Name: Naśladowanie metody Dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-08-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 19 s
Description: Poznaj metodę naśladowania techniki Dinga w leczeniu uszkodzeń mięśni szkieletowych u szczurów za pomocą urządzenia Tuina. Protokół obejmuje barwienie H-E i ELISA do oceny markerów uszkodzeń.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (Grant Nr.82174521), Projekt Innowacyjny dla Absolwentów Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Hunan (2022CX109)

Procedury z udziałem zwierząt zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt w Hunan University of Chinese Medicine.
1. Montaż masażera rolkowego
<ol>
	<li>Wybierz masażer składający się z gumowego rolki, uchwytu w kształcie widelca, sprężyny, ogranicznika, szyny regulacyjnej, śruby oraz akrylowego uchwytu (Rysunek 1). Upewnij się, że gumowa rolka ma długość 3 cm i średnicę 1,6 cm, sprężyna ma długość 3 cm i średnicę 0,9 cm, ogranicznik ma długość 3 cm i szerokość 2 cm, a uchwyt ma długość 12 cm i średnicę 0,9 cm.</li>
	<li>Kontrola siły: Zgodnie z wynikami literatury23, ustalono, że nacisk w dół w metodzie rolowania Dinga wynosi około 10% masy ciała, zatem nacisk stosowany podczas projektowania rolowania do przodu wynosi około 10% masy ciała szczura (0,2-0,3 N). Przetestuj maksymalny nacisk masażera na kontrolerze wagowym, aby wyniósł on około 0,3 N, regulując kąt ogranicznika. Wymaganie dotyczące tego nacisku odpowiada potrzebom szczura.</li>
	<li>Upewnij się, że minimalny nacisk podczas rolowania wstecz wynosi około 0,08 N (Rysunek 2). Upewnij się, że nacisk jest ściśle zgodny z wymogami metody rolowania Dinga, zgodnie z którymi stosunek siły do przodu i do tyłu wynosi 3:1.</li>
	<li>Przed rozpoczęciem zabiegu operator powinien pracować z oprogramowaniem metronomu, aby kontrolować częstotliwość rolowania na poziomie 140 rolls/min; należy przećwiczyć tę czynność ponad 3 razy w fazie wstępnej eksperymentu, aby zapewnić standaryzację operacji.</li>
</ol>
2. Ustanowienie szczurzego modelu uszkodzenia mięśni szkieletowych
<ol>
	<li>Losowo podziel 24 samce szczurów rasy Sprague-Dawley (o masie 200-250 g) na trzy grupy po osiem szczurów każda: kontrolną (C), grupę noteksyny (NTX) oraz grupę noteksyny z Tuina (NTX + Tuina) i karm je standardową dietą. Utrzymuj cykl oświetlenia 12 h światła/12 h ciemności, w temperaturze 20-25 °C i wilgotności 50%-70%.</li>
	<li>Znieczul zwierzęta 1% roztworem pentobarbitalu sodowego (40 mg/kg) poprzez wtryskiwanie doszpikowe, a następnie usuń sierść z prawej kończyny dolnej za pomocą kremu do depilacji. Po usunięciu sierści przemyj pozostałości kremu roztworem soli fizjologicznej. Potwierdź odpowiedni poziom znieczulenia za pomocą testu uszczypnięcia palca. Nałóż maść okulistyczną w celu nawilżenia oczu podczas znieczulenia. Zapewnij wsparcie termiczne przez cały czas trwania procedury.</li>
	<li>Przed iniekcją wykonaj naprzemienną dezynfekcję skóry prawej kończyny dolnej roztworem odkażającym na bazie jodoforu oraz 75% alkoholem. Dotknij patyczkiem nasączonym roztworem odkażającym na bazie jodoforu środka skóry kończyny dolnej i przecieraj ruchem okrężnym na zewnątrz. Powtórz czynność, używając patyczka nasączonego etanolem.</li>
	<li>Utwórz modele uszkodzenia mięśni szkieletowych zgodnie z metodą referencyjną24. Wstrzyknij noteksynę tylko do jednej nogi (aby zapobiec podwójnej iniekcji noteksyny). Pobierz 200 µL roztworu noteksyny (roztwór noteksyny 10 µg/mL przygotowany przez dodanie 100 µg noteksyny do 10 mL soli fizjologicznej w probówce wirówkowej o pojemności 15 mL) do strzykawki 1 mL z igłą 30G i wstrzyknij roztwór noteksyny domięśniowo w mięsień brzuchaty łydki, aby wywołać uszkodzenie mięśnia.</li>
	<li>Wstrzykuj noteksynę powoli i odczekaj 3 s przed wyjęciem igły (aby zapewnić pełne podanie leku). 
	UWAGA: Noteksyna jest substancją toksyczną, która w przypadku kontaktu z otwartą raną wymaga natychmiastowego przemycia dużą ilością wody i bezzwłocznej pomocy medycznej w razie potrzeby.</li>
	<li>Szczurom z grupy kontrolnej wstrzyknij 200 µL roztworu soli fizjologicznej. Przenieś znieczulone szczury do pustych klatek z czystą ściółką. Zadbaj o usunięcie wyściółki z okolic nosa i pyska szczurów, aby utrzymać drożność dróg oddechowych. Obserwuj wizualnie kolor tkanek i częstość oddechów po zakończeniu iniekcji, aż szczury odzyskają wystarczającą świadomość.</li>
	<li>Przenieś szczury do klatek macierzystych i utrzymuj je w typowych warunkach przez 24 h.</li>
</ol>
3. Terapia Tuina
<ol>
	<li>Umieść szczura szczepu SD w pozycji brzusznej na platformie eksperymentalnej zdezynfekowanej 75% alkoholem, z głową przykrytą czarną tkaniną, aby odsłonić mięsień brzuchaty łydki. Nie owijaj tkaniny zbyt ciasno.</li>
	<li>W przypadku grupy NTX+Tuina, używając masażera Tuina: trzymając masażer, przyłóż wałek do mięśnia brzuchatego łydki szczura i przetaczaj go do przodu, aż sprężyna dotknie ogranicznika. Następnie zwolnij nacisk i wróć do pozycji wyjściowej, wykonując ruch posuwisto-zwrotny (Rycina 3).</li>
	<li>Przetaczać masażer z prędkością 140 obrotów na minutę, wykonując każdą operację przez 3 min. Masaże należy przeprowadzać raz rano i raz po południu przez 3 kolejne dni.</li>
	<li>Po każdym zabiegu przenieś szczury z powrotem do klatki macierzystej, a po ostatnim zabiegu zastosuj 8 h głodówki.</li>
</ol>
4. Pobieranie krwi i tkanek od szczurów po zakończeniu eksperymentu
