Name: Badanie wyborów dotyczących historii życia: wykorzystanie temperatury i rodzaju podłoża jako czynników oddziałujących na larwy plujki i preferencje samic (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-17T13:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 14 s
Description: Poznaj metody oceny preferencji pokarmowych larw i miejsc składania jaj przez samice plujek, wykorzystujące typ podłoża i temperaturę jako czynniki oddziałujące. Protokoły te pozwalają badać ekologię behawioralną owadów.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Patrícii J. Thyssen, Gabrieli S. Zampim i Lucasowi de Almeida Carvalho za udostępnienie kolonii L. cuprina i pomoc w przygotowaniu eksperymentu. Chcielibyśmy również podziękować Rafaelowi Barrosowi de Oliveirze za nakręcenie i montaż filmu. Badania te były wspierane przez Developing Nation Research Grant od Animal Behavior Society dla V.A.S.C. oraz przez grant FAPESP Dimensions US-Biota-São Paulo dla T.T.T. (20/05636-4). S.T. i D.L.F. byli wspierani przez FAPESP (odpowiednio grant podoktorski 19/07285-7 i stypendium doktoranckie 21/10022-8). V.A.S.C. i A.V.R. otrzymały stypendia doktoranckie CNPq (odpowiednio 141391/2019-7, 140056/2019-0). T.T.T. był wspierany przez CNPq (310906/2022-9).

Próbki much zostały pobrane za pomocą pułapek, a nie na zainfekowanych zwierzętach. Wydano licencję SISBIO (67867-1) na zbieranie i przetrzymywanie much z rodziny Calliphoridae w niewoli w warunkach laboratoryjnych. Próbki owadów są zwolnione z oceny etycznej w badaniach prowadzonych w Brazylii. Wołowina i krew bydlęca były pozyskiwane w handlu i nie było wymagane żadne zezwolenie etyczne.
1. Preferencje żywieniowe larw
<ol>
	<li>Przygotowanie szalek Petriego zawierających 2% agaru
	<ol>
		<li>Przygotuj cztery szalki Petriego z 2% agarem. Aby to zrobić, dodaj 6 g agaru bakteriologicznego do 300 ml wody i rozpuść tę mieszankę w kuchence mikrofalowej. Następnie podziel objętość równomiernie na cztery szklane szalki Petriego (150 x 20 mm), używając około 70 ml w każdym szaluku. 
		UWAGA: Przygotować szalki Petriego równą pożądanej liczbie powtórzeń eksperymentalnych. W tym badaniu wykorzystano 36 powtórzeń.</li>
		<li>Gdy agar zastygnie, użyj stożkowej probówki o pojemności 50 ml (średnica 3 cm), aby przebić cztery otwory w agarze, po dwa z każdej strony szalki Petriego, postępując zgodnie z dostarczonym wzorem cięcia (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1). 
		UWAGA: Ta konfiguracja jest podobna do wcześniej opisanych protokołów przez Fouche et al. (2021)40 i Boulay et al. (2016)42.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie podłoży
	<ol>
		<li>Aby przygotować świeże mięso z krwią, dodaj 12 ml rozcieńczonej krwi bydlęcej do 200 g świeżej mielonej mięsa wołowego. Dokładnie wymieszaj. Upewnij się, że używasz różnych cylindrów z podziałką i łyżek do każdego rodzaju mięsa, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego między substratami. 
		UWAGA: Rozcieńczona krew składa się w 50% z czystej krwi zmieszanej z antykoagulantem (3,8% cytrynianu sodu) i w 50% z przefiltrowanej wody.</li>
		<li>Aby przygotować zgniłe podłoże, dodaj 12 ml przefiltrowanej wody do 200 g 5-dniowego, zgniłego mięsa mielonego bydła i dobrze wymieszaj. 
