neurozapalnych, zwiększając wiedzę w dziedzinie stwardnienia rozsianego, a tym samym umożliwiając opracowanie nowych podejść terapeutycznych dla tej choroby4, 6.
W niniejszej pracy skupiliśmy się na szczególnej formie aktywnego EAE, peptydzie glikoproteinowym oligodendrocytów mielinowych 35-55 (MOG35-55)9,10,11,12. EAE wywołane przez MOG35-55 modeluje przewlekłą postać stwardnienia rozsianego. Po szczepieniu myszy przechodzą fazę bezobjawową w ciągu pierwszego tygodnia po szczepieniu, następnie choroba zwykle pojawia się w drugim tygodniu po szczepieniu, natomiast między trzecim a czwartym tygodniem po szczepieniu choroba staje się przewlekła, bez możliwości pełnego wyleczenia ze skumulowanych deficytów7,8,13. Co ciekawe, w większości badań obecnych w literaturze14 nie obserwuje się różnic między mężczyznami i kobietami pod względem częstości występowania, początku choroby, przebiegu lub progresji, nawet jeśli w mniejszej liczbie badań porównuje się chorobę u mężczyzn i kobiet.
Natomiast u ludzi te parametry są silnie dymorficzne płciowo2. Stwardnienie rozsiane dotyka więcej kobiet niż mężczyzn; Jednak u mężczyzn na ogół rozwija się bardziej agresywna forma choroby<klasa SUP="xref">2. Dowody te sugerują istotną, a także złożoną rolę hormonów gonad15; Niemniej jednak rola i mechanizm działania hormonów płciowych w patologii pozostają niejasne. Co więcej, dane z modeli zwierzęcych potwierdzają ideę, że zarówno estrogeny, jak i androgeny wywierają pozytywny wpływ na różne drogi patologii w sposób specyficzny dla płci16,17.
Niektóre badania sugerują również neuroprotekcyjne, promilenizujące i przeciwzapalne działanie progesteronu18 i, chociaż dowody u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym są rzadkie18, sterydy neuroaktywne (tj. steroidy de novo syntetyzowane przez układ nerwowy, takie jak pregnenolon, tetrahydroprogesteron i dihydroprogesteron) mogą również wpływać na przebieg patologiczny19. Podsumowując, dane te potwierdzają tezę, że hormony płciowe wytwarzane zarówno obwodowo, jak i wewnątrz OUN odgrywają ważną i specyficzną dla płci rolę w powstawaniu i postępie choroby. Dlatego w niniejszej pracy nalegamy na zebranie oddzielnych danych zarówno od samców, jak i samic.
Z punktu widzenia histopatologicznego, istota biała rdzenia kręgowego służy jako główne miejsce uszkodzenia OUN w tym modelu, który charakteryzuje się wieloogniskowymi, zlewającymi się regionami jednojądrzastego nacieku zapalnego i demielinizacji8. Tak więc, opisując ten protokół indukcji EAE indukowanego przez MOG35-55 u myszy C57BL / 6J, weźmiemy pod uwagę wynik choroby u obu płci i przedstawimy pewne histopatologiczne spostrzeżenia dotyczące rdzenia kręgowego.