<ol>
	<li>Zgodnie z wymogami właściwej komisji etyki eksperymentów zwierzęcych, znieczulić szczury poprzez domięśniowy zastrzyk 1% pentobarbitalu sodowego (40 mg/kg, iniekcja dosytroniczna). Odpowiednią głębokość znieczulenia potwierdzić testem odruchowym (ściśnięcie palca u nogi). Po pobraniu krwi poddać szczury eutanazji poprzez upuszczenie krwi z aorty brzusznej.</li>
	<li>Przed iniekcją przeprowadzić naprzemienną dezynfekcję skóry roztworem jodoforu i 75% alkoholem. Nasączonym povidonem jodowym patyczkiem watnym przemyć środek skóry brzucha, wykonując ruchy okrężne od centrum na zewnątrz. Powtórzyć czynność za pomocą patyczka nasączonego etanolem. Dezynfekcję powtórzyć 3 razy.</li>
	<li>Asystent powinien użyć dwóch kleszczyków hemostatycznych do uniesienia skóry w połowie brzucha. Operator za pomocą skalpela przecina skórę i mięśnie brzucha od szwu białego do spojenia łonowego.</li>
	<li>Po otwarciu jamy brzusznej odsunąć jelita za pomocą sterylnych kulek waty, aby odsłonić aortę brzuszną w tylnej ścianie brzucha.</li>
	<li>Zlokalizować aortę brzuszną, pobrać 5 mL krwi szczura do probówek do pobierania krwi, a następnie po odstawieniu krwi na 1 h uzyskać osocze do mikrop probówek 1,5 mL poprzez wirowanie przy 3000 x g przez 10 min. Osocze przechowywać w temperaturze -80 °C.</li>
	<li>Za pomocą nożyczek chirurgicznych rozciąć skórę wzdłuż otworu w dolnej części brzucha w kierunku bocznej strony prawej kończyny dolnej, odsłaniając mięśnie kończyny; po ostrożnym oddzieleniu powięzi pęsetą, wyciąć skalpelem nienaruszony mięsień brzuchaty łydki.</li>
	<li>Przemyć mięsień brzuchaty łydki w sterylnym roztworze soli fizjologicznej, aby usunąć przylegające włosy i krew.</li>
	<li>Wyjęty mięsień brzuchaty łydki umieścić w probówce wirówkowej 15 mL zawierającej 4% paraformaldehyd.</li>
</ol>
5. Wykrywanie poziomów CK i FABP 3 w osoczu metodą ELISA
<ol>
	<li>Obliczyć i określić liczbę prefabrykowanych płytek wymaganych do jednego eksperymentu. Wyjąć niezbędne płytki, umieścić je w ramce do płytek 96-dołkowych, pozostałe mikropłytki umieścić z powrotem w worku z folii aluminiowej, szczelnie zamknąć i przechowywać w temperaturze 4 °C.</li>
	<li>Równoważyć zestawy i próbki w temperaturze pokojowej (25-28 °C) przez 120 min, aż do osiągnięcia pełnej równowagi termicznej. 
	UWAGA: Równoważenie zestawu i próbki jest krytyczne i musi zostać przeprowadzone w odpowiednim czasie.</li>
	<li>Wyznaczyć dołki dla standardów, próbek i wzorca pustego. Dodać 50 µL standardu CK lub FABP3 o różnych stężeniach (100, 50, 25, 12,5, 6,25, 0 ng/mL) do dołków standardowych. Każdy standard powtórzyć raz, zajmując łącznie 12 dołków.</li>
	<li>Napełnić dołki dla próbek 40 µL rozcieńczalnika do próbek (0,8 g NaCl, 0,02 g KH2PO4, 0,29 g Na2HPO412H2O, 0,02 g KCl, 0,01 g NaN3 w 100 mL wody dwukrotnie destylowanej, pH 7,4), a następnie dodać 10 µL próbki przeznaczonej do analizy. Każdą próbkę powtórzyć raz, zajmując łącznie 48 dołków.</li>
	<li>Z wyjątkiem dołków pustych znajdujących się dwa miejsca za ostatnim dołkiem dla próbki, dodać 100 µL przeciwciała anty-ludzkiego CK lub FABP3 znakowanego HRP (przeciwciała znakowane enzymem) do każdego dołka standardowego i próbkowego.</li>
	<li>Uszczelnić dołki folią uszczelniającą i inkubować w kąpieli wodnej lub termostacie w temperaturze 37 °C przez 60 min.</li>
	<li>Wylać ciecz, osuszyć dołki papierem chłonnym, napełnić każdy dołek płynem myjącym, pozostawić na 20 s, usunąć płyn myjący, osuszyć papierem filtracyjnym i powtórzyć mycie płytki 5x (lub użyć myjki do płytek).</li>
	<li>Dodać 50 µL roztworu chromogenu A (20 mg tetrametylobenzydyn i 10 mL etanolu w 100 mL wody dwukrotnie destylowanej) oraz 50 µL roztworu chromogenu B (bufor: 0,1 M/L kwasu cytrynowego, 0,2 M/L fosforanu sodu dwuwodornawego, pH 5,0-5,4) do każdego dołka. Przechowywać w ciemności przez 15 min w temperaturze 37 °C.</li>
	<li>Do dołków standardowych, próbek i dołków pustych dodać po 50 µL roztworu stopującego i zmierzyć wartość gęstości optycznej każdego dołka przy 450 nm w ciągu 15 min.</li>
</ol>
6. Analiza histologiczna uszkodzenia mięśnia brzuchatego szczurów indukowanego noteksyną
<ol>
	<li>Przygotować utrwalone w parafinie przekroje o grubości 5 µm, barwione hematoksyliną i eosiną, do badania pod mikroskopem świetlnym zgodnie z opisem w25.</li>
</ol>
7. Przetwarzanie obrazów i analiza danych
<ol>
	<li>Odczytaj i przeanalizuj obrazy zarejestrowane przez system obrazowania za pomocą oprogramowania analitycznego. Przesuń myszą wybrany obszar widzenia obrazu na środek ekranu, kliknij 40x, a następnie kliknij Zrób zdjęcie.</li>
	<li>Zapisz wartości OD uzyskane z testu ELISA w arkuszu kalkulacyjnym i oblicz poziomy CK i FABP3 szczura w próbkach, korzystając z krzywej standardowej.</li>
	<li>Do analiz statystycznych należy wykorzystać oprogramowanie do analizy statystycznej. Pomiary należy przedstawić jako średnią ± odchylenie standardowe (<img alt="Wzór na wartość średnią ± odchylenie standardowe, notacja statystyczna." src="/files/ftp_upload/65820/65820eq01.jpg" style="margin: auto;" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Równanie 1">), a porównania między grupami przeanalizowano za pomocą jednoczynnikowej analizy wariancji (ANOVA), stosując test LSD w przypadku jednorodności wariancji oraz metodę T2 Tamhane'a w przypadku niejednorodności wariancji. Różnicę uznano za istotną statystycznie przy p pwartość p mniejsza niż 0,05.</li>
</ol>