		UWAGA: Zgniłe mięso otrzymano przez inkubację świeżego mięsa mielonego przez pięć dni w temperaturze 25 °C w niehermetycznych doniczkach z tworzywa sztucznego (mieszanina rozkładu tlenowego i beztlenowego). W każdym garnku znajdowało się 200 g świeżo zmielonego mięsa. Następnie został zamrożony do czasu użycia.</li>
		<li>Wypełnij dwa otwory w każdej szalce Petriego mieszanką świeżego mięsa i krwi, a pozostałe dwa otwory mieszanką zgniłego mięsa i wody. 
		UWAGA: Aby uniknąć odchyleń pozycji, zmieniaj rozmieszczenie różnych rodzajów mięsa na szalkach Petriego. Na przykład, niektóre szalki Petriego powinny mieć ten sam rodzaj mięsa zwrócony do siebie, podczas gdy w innych potrawach rodzaj mięsa powinien być skrzyżowany, jak pokazano na Rysunek 2.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Konfiguracja eksperymentalna
	<ol>
		<li>W temperaturze pokojowej (RT) 25 °C umieść poduszkę grzewczą bezpośrednio pod źródłem światła, aby równomiernie oświetlić obszar eksperymentalny i uniknąć odchylenia zachowania w kierunku lub przeciw światłu. Umieść tekturowe podkładki wokół poduszki grzewczej, aby upewnić się, że konfiguracja eksperymentalna pozostaje wypoziomowana. 
		UWAGA: Zastosowane źródło światła było białym światłem emitującym światło o niskim przegrzaniu, takie jak rurka neonowa. Poduszka grzewcza została umieszczona na stole tuż pod żarówkami sufitowymi (<silna klasa="xfig">Rysunek 3).</li>
		<li>Przykryj poduszkę grzewczą i podkładki z tektury wyrównującej czarnym kartonem i włącz poduszkę grzewczą. 
		UWAGA: Należy użyć czarnej tekturowej okładki, aby uniknąć wskazówek wizualnych, które mogą zniekształcić test zachowania.</li>
		<li>Umieść sześć szalek Petriego z agarem i substratem mięsnym na czarnym kartonie z dwoma podłożami, po jednym z każdego rodzaju, na poduszce grzewczej, a pozostałe dwa poza powierzchnią poduszki grzewczej (<silna klasa = "xfig">Rysunek 2). Pozwól substratom grzać się przez około 10 minut. 
		UWAGA: Na pokrywie szalek Petriego może tworzyć się kondensacja.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Test larwalny
	<ol>
		<li>Sprawdź temperaturę podłoży (strona zimna: 25 ± 2 °C; strona gorąca: 33 ± 2 °C) za pomocą termometru na podczerwień. 
		UWAGA: Poduszka grzewcza pozostaje włączona przez cały czas trwania eksperymentu. Pomiary temperatury wykonano na początku i na końcu eksperymentu. Chociaż temperatura wahała się o ± 2 °C, różnica temperatur między gorącymi i zimnymi warunkami wynosiła co najmniej 8 °C.</li>
		<li>Po osiągnięciu pożądanej temperatury umieść pięć larw w trzecim stadium na środku każdej szalki Petriego za pomocą pęsety (<silna klasa="xfig">Rysunek 2) i przykryj szalki Petriego pokrywkami. Niech eksperyment wyboru trwa 10 min. 
		UWAGA: Niektóre larwy mogą pełzać po krawędziach i pokrywie szalek Petriego. Jeśli jakaś larwa ucieknie, użyj pęsety, aby umieścić ją z powrotem na środku szalki Petriego.</li>
		<li>Po 10 minutach zdejmij wszystkie szalki Petriego z poduszki grzewczej i umieść je na innej powierzchni, aby uniknąć dalszego podgrzewania podłoży. Następnie policz liczbę larw w każdym podłożu, a także te, które nie wybrały żadnego podłoża. 
		UWAGA: Larwy Lucilia cuprina pozostają w wybranym podłożu, jak zaobserwowano w tym eksperymencie.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Preferencja miejsca składania jaj przez kobiety
<ol>
	<li>Konfiguracja eksperymentalna
	<ol>
		<li>Użyj zwykłej półki wcześniej pokrytej czarnym kartonem i równomiernie oświetlonej białymi paskami świetlnymi LED. 