<table><tbody><tr><td>18 G x 1 & frac12; &ldquo; Igła 1,2 x 40 mm do szklanej strzykawki&nbsp;</td><td>Terumo</td><td>TER-HYP-18G-112-PIN</td><td></td></tr><tr><td>Aparat cyfrowy podłączony do mikroskopu optycznego</td> Aparat <td></td><td></td><td>cyfrowy NIKON DS-U1</td></tr><tr><td>Elektroniczna waga precyzyjna</td><td>Merck</td><td>Mod. Kern-440-47N, rozdzielczość 0,1 g</td><td></td></tr><tr><td>Eosin Y</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110216</td><td></td></tr><tr><td>Szklana pipeta strzykawkowa " ultra asept" 10 ml</td><td>Sacco System&nbsp;</td><td></td><td></td>L003465</tr><tr><td>Wyroby szklane (tj. becker do przygotowania emulsji)</td><td>VWR</td><td>213-1170, 213-1172</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksylina (Mayer' s)</td> Filtr <td>Sigma-Aldrich</td><td>MHS32</td><td>przed użyciem.&nbsp;</td></tr><tr><td>Oprogramowanie do analizy obrazu</td><td>Fidżi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Niekompletne Freund' s adiuwant (IFA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F5506</td><td>Przechowywać w temperaturze +4 &deg;C.&nbsp;</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Wellona Pharma</td><td></td><td>Ten lek jest stosowany jako wziewny środek znieczulający.</td></tr><tr><td>Samce i samice myszy C57BL/6J</td><td>Jackson Laboratory, Envigo</td><td></td><td>Wiek 8-10 tygodni, optymalna masa ciała ~20 g.&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikrotom</td><td>Leica HistoCore BIOCUT R</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medium montażowe&nbsp;</td><td>Merck</td><td>107961</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Rotarod</td><td>Ugo Basile&nbsp;</td><td>#47600</td><td></td></tr><tr><td>Mycobacterium tuberculosis (MT), szczep H37Ra&nbsp;</td><td>Difco Laboratories Inc.&nbsp;</td><td>231141</td><td>Przechowywać w temperaturze +4 &deg;C.</td></tr><tr><td>Peptyd glikoproteinowy oligodendrocytów mielinowych 35-55 (MOG35-55)</td><td>Espikem</td><td>EPK1</td><td>Przechowywać w temperaturze -80 &; C rozcieńczony (2 mg/ml) w roztworze fizjologicznym; Przygotuj go w dniu szczepienia, aby w miarę możliwości uniknąć zmian lub zanieczyszczeń.</td></tr><tr><td>Mikroskop optyczny</td><td>NIKON eclipse 90i</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd (PFA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>158127</td><td>Sklep pod kątem +4 stopni; C po rozcieńczeniu (4%) w buforze fosforanowym.</td></tr><tr><td>Toksyna krztuścowa (PT)</td><td>Duotech&nbsp;</td><td>PT.181</td><td>Przechowywać w temperaturze -80&deg; C rozcieńczony (stężenie 5 &mikro; g/ml) w roztworze fizjologicznym&nbsp;</td></tr><tr><td>Roztwór fizjologiczny (0,9% roztwór chlorku sodu)</td><td>B. Eurospital</td><td>A 032182038</td><td>Przechowywać w temperaturze +4 &deg; C po otwarciu.</td></tr><tr><td>Bufor fosforanowo-solny (PBS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61196. </td><td></td>Oprogramowanie AP</tr><tr><td>do akwizycji obrazu</td><td>&nbsp; Strzykawki NIS-Element AR 2.10</td><td></td><td></td></tr><tr><td>U-100 0,5 ml z 30 G x 5/16" (0,30 x 8 mm) w stałej igle</td><td>&nbsp; Strzykawki Nipro</td><td>SYMS-0,5U100-3008B-EC</td><td></td></tr><tr><td>U-100 1 ml z 26G x &frac12; &rdquo; (0,45 x 12,7 mm) w igle</td><td></td><td>20,71,26,03,00,354</td><td></td></tr><tr><td>Maść weterynaryjna do oczu</td><td>Lacrilube, Lacrigel Europhta</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Rompun</td><td></td><td>Ta mieszanina leku jest stosowana jako środek znieczulający i uspokajający do wstrzykiwań.&nbsp;</td></tr><tr><td>Zolazepam i Tiletamine</td><td>Zoletil&nbsp; 100</td><td></td><td>Ten lek jest stosowany jako środek znieczulający do wstrzykiwań, uspokajający, zwiotczający mięśnie i przeciwbólowy</td></tr></tbody></table>

modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane mog35-55

Modeling Multiple Sclerosis in the Two Sexes: MOG35-55-Induced Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Stwardnienie rozsiane (SM) jest przewlekłą autoimmunologiczną chorobą zapalną atakującą ośrodkowy układ nerwowy (OUN). Charakteryzuje się różnym rozpowszechnieniem u obu płci, dotykając więcej kobiet niż mężczyzn, oraz różnymi wynikami, wykazując bardziej agresywne formy u mężczyzn niż u kobiet. Ponadto stwardnienie rozsiane jest wysoce niejednorodne pod względem aspektów klinicznych, cech radiologicznych i patologicznych. Dlatego konieczne jest wykorzystanie eksperymentalnych modeli zwierzęcych, które pozwalają na zbadanie jak największej liczby aspektów patologii. Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia kręgowego (EAE) stanowi jeden z najczęściej stosowanych modeli stwardnienia rozsianego u myszy, modelujący różne cechy choroby, od aktywacji układu odpornościowego po uszkodzenie OUN. W tym miejscu opisujemy protokół indukcji EAE zarówno u samców, jak i samic myszy C57BL / 6J za pomocą immunizacji peptydu glikoproteinowego oligodendrocytów mielinowych 35-55 (MOG35-55), co prowadzi do rozwoju przewlekłej postaci choroby. Przedstawiamy również ocenę dziennego wyniku klinicznego i sprawności motorycznej tych myszy przez 28 dni po szczepieniu (28 dpi). Na koniec ilustrujemy podstawową analizę histologiczną na poziomie OUN, koncentrując się na rdzeniu kręgowym jako głównym miejscu uszkodzenia wywołanego chorobą.