A Massager Based on Ding's Roll Manipulation to Treat Muscle Injury in a Rat Model

<ol><li>Lempainen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+anterior+thigh+injuries+in+soccer+players%3A+practical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Sports+Science%2C+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide.</a> BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41(2022).</li>
<li>Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+acute+muscle+injuries+%28in+Danish%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ugeskrift+for+Laeger%22%5BJournal%5D)">Treatment of acute muscle injuries (in Danish).</a> Ugeskrift for Laeger. 181 (8), V11180753(2019).</li>
<li>Serner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+of+Strength%2C+Flexibility%2C+and+Palpation+Pain+During+Rehabilitation+of+Athletes+with+Acute+Adductor+Injuries%3A+A+Prospective+Cohort+Study%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Orthopaedic+and+Sports+Physical+Therapy%22%5BJournal%5D)">Progression of Strength, Flexibility, and Palpation Pain During Rehabilitation of Athletes with Acute Adductor Injuries: A Prospective Cohort Study.</a> The Journal of Orthopaedic and Sports Physical Therapy. 51 (3), 126-134 (2021).</li>
<li>Gozubuyuk, O. B., Koksal, C., Tasdemir, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rehabilitation+of+a+patient+with+bilateral+rectus+abdominis+full+thickness+tear+sustained+in+recreational+strength+training%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Physiotherapy+Theory+and+Practice%22%5BJournal%5D)">Rehabilitation of a patient with bilateral rectus abdominis full thickness tear sustained in recreational strength training: a case report.</a> Physiotherapy Theory and Practice. 38 (13), 3216-3225 (2022).</li>
<li>Hotfiel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+Conservative+Treatment+and+Management+Strategies+of+Skeletal+Muscle+Injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Orthop%C3%A4die+und+Unfallchirurgie%22%5BJournal%5D)">Current Conservative Treatment and Management Strategies of Skeletal Muscle Injuries.</a> Zeitschrift für Orthopädie und Unfallchirurgie. 154 (3), 245-253 (2016).</li>
<li>de Sire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+Treatment+for+Acute+Traumatic+Musculoskeletal+Pain+in+Athletes%5BTitle%5D)+AND+%22Medicina%22%5BJournal%5D)">Pharmacological Treatment for Acute Traumatic Musculoskeletal Pain in Athletes.</a> Medicina. 57 (11), 1208(2021).</li>
<li>Connor, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+exosomes+in+rotator+cuff+tendon+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of exosomes in rotator cuff tendon healing.</a> Journal of Bone and Mineral Metabolism. 37 (5), 759-767 (2019).</li>
<li>Martins, A. L. L., Giorno, L. P., Santos, A. R. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Engineering+Applied+to+Skeletal+Muscle%3A+Strategies+and+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Tissue Engineering Applied to Skeletal Muscle: Strategies and Perspectives.</a> Bioengineering. 9 (12), 744(2022).</li>
<li>Horgan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clouds+across+the+new+dawn+for+clinical%2C+diagnostic+and+biological+data%3A+accelerating+the+development%2C+delivery+and+uptake+of+personalized+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnosis%22%5BJournal%5D)">Clouds across the new dawn for clinical, diagnostic and biological data: accelerating the development, delivery and uptake of personalized medicine.</a> Diagnosis. , (2023).</li>
<li>Urits, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Review+of+Alternative+Therapies+for+the+Management+of+Chronic+Pain+Patients%3A+Acupuncture%2C+Tai+Chi%2C+Osteopathic+Manipulative+Medicine%2C+and+Chiropractic+Care%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Therapy%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Review of Alternative Therapies for the Management of Chronic Pain Patients: Acupuncture, Tai Chi, Osteopathic Manipulative Medicine, and Chiropractic Care.</a> Advances in Therapy. 38 (1), 76-89 (2021).</li>
<li>Lee, N. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chuna+%28or+Tuina%29+Manual+Therapy+for+Musculoskeletal+Disorders%3A+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis+of+Randomized+Controlled+Trials%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-based+Complementary+and+Alternative+Medicine%3A+eCAM%22%5BJournal%5D)">Chuna (or Tuina) Manual Therapy for Musculoskeletal Disorders: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials.</a> Evidence-based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2017, 8218139(2017).</li>
<li>Xie, J., Deng, D. X., Chen, Y., Peng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+the+intervention+of+massage+techniques+on+skeletal+muscle+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hunan+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Progress in the intervention of massage techniques on skeletal muscle injury.</a> Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine. 34 (04), 199-201 (2018).</li>
<li>Yuan, Y., Zhang, H., Zhang, G. H., Xue, X. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+progress+on+microstructure+changes+and+rehabilitation+treatment+of+exercise-induced+skeletal+muscle+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Massage+and+Rehabilitation+Medicine%22%5BJournal%5D)">Research progress on microstructure changes and rehabilitation treatment of exercise-induced skeletal muscle injury.</a> Massage and Rehabilitation Medicine. 14 (6), 29-33 (2023).</li>
<li>Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Establishment+of+Famous+Tuina+Master+Ding+Jifeng+and+Wei+Fa+-+Commemorating+the+100th+Anniversary+of+Mr.+Ding+Jifeng%27s+Birthday%5BTitle%5D)+AND+%22Traditional+Chinese+Medicine+Culture%22%5BJournal%5D)">The Establishment of Famous Tuina Master Ding Jifeng and Wei Fa - Commemorating the 100th Anniversary of Mr. Ding Jifeng's Birthday.</a> Traditional Chinese Medicine Culture. 9 (6), 18-21 (2014).</li>