		UWAGA: Należy użyć czarnych tekturowych okładek, aby uniknąć wskazówek wizualnych, które mogą zniekształcić test zachowania. Białe paski LED są przymocowane wzdłużnie na środku półki tuż nad eksperymentem. Półki użyte w zestawie zostały rozmieszczone w odległości 45 cm od siebie.</li>
		<li>Przy temperaturze pokojowej (25 °C) umieść poduszkę grzewczą na środku półki. Użyj tekturowych podkładek wokół poduszki grzewczej jako podpory, aby upewnić się, że konfiguracja eksperymentalna jest wypoziomowana.</li>
		<li>Przykryj poduszkę grzewczą i wyrównujące podkładki tekturowe czarnym kartonem, aby zachować ten sam wzór wizualny pod wszystkimi podłożami.</li>
		<li>Umieść dwa szklane pojemniki w kształcie krzyża na jednej półce, każdy powinien mieć dwa ramiona nad czarnym kartonem i poduszką grzewczą. Włącz białe paski świetlne LED i poduszki grzewcze przed rozpoczęciem eksperymentu.</li>
		<li>Użyj 70% etanolu do czyszczenia krzyżyków (wewnątrz krzyża i pokrywy), aby uniknąć zanieczyszczenia zapachem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie podłoży
	<ol>
		<li>Przygotuj cztery szalki Petriego (60 mm x 15 mm) na krzyżówkę z 5 g 5-dniowego, zgniłego lub świeżego mięsa (po dwa z każdego rodzaju podłoża). 
		UWAGA: Przygotować szalki Petriego równą liczbie powtórzeń eksperymentalnych razy cztery. W tym badaniu wykorzystano 30 powtórzeń, w sumie 120 przygotowanych szalek Petriego.</li>
		<li>Dodaj 1 ml rozcieńczonej krwi bydlęcej (50% czystej krwi z antykoagulantem i 50% przefiltrowanej wody) na świeże mięso i 1 ml przefiltrowanej wody na zgniłe mięso. Dokładnie wymieszaj mięso (świeże lub zgniłe) z płynem (krwią lub wodą) używając innej łyżki do każdego rodzaju mięsa. 
		UWAGA: Przygotowanie mięsa do testu na samicy jest bardzo podobne do testu na larwach, chociaż ilości są różne, ponieważ test na samicach będzie trwał dłużej niż test na larwach. Pamiętaj, aby używać różnych końcówek pipet i łyżek do każdego rodzaju mięsa, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego zapachu między substratami.</li>
		<li>Sprawdź, czy alkohol całkowicie wyparował z krzyżówek. Następnie umieść cztery szalki Petriego (po jednej z każdego rodzaju mięsa na poduszce grzewczej, a pozostałe dwie poza powierzchnią poduszki grzewczej) na końcu każdego ramienia krzyża (<silna klasa="xfig">Rysunek 4). Zamknij krzyże pokrywkami i pozwól substratom nagrzać się przez około 10 minut. 
		UWAGA: Ponadto, aby uniknąć odchyleń pozycji, zmieniaj rozmieszczenie różnych rodzajów mięsa w krzyżówkach. Na przykład, niektóre krzyżówki powinny mieć ten sam rodzaj mięsa na sąsiednich ramionach, podczas gdy w innych krzyżówkach ten sam rodzaj mięsa powinien znajdować się naprzeciwko siebie, jak pokazano na Rysunek 4.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Test dla kobiet
	<ol>
		<li>Zbierz ciężarne samice w klatce na muchy i wyizoluj je w osobnych probówkach. 
		UWAGA: Samice gravid charakteryzują się powiększonym i białawo-żółtym brzuchem, w przeciwieństwie do samic bez ciężaru (<silna klasa="xfig">Ryc. 5). Ciężarne samice zostały zebrane do eksperymentów między 10 a 16 dniem po wzejściu.</li>
		<li>Sprawdź temperaturę podłoży w krzyżówkach (strona zimna: 25 ± 2 °C; strona gorąca: 33 ± 2 °C) za pomocą termometru na podczerwień. 