Obserwacja EAE po immunizacji 
Została ona przeprowadzona zgodnie z opisem poniżej.
Masa ciała i spożycie pokarmu 
Dwuczynnikowa analiza wariancji (ANOVA) (płeć i czas jako zmienne niezależne) wykazuje spadek BW u zwierząt z EAE obu płci, szczególnie w drugim tygodniu po indukcji (F(1,57) = 4.952, p &lt; 0.001; Rycina 2A). Niemniej jednak dymorfizm płciowy w BW jest zawsze zachowany (<strong clas...

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia jest jednym z najczęściej stosowanych mysich modeli stwardnienia rozsianego. W obecnym protokole myszy C57BL/6J obu płci są immunizowane peptydem glikoproteinowym oligodendrocytów mielinowych, co skutkuje głównie wznoszącym się niedowładem ogona i kończyn. W tym miejscu omówiono protokół indukcji i oceny EAE.

Modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane MOG35-55

Multiple Sclerosis (MS) is a chronic autoimmune inflammatory disease affecting the central nervous system (CNS). It is characterized by different ...

Nasze badania koncentrują się na eksperymentalnym modelu autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego (EIE), który może znacznie poszerzyć zrozumienie obwodowego mechanizmu immunologicznego i ocenić procesy neurozapalne i częściowo demielinizacyjne. Model ten jest również szeroko stosowany do opracowywania i testowania szerokiej gamy leków terapeutycznych. Ze względu na nieznaną etiologię i złożoność stwardnienia rozsianego, żaden model zwierzęcy nie podsumowuje obecnie wszystkich cech klinicznych i radiologicznych występujących u ludzi.W związku z tym wyzwaniem dla naukowców jest wybranie modelu zwierzęcego najbardziej pasującego do konkretnego pytania eksperymentalnego. EAE jest szeroko stosowanym modelem stwardnienia rozsianego. Jednak ze względu na kilka problemów przeprowadza się tylko niektóre badania, a ten model uwzględniał obie płcie.Dzięki naszemu protokołowi chcemy umożliwić włączenie obu płci do badania prowadzonego w tym modelu. W szczególności nasz protokół zaproponował ocenę kliniczną opartą na dwóch metodach, ocenie wyniku klinicznego i teście rotarod, prowadząc do bardziej ilościowej, mniej subiektywnej i bardziej precyzyjnej oceny klinicznej przebiegu choroby. Mimo że model ten nie odtwarza w pełni dymorfizmu płciowego stwardnienia rozsianego, ma potencjalne zalety.Połączenie indukcji z innymi możliwymi czynnikami ryzyka, zwłaszcza środowiskowymi, może pomóc w zrozumieniu specyficznych skutków takich czynników i określeniu specyficznej roli w niektórych dymorficznych płciowo aspektach choroby. Na początek przygotuj peptyd glikoproteinowy oligodendrocytów mielinowych w temperaturze od 35 do 55 lub roztwór MOG 35-55 w szklanej zlewce. W tym celu należy dodać płynny składnik do zlewki, a następnie dodać odpowiedni szczep Mycobacterium tuberculosis.Umieścić szklaną zlewkę zawierającą roztwór w łaźni lodowej. Za pomocą szklanej strzykawki z igłą o rozmiarze 18 należy rozpocząć proces emulgowania i kontynuować emulgowanie roztworu przez co najmniej 15 minut. Aby ocenić jakość emulsji, należy dozować kroplę emulsji do przezroczystego pojemnika wypełnionego wodą.Uznaj, że emulsja jest gotowa, jeśli kropla zachowuje swoją strukturę i pozostaje nienaruszona. Przenieść emulsję bezpośrednio do jednomililitrowych strzykawek przeznaczonych do celów uodparniających. Napełnione strzykawki należy przechowywać w temperaturze czterech stopni Celsjusza do momentu, gdy będą gotowe do użycia.Rozpocznij immunizację myszy, wykonując dożylne wstrzyknięcie PT do jej bocznej żyły ogonowej. W tym celu delikatnie zatkaj ogon odpowiednio znieczulonej myszy roztworem etanolu, który działa jak środek rozszerzający naczynia krwionośne, uwidaczniając żyły. Skupiając się na jednej z dwóch bocznych żył ogona, użyj strzykawki o pojemności 0,5 mililitra wyposażonej w igłę o rozmiarze 30, aby wstrzyknąć 500 nanogramów PT. Następnie należy przystąpić do podawania podskórnych iniekcji emulsji MOG 35-55 przygotowanej wcześniej w jednomililitrowych strzykawkach.Za pomocą strzykawek z igłami o rozmiarze 26 należy wykonać dwa wstrzyknięcia podskórne po 100 mikrolitrów każde pod rostralną częścią boków. Następnie podać jedno wstrzyknięcie 100 mikrolitrów u podstawy ogona. Po wywołaniu eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia u myszy, poproś zaślepionego badacza o codzienną ocenę wyników klinicznych zwierzęcia.Oceń każde zwierzę w skali od zera do pięciu, aby ocenić postęp choroby. Aby ocenić sprawność motoryczną, należy codziennie inicjować sesje rotarodowe dla myszy, zaczynając od jednego DPI, aż do momentu, gdy badanie będzie tego wymagać. Każdą sesję przeprowadzaj przez 300 sekund, podczas których zwiększaj liniowo prędkość obrotową pręta od czterech do 40 obrotów na minutę.Kiedy zwierzę traci równowagę i spada z urządzenia rotarodowego, ląduje na ziemi, uruchamiając czujnik, który rejestruje czas. Rejestruj wydajność zwierzęcia i oceniaj ją jako opóźnienie do upadku. Znaczny wzrost wyniku klinicznego lub CS z czasem zaobserwowano zarówno u samców, jak i samic myszy, począwszy od 10 DPI do punktu końcowego.Samice wykazywały wyższy CS niż mężczyźni, ale nie znacząco. Tendencję do wcześniejszego początku choroby zaobserwowano również u kobiet w porównaniu z mężczyznami. Co więcej, kobiety wykazywały znacznie wyższy skumulowany CS w porównaniu z mężczyznami.Znaczny spadek wydajności rotarodu w czasie zaobserwowano zarówno u samców, jak i samic myszy. W szczególności mężczyźni wykazywali minimalną wydajność przy 16 DPI, podczas gdy kobiety przy 17 DPI. Samce osiągały lepsze wyniki niż samice, zwłaszcza w przewlekłej fazie choroby, prawdopodobnie w wyniku niższego CS.