<li>Hardy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+Study+of+Injury+Models+for+Studying+Muscle+Regeneration+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Comparative Study of Injury Models for Studying Muscle Regeneration in Mice.</a> PloS one. 11 (1), e0147198(2016).</li>
<li>Plant, D. R., Colarossi, F. E., Lynch, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Notexin+causes+greater+myotoxic+damage+and+slower+functional+repair+in+mouse+skeletal+muscles+than+bupivacaine%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+%26+Nerve%22%5BJournal%5D)">Notexin causes greater myotoxic damage and slower functional repair in mouse skeletal muscles than bupivacaine.</a> Muscle & Nerve. 34 (5), 577-585 (2006).</li>
<li>Tierney, M. T., Sacco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducing+and+Evaluating+Skeletal+Muscle+Injury+by+Notexin+and+Barium+Chloride%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Inducing and Evaluating Skeletal Muscle Injury by Notexin and Barium Chloride.</a> Methods in Molecular Biology. 1460, 53-60 (2016).</li>
<li>Torres-Ruiz, J., Alcalá-Carmona, B., Alejandre-Aguilar, R., Gómez-Martín, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+myopathies+and+beyond%3A+The+dual+role+of+neutrophils+in+muscle+damage+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Inflammatory myopathies and beyond: The dual role of neutrophils in muscle damage and regeneration.</a> Frontiers in Immunology. 14, 1113214(2023).</li>
<li>Tu, H., Li, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+balance+in+skeletal+muscle+damage+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Inflammation balance in skeletal muscle damage and repair.</a> Frontiers in Immunology. 14, 1133355(2023).</li>
<li>Castro, C., Gourley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+treatment+of+inflammatory+myopathy%3A+issues+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Therapeutic+Advances+in+Musculoskeletal+Disease%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and treatment of inflammatory myopathy: issues and management.</a> Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease. 4 (2), 111-120 (2012).</li>
<li>Dabby, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymptomatic+or+minimally+symptomatic+hyperCKemia%3A+histopathologic+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22The+Israel+Medical+Association+Journal%3A+IMAJ%22%5BJournal%5D)">Asymptomatic or minimally symptomatic hyperCKemia: histopathologic correlates.</a> The Israel Medical Association Journal: IMAJ. 8 (2), 110-113 (2006).</li>
<li>Khodabukus, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-Engineered+Human+Myobundle+System+as+a+Platform+for+Evaluation+of+Skeletal+Muscle+Injury+Biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Tissue-Engineered Human Myobundle System as a Platform for Evaluation of Skeletal Muscle Injury Biomarkers.</a> Toxicological Sciences. 176 (1), 124-136 (2020).</li>
<li>Zhou, X. W., Jin, W. D., Zhu, L., Liu, X. H., Zhou, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+observation+on+the+influence+of+different+frequency%2C+intensity+and+action+time+of+Ding+rolling+manipulation+on+hemodynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Shanghai+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Experimental observation on the influence of different frequency, intensity and action time of Ding rolling manipulation on hemodynamics.</a> Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. (06), 42-44 (1998).</li>
<li>Pablos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+Effects+of+Foam+Rolling+against+Inflammation+and+Notexin+Induced+Muscle+Damage+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Protective Effects of Foam Rolling against Inflammation and Notexin Induced Muscle Damage in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 17 (1), 71-81 (2017).</li>
<li>Wisner, L., Larsen, B., Maguire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+Tumor+Content+through+Tumor+Macrodissection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Enhancing Tumor Content through Tumor Macrodissection.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (180), e62961(2022).</li>
<li>Deng, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contusion+concomitant+with+ischemia+injury+aggravates+skeletal+muscle+necrosis+and+hinders+muscle+functional+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Contusion concomitant with ischemia injury aggravates skeletal muscle necrosis and hinders muscle functional recovery.</a> Experimental Biology and Medicine. 247 (17), 1577-1590 (2022).</li>
<li>Dobek, G. L., Fulkerson, N. D., Nicholas, J., Schneider, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+muscle+crush+injury+of+the+legs%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mouse model of muscle crush injury of the legs.</a> Comparative Medicine. 63 (3), 227-232 (2013).</li>
<li>Armstrong, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+citrate+protects+skeletal+muscle+of+ischemia-reperfusion+injury%3A+immunohistochemical+study+in+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ciru%CC%81rgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Sildenafil citrate protects skeletal muscle of ischemia-reperfusion injury: immunohistochemical study in rat model.</a> Acta Cirúrgica Brasileira. 28 (4), 282-287 (2013).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Tutaj opisaliśmy protokół leczenia Tuina uszkodzeń mięśni szkieletowych u szczurów, a następnie przeanalizowaliśmy stopień uszkodzenia mięśni szkieletowych po leczeniu, aby zweryfikować skuteczność metody. Warto zauważyć, że modele uszkodzeń mięśni szkieletowych szczurów, w tym między innymi indukcja leków (noteksyna, bupiwakaina)16, stłuczenie26, zgniatanie27 i niedokrwienie-reperfuzja28, mogą być interweniowane za pomocą Tui...