		UWAGA: Podobnie jak w teście larwalnym, poduszka grzewcza pozostaje włączona przez cały czas trwania eksperymentu. Pomiary temperatury wykonano na początku i na końcu eksperymentu. Chociaż temperatura wahała się o ± 2 °C, różnica temperatur między gorącymi i zimnymi warunkami wynosiła co najmniej 8 °C.</li>
		<li>Umieść rurkę do góry nogami zawierającą jedną ciężarną samicę w otworze pośrodku każdego krzyża. Po wejściu samicy do krzyża wyjmij rurkę i zamknij otwór małą pokrywką. Po zamknięciu wszystkich krzyżyków umieść karton z przodu półki, aby zamknąć zestaw eksperymentalny. Pozwól eksperymentowi trwać 4 godziny.</li>
		<li>Następnie usuń samicę, ostrożnie łapiąc ją rurką i sprawdź, czy na podłożach nie ma jaj.</li>
		<li>Zidentyfikuj pokrywę każdej szalki Petriego z typem podłoża z każdej krzyżówki. Użyj 70% etanolu do oczyszczenia krzyżyków (wewnątrz krzyża i pokrywy) z wszelkich zapachów z testu. 
		UWAGA: W przypadku, gdy jaja nie mogą być policzone bezpośrednio po eksperymencie, szalki Petriego z substratami można przechowywać w temperaturze -20 °C.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Liczba jaj 
	UWAGA: Jeśli substraty na szalkach Petriego były zamrożone, rozmrozić je przed liczeniem.
	<ol>
		<li>Użyj mikroskopu stereoskopowego, aby policzyć liczbę jaj złożonych w każdym podłożu. Użyj pędzla i wody, aby oddzielić jajka, aby je policzyć.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Analiza danych i statystyki
<ol>
	<li>Obliczanie wskaźników preferencji
	<ol>
		<li>Dla każdej powtórzonej próby badań larwalnych (n = 36) i żeńskich (n = 30) oblicza się wskaźnik preferencji dla mięsa (oznaczonego jakomięso PI), określając stosunek larw lub jaj obecnych na świeżych podłożach (świeże gorące i świeże zimne) do całkowitej liczby larw lub jaj na wszystkich podłożach (świeże gorące + świeże zimno + zgniłe gorące + zgniłe zimno). 
		PImięso = (# larwy lub jaja na świeżych podłożach) / # Całkowita liczba larw lub jaj 
		UWAGA: Terminy "Gorąco" i "Zimno" wskazują na warunki temperaturowe wynoszące odpowiednio 33 ± 2 °C i 25 ± 2 °C.</li>
		<li>Podobnie, należy obliczyć wskaźnik preferencji dla temperatury (PI temp) dla każdej powtórzonej próby badań larwalnych i żeńskich jako liczbę larw lub jaj obecnych na gorących podłożach (świeże gorące i zgniłe gorące) podzieloną przez całkowitą liczbę larw lub jaj na wszystkich podłożach (świeże gorące + świeże zimno + zgniłe gorące + zgniłe zimno). 
		PItemp = (# larwy lub jaja na gorących podłożach) / # Całkowita liczba larw lub jaj 
		UWAGA: Wartości bliskie 1 oznaczają preferencję dla podłoży świeżych lub gorących, a wartości bliskie zeru wskazują preferencję dla podłoży zgniłych lub zimnych. PI można obliczyć ręcznie lub za pomocą dostarczonego kodu (pliki uzupełniające S1 i pliki uzupełniające S2).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Porównanie zaobserwowanej preferencji z symulowanymi danymi losowymi
	<ol>
		<li>Uruchom podany kod (plik uzupełniający S1 i plik uzupełniający S1), aby wygenerować symulowane dane i porównać je z zaobserwowanymi danymi. 
