Naśladowanie metody Dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów

Zakres naszych badań dotyczy biologicznego mechanizmu działania Tuiny w leczeniu chorób układu mięśniowo-szkieletowego. Tutaj staramy się, aby samodzielnie wykonane urządzenie Tuina ustandaryzowało i skutecznie wykonywało zabiegi Tuina na zwierzętach laboratoryjnych. Zajmujemy się niemożnością wykonania manipulacji toczeniem Dinga na szczurach, tworząc posłaniec, który może symulować manipulację toczeniem Dinga u szczurów i weryfikując skuteczność komunikatora na szczurach z urazami mięśni.

Koncentrujemy się na pytaniach o skuteczność masażera rolkowego w przypadku uszkodzenia mięśni szkieletowych u szczurów na różnych parametrach w przyszłych standaryzowanych badaniach. Na początek wybierz masażer, który składa się z gumowego wałka o długości trzech centymetrów i średnicy 1,6 centymetra, uchwytu na widelec i trzycentymetrowej sprężyny o średnicy 0,9 centymetra. Wałek powinien również składać się z przegrody granicznej o długości trzech centymetrów i szerokości dwóch centymetrów.

Szyna regulacyjna, śruba i akrylowa rączka o długości 12 centymetrów i średnicy 0,9 centymetra. Aby kontrolować siłę w metodzie rolki Dinga, przetestuj maksymalny nacisk masażera na kontroler ważenia. Upewnij się, że siła wynosi około 0.3 Newtona, regulując kąt przegrody ograniczającej.

Następnie upewnij się, że minimalne ciśnienie wynosi około 0,08 niutona podczas toczenia. Przed zabiegiem zapoznaj się z aplikacją metronomu, aby kontrolować częstotliwość toczenia do 140 rolek na minutę i przećwicz to więcej niż trzy razy, aby ustandaryzować operację. Zacznij od losowego podzielenia szczurów na trzy grupy po osiem szczurów każda, w tym grupę kontrolną, notexin i notexin z grupami Tuina.

Usuń włosy z prawej kończyny dolnej za pomocą kremu do depilacji po znieczuleniu szczura, a następnie zdezynfekuj skórę trzema naprzemiennymi rundami roztworu dezynfekującego jodoforu i 75% alkoholu okrężnymi ruchami na zewnątrz. Aby ustalić model uszkodzenia mięśni szkieletowych, użyj jednomililitrowej strzykawki z igłą o rozmiarze 30, aby wstrzyknąć roztwór notexin domięśniowo do mięśnia brzuchatego łydki tylko w jednej nodze. Odczekaj trzy sekundy przed wyciągnięciem igły.

Wstrzyknąć szczurom w grupie kontrolnej 200 mikrolitrów roztworu soli fizjologicznej. Przenieś znieczulone szczury do pustych klatek z czystą ściółką. Obserwuj wzrokowo kolor tkanek i częstość oddechów, aż szczury odzyskają wystarczającą świadomość.

Zwróć szczury do klatki domowej i zazwyczaj hoduj je przez 24 godziny. Właściwości morfologiczne mięśni szkieletowych szczura po urazie obserwowano za pomocą barwienia hematoksyliną i eozyną. Mięsień brzuchaty łydki uszkodzony przez wstrzyknięcie notexin wykazał pęknięcie wielu komórek mięśniowych w porównaniu z grupą kontrolną.

Komórki były atroficzne, martwicze i nieregularnie ułożone z dużą infiltracją neutrofili i limfocytów wokół dotkniętego obszaru. Po pierwsze, wywołać uszkodzenie mięśni szkieletowych u szczurów za pomocą notexin. Aby przeprowadzić terapię, należy umieścić szczura na platformie eksperymentalnej w pozycji leżącej, przykryć jego głowę czarną szmatką, aby odsłonić mięsień brzuchaty łydki.

Następnie przytrzymaj masażer i umieść wałek na mięśniu brzuchatym łydki szczura. Przetoczyć się do przodu, aż sprężyna zetknie się z przegrodą ograniczającą, a następnie wycofaj siłę i powróć do pierwotnego położenia, wykonując w ten sposób ruch posuwisto-zwrotny. Obracaj masażer z prędkością 140 rolek na minutę.

Wykonuj każdą operację przez trzy minuty przez trzy kolejne dni. Po każdym podaniu należy umieścić szczury w klatce domowej i pościć przez osiem godzin po ostatnim zabiegu. Po leczeniu Tuina za pomocą masażera na kółkach, morfologia komórek mięśniowych poprawiła się w mięśniu brzuchatym łydki uszkodzonym przez wstrzyknięcie notexin.

Jak zaobserwowano w przypadku barwienia hematoksyliną i eozyną, zaobserwowano mniej pękniętych komórek zanikowych i martwiczych oraz tylko niewielką liczbę komórek zapalnych w porównaniu z uszkodzonym mięśniem. Za pomocą Elizy analizowano również poziomy markerów urazów mięśni szkieletowych CK i FABP3. Markery te były znacznie zmniejszone w grupie Tuina w porównaniu z grupą notexin, co sugeruje, że Tuina może zmniejszać uszkodzenia mięśni szkieletowych.

Zacznij od umieszczenia znieczulonego zwierzęcia na stole operacyjnym. Zdezynfekuj skórę trzema naprzemiennymi wacikami roztworu dezynfekującego jodoforu i 75% alkoholu. Użyj dwóch hemostatów, aby unieść skórę na środku brzucha.

Użyj skalpela, aby przeciąć skórę i mięśnie brzucha od szwu do syntezy łonowej. Po otwarciu jamy brzusznej należy oddzielić jelito sterylnymi wacikami, aby odsłonić aortę brzuszną w tylnej ścianie brzucha. Zlokalizuj aortę brzuszną i weź pięć mililitrów krwi szczura do probówek do pobierania krwi.

Trzymaj probówki z krwią w pozycji stojącej przez godzinę i odwiruj przy 3 000 G przez 10 minut, aby uzyskać osocze. Aby zebrać mięsień brzuchaty łydki, rozetnij skórę nożyczkami chirurgicznymi wzdłuż dolnego otworu brzucha w kierunku bocznej części prawej kończyny dolnej i odsłoń mięśnie kończyny dolnej. Po dokładnym oddzieleniu powięzi kleszczami, przeciąć skalpelem, aby usunąć nienaruszony mięsień brzuchaty łydki.

Umyj mięsień brzuchaty łydki w sterylnym roztworze soli fizjologicznej, aby usunąć przylegające włosy i krew, a następnie umieść usunięty mięsień brzuchaty łydki w 15-mililitrowej probówce wirówkowej zawierającej 4% paraformaldehydu.