Urazy mięśniowe są częstymi urazami w życiu klinicznym i codziennym, spowodowanymi zewnętrznymi uderzeniami (stłuczeniami) lub przewlekłym przeciążeniem włókien mięśniowych (nadwyrężeniami), itp., powodując dysfunkcję mięśni i ból, nawet poważnie wpływając na jakość życia pacjenta1. Rozpoczęcie rehabilitacji tak wcześnie, jak to możliwe po kontuzji spowodowanej ostrym przeciążeniem, jest kluczem do skrócenia czasu powrotu do sportu2 oraz do zmniejszenia bólu3,4. We współczesnej medycynie zachodniej pierwsza pomoc kliniczna w przypadku urazów mięśni jest zgodna z zasadami odpoczynku, lodu, kompresji i uniesienia (RICE) w celu zatrzymania szkodliwego krwawienia do tkanki mięśniowej5 oraz niesteroidowych leków przeciwzapalnych w celu złagodzenia bólu6. Odkrycie nowych terapii, takich jak egzosomy7 i inżynieria tkankowa8 stały się potencjalnymi strategiami leczenia chorób mięśni szkieletowych, kompensując niedociągnięcia poprzednich terapii farmakologicznych. Może to jednak również zwiększyć koszty leczenia dla pacjentów, wywierając na nich ogromną presję finansową9. Dlatego w leczeniu problemów mięśniowo-szkieletowych zaleca się terapie alternatywne i uzupełniające10. Tuina jest szeroko stosowana klinicznie w Chinach jako tradycyjna metoda medyczna i jest popularna wśród pacjentów ze względu na swoją skuteczność i mniej skutków ubocznych. Terapia Tuina w zaburzeniach układu mięśniowo-szkieletowego może złagodzić ból i poprawić funkcjonowanie11,12,13. Pan Ding Jifeng, słynny praktykujący Tuina z Szanghaju, założył metodę rolkową Dinga14. Jest to unikalna technika walcowania i kruszenia o dużym obszarze siły, jednolitej i delikatnej sile oraz intensywnej penetracji.
Różne modele zwierzęce są oparte na różnych etiologiach. Mają one swoje wady i zalety, a dobór prawidłowych i odpowiednich modeli zwierzęcych ma ogromne znaczenie dla podstawowych eksperymentów, które pomagają zrozumieć komórkowe i molekularne szlaki sygnałowe regeneracji i naprawy po urazie mięśni szkieletowych w celu opracowania nowych terapii leczenia chorób mięśni szkieletowych. Chemicznie indukowane modele uszkodzeń mięśni są szeroko stosowane, z iniekcjami mięśni szkieletowych powodującymi martwicę włókien mięśniowych i wytwarzającymi zregenerowane obszary, które mogą się skutecznie zregenerować w ciągu 2 tygodni15. Zarówno notexin, jak i bupiwakaina mogą powodować uszkodzenie mięśni. Jednak notexin może powodować poważniejsze uszkodzenia miotoksyczne mięśni szkieletowych niż bupiwakaina, a naturalna regeneracja funkcjonalna jest stosunkowo wolniejsza16. Formowanie iniekcyjne leków domięśniowych nie tylko zajmuje mniej czasu, ale także ma kontrolowane efekty i zakres uszkodzenia mięśni szkieletowych. Ta wymierna kontrola sprawia, że udane formowanie jest mniej trudne15,17.
Reakcja zapalna jest podstawową reakcją biologiczną, która została szeroko zbadana w kontekście miopatii18,19. We wczesnych stadiach uszkodzenia mięśni szkieletowych martwica włókien mięśniowych zaburza miejscową homeostazę mięśni, a wiele komórek zapalnych nacieka miejsce urazu, wydzielając wiele cytokin prozapalnych19. Kinaza kreatynowa (CK) jest tradycyjnym biomarkerem surowicy do oceny uszkodzenia mięśni szkieletowych. Brakuje mu jednak specyficzności tkankowej20 i sensitivity21, co ogranicza jego zdolność do oceny stopnia uszkodzenia mięśni wywołanego przez lek i pośredniego raportowania stopnia regeneracji mięśni po urazie. Nowe biomarkery, w tym białko wiążące kwasy tłuszczowe 3 (FABP3), wykazały ostatnio stosunkowo wysoką swoistość tkankową i czułość w modelach uszkodzeń mięśni szkieletowych u gryzoni. FABP3 to rodzina białek wiążących ulegających ekspresji głównie w komórkach serca i mięśni szkieletowych i biorących udział w metabolizmie, transporcie i sygnalizacji kwasów tłuszczowych22. Dlatego wybraliśmy kombinację dwóch biomarkerów, CK i FABP3, aby ocenić zakres uszkodzenia mięśni szkieletowych wywołanego przez noteksynę i powrót do zdrowia po leczeniu.
U gryzoni mięśnie są płytkie, a obszar skóry jest mały, co również decyduje o tym, że różne parametry masażu u gryzoni nie będą takie same jak u ludzi, np. w terapii zwierząt, masażysta powinien traktować je z mniejszą siłą za pomocą metody rolkowej Dinga, i może nie sprzyjać działaniu tej techniki ze względu na mały rozmiar zranionego obszaru, co ostatecznie może prowadzić do zmniejszenia skuteczności masażu. W związku z tym w eksperymencie wykorzystano masażer rolkowy wykonany we własnym zakresie, który jest zgodny z charakterystyką metody rolkowej Dinga, do interwencji i oceny efektu terapeutycznego modelu uszkodzenia mięśni szkieletowych wywołanego przez noteksynę u szczurów, co pomaga ustandaryzować parametry Tuiny w eksperymentalnych badaniach na zwierzętach w celu dogłębnego zbadania molekularnego mechanizmu działania Tuiny, tradycyjna metoda leczenia chorób układu mięśniowo-szkieletowego, w medycynie układu mięśniowo-szkieletowego.