modeling-multiple-sclerosis-two-sexes-mog35-55-induced-experimental

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

W tym filmie zaprezentowano indukcję oraz ocenę kliniczną modelu zwierzęcego stwardnienia rozsianego: przewlekłego nawracającego eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia u szczurów linii DA. Choroba, wywołana immunizacją szczurów emulsją zawierającą cały rdzeń kręgowy szczura i pełny adiuwant Freunda, wykazuje objawy kliniczne przypominające przebieg choroby u ludzi.

Indukcja i ocena kliniczna przewlekłej postaci nawrotowej eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia

Film demonstruje indukcję eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia u myszy poprzez wstrzyknięcie kombinacji glikoprotein oligodendrocytów mielinowych i inaktywowanych Mycobacterium tuberculosis. Model umożliwia naukowcom badanie mechanizmów chorobowych i testowanie interwencji terapeutycznych.

Indukcja eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego w modelu mysim

W tym filmie mysi model stwardnienia rozsianego jest tworzony za pomocą eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE). Myszowi wstrzykuje się emulsję zawierającą peptyd neuronalny i adiuwant, wywołując odpowiedź immunologiczną, która aktywuje autoreaktywne limfocyty T. Następnie podaje się wstrzyknięcie toksyny krztuścowej (PTX) w celu zwiększenia przepuszczalności bariery krew-mózg, umożliwiając autoreaktywnym limfocytom T infiltrację mózgu. Ten naciek inicjuje kaskadę...

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia (EAE) jest uznanym zwierzęcym modelem stwardnienia rozsianego. Myszy C57BL/6 są immunizowane peptydem 35-55 (MOG) glikoproteiny oligodendrocytów mieliny (MOG) (MOG35-55), co powoduje narastający porażenie wiotkie spowodowane przez autoreaktywne komórki odpornościowe w ośrodkowym układzie nerwowym. Omówione zostaną protokoły indukcji i monitorowania choroby.