		UWAGA: Ten kod generuje 1000 symulowanych losowych zestawów danych dla larw i samic i oblicza wskaźniki preferencji (PI) dla każdej repliki symulowanej oraz obserwowane dane L. cuprina. Symulacje zakładają, że zarówno larwy, jak i samice nie wykazują preferencji dotyczących podłoża i dokonują losowych wyborów. Symulacje obejmują kluczowe aspekty behawioralne zwierząt, obejmujące różne scenariusze, takie jak: prawdopodobieństwo, że larwy nie wybiorą żadnego substratu oraz dorosłe samice koncentrujące składanie jaj na jednym podłożu lub rozprowadzające jaja równomiernie lub nie na różnych podłożach. Uogólnione modele liniowe (GLM, rodzina: quasibinomialny; link: logit) wykorzystano do porównania obserwowanych danych z testów zachowania z symulowanymi danymi losowymi. Zastosowany GLM dobrze nadawał się do tej analizy ze względu na ograniczony charakter Indeksu Preferencji (PI), mieszczącego się w zakresie od 0 do 1. GLM są biegłe w obsłudze zmiennych odpowiedzi o nierozkładzie normalnym i pozwalają na solidne porównania statystyczne. Wybór ten ułatwił uzyskanie istotnych informacji, umożliwiając skuteczne porównywanie zaobserwowanych danych z testów behawioralnych ze złożonymi wzorcami generowanymi przez symulowane dane losowe. W przypadku innych ustrukturyzowanych zestawów danych mogą być konieczne drobne korekty kodu.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Żaden nie zadeklarował.

Zrozumienie ewolucji nawyków żywieniowych, szczególnie w kontekście pasożytnictwa u plujek, wymaga zbadania preferencji podłoża na różnych etapach życia w zakresie żerowania lub składania jaj. Dlatego w niniejszym badaniu zaproponowano solidne i proste metody badania preferencji podłoża u larw i samic plujek. Metody te zostały przetestowane na Lucilia cuprina, fakultatywnej pasożytniczej muchówce2. Co ciekawe, eksperymenty ujawniły wyraźną skłonność larw L . cuprina do gnijącego ...

Muchy, szczególnie muskowate (w tym między innymi plujki, muchy domowe, muchy i muchy mięsne), prezentują szeroki zakres stylu życia, obejmujący zachowania pasożytnicze i nekropafagiczne1. Gatunki pasożytnicze zazwyczaj powodują muszycę, czyli zarażenie żywych tkanek przez larwy 2. W rodzinie Calliphoridae zarówno obligatoryjne, jak i fakultatywne gatunki pasożytnicze są głównymi szkodnikami zwierząt gospodarskich odpowiedzialnymi za straty ekonomiczne i niski dobrostan zwierząt z powodu inwazji robaków2,3,4,5,6,7. Szczególnie ><><><><><problematyczne są obligatoryjne pasożyty, takie jak ślimaki z Nowego i Starego Świata (odpowiednio >Cochliomyia hominivorax i Chrysomyia bezziana), a także pasożyty fakultatywne, takie jak muchówki (Lucilia cuprina i Lucilia sericata)2,5,6,7. Gatunki niepasożytnicze, w tym sapro-nekrofagiczne, rozwijają się w rozkładającej się i nekrotycznej materii organicznej i są powszechnie spotykane w niehigienicznych środowiskach. Ich ściśle niepasożytniczy tryb życia może być z powodzeniem wykorzystany do terapii czerwi, która wykorzystuje larwy much do oczyszczania ran nekroztycznych tkanek11,12,13. Muchy plujki są również wykorzystywane w kryminalistyce, ponieważ są jednymi z pierwszych organizmów, które lokalizują i kolonizują niedawno zmarłe ciała, a rozwijające się larwy służą jako sposób szacowania czasu śmierci14.