<table><tbody><tr><td>Strzykawka 1 ml</td><td>JIANGXI FENGLIN</td><td>20220521</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mikroprobówki&nbsp;</td><td>Servicebio</td><td>EP-150X-J</td><td></td></tr><tr><td>15 ml probówka wirówkowa</td><td>Servicebio</td><td>EP-1501-J</td><td></td></tr><tr><td>30G igła</td><td>CONPUVON</td><td>220318</td><td></td></tr><tr><td>5 ml probówka do pobierania krwi</td><td>Servicebio</td><td>QX0023</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt akrylowy</td><td>Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd</td><td>65643645</td><td></td></tr><tr><td>Szyna regulacyjna</td><td>CREROMEM</td><td></td><td></td>20220729</tr><tr><td>Wacik bawełniany</td><td>INOHV</td><td>22080215</td><td></td></tr><tr><td>Instrument znakowany enzymem</td><td>Rayto</td><td>RT-6100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>INOHV</td><td>211106</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt widelca</td><td>Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd</td><td>JL001</td><td></td></tr><tr><td>Krem do depilacji</td><td>Veet, Francja</td><td>LOTC190922002</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw roztworów do barwienia hematoksyliny</td><td>Wuhan Google Biotech</td><td>G1005</td><td></td></tr><tr><td>System obrazowania&nbsp;</td><td>Nikon, Japonia</td><td>Nikon DS-U3</td><td></td></tr><tr><td>IODOPHOR rozwiązanie dysfekcyjne</td><td>Hale& Obfity</td><td>mikroskop 20221205</td><td></td></tr><tr><td>Light</td><td>Nikon, Japonia</td><td>Nikon Eclipse E100</td><td></td></tr><tr><td>Przegroda graniczna</td><td>CREROMEM</td><td>20220724</td><td></td></tr><tr><td>Notexin</td><td>Latoxan S.A.S.</td><td>L8104-100UG</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital sodowy</td><td>Merck KGaA</td><td>P3761</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw ELISA kinazy kreatynowej szczura (CK)</td><td>LunChangShuoBiotech</td><td>YD-35237</td><td></td></tr><tr><td>Białko wiążące kwasy tłuszczowe szczura 3 (FABP3) Zestaw ELISA</td><td>LunChangShuoBiotech</td><td>YD-35730</td><td></td></tr><tr><td>Wałek gumowy</td><td>Hebei Mgkui Chemical Technology Co., Ltd</td><td>202207</td><td></td></tr><tr><td>Śruba</td><td>Weiyan Hardware</td><td>B05Z122</td><td></td></tr><tr><td>Sprague Dawley szczury</td><td>Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.</td><td>SYXK2019-0009</td><td></td></tr><tr><td>Sprężyna</td><td>Bingzhang Hardware</td><td>TH001</td><td></td></tr><tr><td>Ostrze chirurgiczne</td><td>Covetrus</td><td>#23</td><td></td></tr><tr><td>Kontroler wagi</td><td>Iyoys</td><td>HY-XSQ</td><td></td></tr></tbody></table>

naśladowanie metody dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów

Mimicking Ding's Roll Method on Notexin-Induced Muscle Injury in Rats

Metoda rolki Dinga jest jedną z najczęściej stosowanych manipulacji w tradycyjnych chińskich klinikach masażu (Tuina) i jedną z najbardziej wpływowych współczesnych manipulacji Tuina w Chinach. Opiera się na tradycyjnej metodzie toczenia powszechnie stosowanej w gatunku Zen jednym palcem i nazwanej metodą rolki Dinga. Ze względu na swoje działanie przeciwzapalne i wspomagające krążenie krwi, metoda rolowania Dinga ma solidne działanie terapeutyczne na miopatię. Ze względu na duży obszar siły przyłożony do ludzkiej skóry, metoda rolki Dinga jest trudna do wykonania na zwierzętach doświadczalnych z małymi obszarami skóry, takich jak szczury i króliki. Dodatkowo siła Tuiny zastosowana na organizm ludzki różni się od tej zastosowanej do zwierząt doświadczalnych, więc może się zdarzyć, że siła jest zbyt wysoka lub zbyt niska, aby osiągnąć efekt terapeutyczny Tuiny podczas eksperymentu. Ten eksperyment ma na celu stworzenie prostego masażera odpowiedniego dla szczurów w oparciu o parametry manipulacji toczeniem Dinga (siła, częstotliwość, czas trwania Tuina). Urządzenie może ustandaryzować manipulację w eksperymentach na zwierzętach i zmniejszyć zmienność siły Tuina stosowanej do różnych zwierząt z powodu czynników subiektywnych. Stworzono szczurzy model uszkodzenia mięśni szkieletowych wywołanego przez noteksynę, a markery uszkodzenia osocza, kinazę kreatynową (CK) i białko wiążące kwasy tłuszczowe 3 (FABP3), wykorzystano do oceny terapeutycznego wpływu Tuiny na uszkodzenie mięśni szkieletowych. Wyniki wykazały, że ten masażer Tuina może obniżyć poziom ekspresji CK i FABP3 oraz spowolnić stopień uszkodzenia mięśni szkieletowych. Dlatego opisywany tutaj masażer Tuina, naśladujący metodę rolki Dinga, przyczynia się do standaryzacji manipulacji Tuiną w badaniach eksperymentalnych i jest bardzo pomocny w późniejszych badaniach nad molekularnym mechanizmem Tuiny dla miopatii.

W celu zaobserwowania właściwości morfologicznych szkieletowych mięśni szczura po urazie, mięsień brzuchaty łydki barwiono hematoksyliną i eozyną, a przetworzone obrazy analizowano za pomocą oprogramowania analitycznego zgodnie z protokołem dla 8 szczurów w grupie. U szczurów z urazem mięśnia brzuchatego łydki wywołanym przez noteksynę (grupa NTX) wiele komórek mięśniowych było rozerwanych, zanikowych, martwiczych i rozmieszczonych nieregularnie. W obszarze objętym zmianami stwierdzono również wysoką infiltrację neutrofi...