Glikoproteina oligodendrocytów mielinowych (MOG35-55) indukowana eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia kręgowego (EAE) u myszy C57BL / 6

Ten manuskrypt opisuje metody indukcji i oceny eksperymentalnego modelu autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego (EAE), wraz z oceną rozmieszczenia komórek odpornościowych i poziomów cytokin mRNA w węzłach chłonnych, śledzionie, krwi i rdzeniu kręgowym za pomocą cytometrii przepływowej i ilościowego PCR, odpowiednio, w różnych fazach choroby.

Indukcja eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego u myszy i ocena zależnej od choroby dystrybucji komórek odpornościowych w różnych tkankach

Opisujemy prosty protokół wykorzystujący tylko podstawowy sprzęt laboratoryjny do generowania i oczyszczania dużych ilości białka fuzyjnego, które zawiera glikoproteinę oligodendrocytów mieliny myszy. Białko to może być wykorzystane do wywołania eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia wywołanego zarówno przez limfocyty T, jak i B.

Prosta i wydajna produkcja i oczyszczanie glikoproteiny oligodendrocytów mieliny myszy do eksperymentalnych badań nad autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia kręgowego

Analiza chodu kinematycznego w płaszczyźnie strzałkowej dostarcza bardzo precyzyjnych informacji o tym, jak wykonywany jest ruch. Opisujemy zastosowanie tych technik do identyfikacji deficytów chodu u myszy poddanych demielinizacji o podłożu autoimmunologicznym. Metody te mogą być również wykorzystane do scharakteryzowania deficytów chodu dla innych modeli myszy z upośledzoną lokomocją.

Analiza kinematyczna chodu w płaszczyźnie strzałkowej u myszy C57BL/6 poddanych eksperymentalnemu autoimmunologicznemu zapaleniu mózgu i rdzenia wywołanemu MOG35-55

Tutaj prezentujemy protokoły do badania upośledzenia jednostki nerwowo-naczyniowej podczas eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia in vivo. W szczególności zajmujemy się tym, jak określić przepuszczalność bariery krew-mózg i aktywność żelatynazy zaangażowaną w migrację leukocytów przez limity gleju.

Wizualizacja upośledzenia barier śródbłonkowych i glejowych jednostki nerwowo-naczyniowej podczas eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia mięśniowego in vivo

Niniejszy protokół opisuje indukcję eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia w modelu mysim przy użyciu glikoproteiny oligodendrocytów mieliny i monitorowanie procesu chorobowego za pomocą systemu punktacji klinicznej. Eksperymentalne objawy związane z autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia kręgowego są analizowane za pomocą analizy mikrotomografii komputerowej kości udowej myszy i testu terenowego w celu kompleksowej oceny procesu chorobowego.

Indukcja i zróżnicowane wskaźniki oceny eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego

Do tej pory, protokoły jednoczesnej izolacji wszystkich głównych typów komórek rezydujących w ośrodkowym układzie nerwowym od tej samej myszy są niezaspokojonym wymaganiem. Protokół przedstawia procedurę mającą zastosowanie u myszy z nieleczonym i eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia w celu zbadania złożonych sieci komórkowych podczas zapalenia nerwów i jednoczesnego zmniejszenia wymaganej liczby myszy.

Jednoczesna izolacja głównych typów komórek rezydujących w ośrodkowym układzie nerwowym od dorosłych myszy z autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia (EAE) służy jako zwierzęcy model stwardnienia rozsianego. W tym artykule opisano podejście do oceny zapalenia rdzenia kręgowego, demielinizacji i uszkodzenia aksonów w EAE. Dodatkowo przedstawiono metodę ilościowego określania poziomu rozpuszczalnego światła neurofilamentów w surowicy myszy, ułatwiającą ocenę uszkodzenia aksonów u żywych myszy.

Ocena zapalenia ośrodkowego układu nerwowego, demielinizacji i uszkodzenia aksonów w eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniu mózgu i rdzenia

Poznaj model EAE u myszy C57BL/6J obu płci z użyciem peptydu MOG 35-55. Ta metoda umożliwia badanie mechanizmów neurozapalnych i testowanie terapii w stwardnieniu rozsianym.

Modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane MOG_35-55

Przeglądaj więcej filmów