Styl życia muchówek był przedmiotem różnych badań naukowych (np. 15,16,17,18,19,20,21) ze względu na ich znaczenie w odniesieniu do interesów ludzkich. Zrozumienie mechanizmów biologicznych rządzących stylem życia gatunku może dostarczyć cennych informacji na temat ulepszania metod zwalczania gatunków szkodników. Co więcej, różnorodność i ewolucja stylu życia plujek stanowią idealny kontekst do badania pochodzenia i mechanizmów złożonych cech (np. pasożytnictwa). Pasożytnictwo wywołane przez larwy żywiące się żywymi tkankami ewoluowało niezależnie kilka razy w obrębie rodziny Calliphoridae22,23. Jednak ewolucyjna historia nawyków żywieniowych muchówek jest nadal w dużej mierze nieznana, a badania ograniczają się do mapowania nawyków wzdłuż filogenezy (np. 16,19,22) bez pomocy testów funkcjonalnych. Na przykład nie jest pewne, czy pasożyty obligatoryjne wyewoluowały z generalistów (tj. pasożytów fakultatywnych), czy bezpośrednio z gatunków nekrofagicznych. Procesy molekularne, fizjologiczne i behawioralne towarzyszące ewolucyjnym zmianom w stylu życia są również w dużej mierze nieznane.
W tym kontekście, fakultatywne pasożyty, takie jak plujka Lucilia cuprina, które mogą rozwijać się jako pasożyty na żywicielu lub jako nekrofagi na zwłokach, oferują możliwość zbadania czynników i mechanizmów kontrolujących wybory dotyczące stylu życia. Lucilia cuprina to kosmopolityczny gatunek znany z wywoływania ataków much, szczególnie w Australii, gdzie jest uważany za szkodnika3,16. Muszyca wywołana przez L. cuprina może również wystąpić u innych zwierząt gospodarskich, zwierząt domowych i ludzi3,24,25,26,27,28,29,30. Jednak jego larwy mogą również rozwijać się w tkankach martwiczych i rozkładającej się materii, a gatunek ten jest z powodzeniem stosowany w entomologii sądowej, ponieważ bardzo szybko lokalizuje i kolonizuje zwłoki31,32,33,34. Chociaż pasożytniczy i niepasożytniczy tryb życia plujek jest definiowany przez stadium larwalne, to dorosła samica wybiera miejsce składania jaj. W związku z tym dorosła samica ma duży wpływ na tryb życia larw, ponieważ te ostatnie mają ograniczoną mobilność. Jednak wybór samicy niekoniecznie oznacza, że larwy wolałyby ten sam substrat, gdy zostaną przedstawione choice35. Jedna z hipotez głosi, że zmiany behawioralne prowadzące do składania jaj przez samice na żywej tkance mogły być częścią wczesnego przejścia na pasożytniczy styl życia. Wstępne adaptacje lub zdolności fizjologiczne powstałych larw byłyby niezbędne do ich pomyślnego rozwoju w żywej tkance, prowadząc do pojawienia się pasożytniczego trybu życia. W związku z tym procesy, których dotyczy i które są wybrane, niekoniecznie muszą być zgodne między oboma etapami życia.