Ten protokół opisuje proste urządzenie, które naśladuje metodę rolki Dinga, ustanawia szczurzy model uszkodzenia mięśni szkieletowych i wykorzystuje barwienie hematoksyliną-eozyną do obserwacji patologii uszkodzonej tkanki oraz test immunoenzymatyczny do wykrywania zmian w markerach uszkodzenia surowicy.

Naśladowanie metody Dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów

Ding's roll method is one of the most commonly used manipulations in traditional Chinese massage (Tuina) clinics and one of the most influential ...

Zakres naszych badań dotyczy biologicznego mechanizmu działania Tuiny w leczeniu chorób układu mięśniowo-szkieletowego. Tutaj staramy się, aby samodzielnie wykonane urządzenie Tuina ustandaryzowało i skutecznie wykonywało zabiegi Tuina na zwierzętach laboratoryjnych. Zajmujemy się niemożnością wykonania manipulacji toczeniem Dinga na szczurach, tworząc posłaniec, który może symulować manipulację toczeniem Dinga u szczurów i weryfikując skuteczność komunikatora na szczurach z urazami mięśni.Koncentrujemy się na pytaniach o skuteczność masażera rolkowego w przypadku uszkodzenia mięśni szkieletowych u szczurów na różnych parametrach w przyszłych standaryzowanych badaniach. Na początek wybierz masażer, który składa się z gumowego wałka o długości trzech centymetrów i średnicy 1,6 centymetra, uchwytu na widelec i trzycentymetrowej sprężyny o średnicy 0,9 centymetra. Wałek powinien również składać się z przegrody granicznej o długości trzech centymetrów i szerokości dwóch centymetrów.Szyna regulacyjna, śruba i akrylowa rączka o długości 12 centymetrów i średnicy 0,9 centymetra. Aby kontrolować siłę w metodzie rolki Dinga, przetestuj maksymalny nacisk masażera na kontroler ważenia. Upewnij się, że siła wynosi około 0.3 Newtona, regulując kąt przegrody ograniczającej.Następnie upewnij się, że minimalne ciśnienie wynosi około 0,08 niutona podczas toczenia. Przed zabiegiem zapoznaj się z aplikacją metronomu, aby kontrolować częstotliwość toczenia do 140 rolek na minutę i przećwicz to więcej niż trzy razy, aby ustandaryzować operację. Zacznij od losowego podzielenia szczurów na trzy grupy po osiem szczurów każda, w tym grupę kontrolną, notexin i notexin z grupami Tuina.Usuń włosy z prawej kończyny dolnej za pomocą kremu do depilacji po znieczuleniu szczura, a następnie zdezynfekuj skórę trzema naprzemiennymi rundami roztworu dezynfekującego jodoforu i 75% alkoholu okrężnymi ruchami na zewnątrz. Aby ustalić model uszkodzenia mięśni szkieletowych, użyj jednomililitrowej strzykawki z igłą o rozmiarze 30, aby wstrzyknąć roztwór notexin domięśniowo do mięśnia brzuchatego łydki tylko w jednej nodze. Odczekaj trzy sekundy przed wyciągnięciem igły.Wstrzyknąć szczurom w grupie kontrolnej 200 mikrolitrów roztworu soli fizjologicznej. Przenieś znieczulone szczury do pustych klatek z czystą ściółką. Obserwuj wzrokowo kolor tkanek i częstość oddechów, aż szczury odzyskają wystarczającą świadomość.Zwróć szczury do klatki domowej i zazwyczaj hoduj je przez 24 godziny. Właściwości morfologiczne mięśni szkieletowych szczura po urazie obserwowano za pomocą barwienia hematoksyliną i eozyną. Mięsień brzuchaty łydki uszkodzony przez wstrzyknięcie notexin wykazał pęknięcie wielu komórek mięśniowych w porównaniu z grupą kontrolną.Komórki były atroficzne, martwicze i nieregularnie ułożone z dużą infiltracją neutrofili i limfocytów wokół dotkniętego obszaru. Po pierwsze, wywołać uszkodzenie mięśni szkieletowych u szczurów za pomocą notexin. Aby przeprowadzić terapię, należy umieścić szczura na platformie eksperymentalnej w pozycji leżącej, przykryć jego głowę czarną szmatką, aby odsłonić mięsień brzuchaty łydki.Następnie przytrzymaj masażer i umieść wałek na mięśniu brzuchatym łydki szczura. Przetoczyć się do przodu, aż sprężyna zetknie się z przegrodą ograniczającą, a następnie wycofaj siłę i powróć do pierwotnego położenia, wykonując w ten sposób ruch posuwisto-zwrotny. Obracaj masażer z prędkością 140 rolek na minutę.Wykonuj każdą operację przez trzy minuty przez trzy kolejne dni. Po każdym podaniu należy umieścić szczury w klatce domowej i pościć przez osiem godzin po ostatnim zabiegu. Po leczeniu Tuina za pomocą masażera na kółkach, morfologia komórek mięśniowych poprawiła się w mięśniu brzuchatym łydki uszkodzonym przez wstrzyknięcie notexin.Jak zaobserwowano w przypadku barwienia hematoksyliną i eozyną, zaobserwowano mniej pękniętych komórek zanikowych i martwiczych oraz tylko niewielką liczbę komórek zapalnych w porównaniu z uszkodzonym mięśniem. Za pomocą Elizy analizowano również poziomy markerów urazów mięśni szkieletowych CK i FABP3. Markery te były znacznie zmniejszone w grupie Tuina w porównaniu z grupą notexin, co sugeruje, że Tuina może zmniejszać uszkodzenia mięśni szkieletowych.Zacznij od umieszczenia znieczulonego zwierzęcia na stole operacyjnym. Zdezynfekuj skórę trzema naprzemiennymi wacikami roztworu dezynfekującego jodoforu i 75% alkoholu. Użyj dwóch hemostatów, aby unieść skórę na środku brzucha.Użyj skalpela, aby przeciąć skórę i mięśnie brzucha od szwu do syntezy łonowej. Po otwarciu jamy brzusznej należy oddzielić jelito sterylnymi wacikami, aby odsłonić aortę brzuszną w tylnej ścianie brzucha. Zlokalizuj aortę brzuszną i weź pięć mililitrów krwi szczura do probówek do pobierania krwi.Trzymaj probówki z krwią w pozycji stojącej przez godzinę i odwiruj przy 3 000 G przez 10 minut, aby uzyskać osocze. Aby zebrać mięsień brzuchaty łydki, rozetnij skórę nożyczkami chirurgicznymi wzdłuż dolnego otworu brzucha w kierunku bocznej części prawej kończyny dolnej i odsłoń mięśnie kończyny dolnej. Po dokładnym oddzieleniu powięzi kleszczami, przeciąć skalpelem, aby usunąć nienaruszony mięsień brzuchaty łydki.Umyj mięsień brzuchaty łydki w sterylnym roztworze soli fizjologicznej, aby usunąć przylegające włosy i krew, a następnie umieść usunięty mięsień brzuchaty łydki w 15-mililitrowej probówce wirówkowej zawierającej 4% paraformaldehydu.

mimicking-ding-s-roll-method-on-notexin-induced-muscle-injury-in-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisano model zwierzęcy urazu in vivo. Metoda wykorzystuje podskórne położenie nerwu strzałkowego. Prędkość, czas aktywacji mięśni oraz łuk ruchu są wcześniej określone i zsynchronizowane przy użyciu komercyjnego oprogramowania. Zmiany po urazie są monitorowane in vivo za pomocą obrazowania/spektroskopii MR.

Model gryzoni in vivo w urazie wywołanym przykurczem i nieinwazyjne monitorowanie powrotu do sprawności

Opisano mysi model przezskórnej elektrycznej stymulacji nerwowo-mięśniowej (NMES), bezpiecznej i niedrogiej metody klinicznej, zastosowany do mięśni przedziału przedniego. Model ten ma tę zaletę, że wykorzystuje zmodyfikowane, powszechnie dostępne urządzenie kliniczne w celu wywołania ukierunkowanych i specyficznych skurczów mięśni u myszy.

Mysi model treningu mięśniowego za pomocą neuromuskularnej stymulacji elektrycznej

Tutaj prezentujemy szczegółowy protokół wykrywania zarówno starczych, jak i pluripotencjalnych komórek macierzystych w mięśniach szkieletowych po urazie, podczas indukowania przeprogramowania in vivo. Metoda ta jest odpowiednia do oceny roli starzenia się komórek podczas regeneracji i przeprogramowania tkanek in vivo.

Ocena starzenia się wywołanego urazem i przeprogramowania in vivo w mięśniach szkieletowych

Ten protokół opisuje wykorzystanie modelu przewlekłej aktywności skurczowej ćwiczeń do obserwacji wywołanych stymulacją adaptacji mięśni szkieletowych w tylnych kończynach szczura.

Zastosowanie przewlekłej stymulacji do badania adaptacji fenotypowych mięśni szkieletowych szczurów wywołanych aktywnością skurczową

Opisujemy metodę in vivo do badania funkcjonalnej utraty określonego genu w komórkach satelitarnych za pomocą kombinacji uszkodzenia mięśni szkieletowych za pośrednictwem kardiotoksyny i wstrzyknięcia samodostarczającego siRNA.

Analiza funkcji komórek satelitarnych podczas regeneracji mięśni szkieletowych przez uszkodzenie kardiotoksyny i wstrzyknięcie samodostarczającego siRNA in vivo

Przedstawiamy protokół użycia podskórnego igłowania Fu w modelu przewlekłego uszkodzenia zwężonego w celu wywołania bólu nerwu kulszowego u szczurów.

Skuteczność podskórnego igłowania Fu w bólu nerwu kulszowego: zmiany behawioralne i elektrofizjologiczne w modelu szczura z przewlekłym zwężeniem

To badanie rozwija skuteczny i powtarzalny protokół Tuina do leczenia zamrożonego barku, opracowany na modelu szczurzym. Takie podejście pomoże w zbadaniu metody leczenia zamrożonych ramion terapią Tuina.

Tuina w modelu zamrożonego szczura barkowego: wydajny i powtarzalny protokół

Ten artykuł przedstawia manipulację w leczeniu przewlekłego ucisku zwoju korzenia grzbietowego u szczurów za pomocą terapii Tuina, wraz z metodą oceny jej skuteczności na podstawie zachowania bólu i wyników histopatologicznych.

Przeciwbólowe działanie tuiny na modele szczurów z kompresją bólu zwoju korzenia grzbietowego

Prezentujemy protokół wykorzystujący symulator manipulacji tuina do przeprowadzenia terapii tuina "Three-Manipulation and Three-Acupoint" dla szczurów z niewielkimi przewlekłymi urazami zwężeniowymi i oceny skutecznych punktów czasowych przeciwbólowych tuiny w ciągu 24 godzin, testując zmiany bólu poprzez analizę behawioralną i zmiany w ekspresji czynnika zapalnego za pomocą testu immunoenzymatycznego.

Charakterystyka zmian bólowych u szczurów z uszkodzeniem nerwów w ciągu 24 godzin po jednorazowej interwencji Tuina

Przedstawiony tutaj protokół umożliwia identyfikację i wielowymiarową analizę komórek macierzystych i progenitorowych mięśni za pomocą jednokomórkowej cytometrii masowej oraz ich oczyszczanie przez FACS w celu dogłębnych badań ich funkcji. Podejście to można zastosować do badania dynamiki regeneracji w modelach chorobowych i testowania skuteczności interwencji farmakologicznych.

Identyfikacja i analiza progenitorów miogennych in vivo podczas ostrego uszkodzenia mięśni szkieletowych za pomocą wysokowymiarowej cytometrii masowej pojedynczej komórki

Poznaj metodę naśladowania techniki Dinga w leczeniu uszkodzeń mięśni szkieletowych u szczurów za pomocą urządzenia Tuina. Protokół obejmuje barwienie H-E i ELISA do oceny markerów uszkodzeń.

Naśladowanie metody Dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów

Przeglądaj więcej filmów