W tym kontekście, opracowano dwie metody testowania preferencji behawioralnych u much, w szczególności dla L. cuprina, w odniesieniu do substratu pokarmowego larw (test preferencji larw) i miejsca składania jaj (test preferencji samic). Metody te uwzględniają dwa oddziałujące na siebie czynniki: temperaturę i świeżość mięsa. Temperatura została wybrana jako kluczowy czynnik, ponieważ większość przypadków muszycy występuje u zwierząt homeotermicznych2. W związku z tym temperatura 33 °C została wybrana jako wskaźnik zastępczy dla "czynnika pasożytniczego stylu życia", podczas gdy temperatura 25 °C (temperatura pokojowa) reprezentuje "czynnik niepasożytniczy". Wybrano temperaturę 25 °C, ponieważ jest ona reprezentatywna dla średniej rocznej temperatury odnotowanej w Brazylii (National Institute of Meteorology, INMET). Dodatkowo pod uwagę wzięto dwa rodzaje substratów mięsnych, oba ze źródeł bydlęcych: (i) świeże mięso uzupełnione krwią, naśladujące substrat dla pasożytniczego trybu życia, który jest używany do hodowli pasożytniczej plujki Co. hominivorax w warunkach laboratoryjnych36, oraz (ii) 5-dniowe zgniłe mięso, naśladujące substrat dla nekrofagicznego stylu życia. Podłoże bydlęce jest powszechnie używane do hodowli L. cuprina w warunkach laboratoryjnych27,37,38,39, ponieważ oferuje kilka zalet pod względem dostępności, opłacalności i praktyczności, będąc jednocześnie podłożem uzasadnionym ekologicznie. Inne badania40,41 porównując wpływ zgniłych i świeżych substratów u muchówek, użyły 7-dniowego zgniłego podłoża (w warunkach beztlenowych) i wykazały niekorzystny wpływ zgniłego podłoża na tempo rozwoju, przeżycie i wzrost. Ponieważ L. cuprina jest znana z kolonizacji świeżych zwłok, które są zwykle wystawione na działanie powietrza, zdecydowaliśmy się użyć 5-dniowego zgniłego mięsa (mielonej wołowiny) w niehermetycznych doniczkach (rozkład tlenowy i beztlenowy), aby naśladować podłoże nekrofagiczne.
Przedstawione tutaj projekty eksperymentalne oferują przewagę w postaci rozróżniania preferencji dla poszczególnych czynników, jak również ich łącznych efektów. Co więcej, oceniane fenotypy, a mianowicie wybór podłoża pokarmowego dla larw i liczba składanych jaj, są bezpośrednio związane z biologicznymi i ekologicznymi aspektami gatunków plujek. Przydatność tych protokołów podkreślono poprzez wykazanie ich skuteczności w przypadku L. cuprina. Dodatkowo dostępny jest skrypt do analizy statystycznej, który można wykorzystać do porównania zaobserwowanych wyników uzyskanych u L. cuprina z symulowanymi danymi losowymi, zapewniając solidną analizę statystyczną i interpretację.

<table><tbody><tr><td>Agar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>05038-500G</td><td>Do mikrobiologii</td></tr><tr><td>Czarne kartony</td><td>-</td><td>-</td><td>70x50 cm</td></tr><tr><td>Krew bydlęca z antykoagulatem&nbsp;</td><td>-</td><td></td> <td>50% czystej krwi bydlęcej z antykoagulantem (3,8% cytrynianu sodu) + 50% filtrowanej wody</td></tr><tr><td>Mięso mielone bydlęce</td> <td>-</td><td></td> <td>około 7-8% tłuszczu</td></tr><tr><td>Szczotka</td> <td>-</td><td></td> <td>wykonana z tworzywa sztucznego</td></tr><tr><td>Rurka stożkowa</td><td>Falcon lub Generic-50</td><td></td> <td>ml</td></tr><tr><td>Szklane pojemniki w kształcie krzyża</td><td>Ręcznie robione</td><td>NA</td><td>48x48 cm, 8 cm wysokości i 8 cm szerokości</td></tr><tr><td>Erlenmeyer</td><td>Vidrolabor</td><td>NA</td><td>500 mL</td></tr><tr><td>70% Etanol</td><td>Synth</td><td>A1084.01.BL</td><td>70% absolut etanolu etylowego + 30% przefiltrowana woda</td></tr><tr><td>Butla z podziałką</td><td>Nalgon lub Generic-500</td><td></td> <td>ml i 50 mL Poduszka</td></tr><tr><td>grzewcza</td> Thermolux-30x40 <td></td><td></td><td>cm wymiary, 40 W, 127 V</td></tr><tr><td>Termometr na podczerwień</td><td>HeTaiDa</td><td>HTD8808</td><td>Bezdotykowy termometr do ciała (częstotliwość próbkowania: 0,5 s, Dokładność: &plusmn; 0,2 &stopni; C, Wymiary: 5-15 cm)</td></tr><tr><td>szalka Petriego (szkło)</td><td>Precyzja</td><td>NA</td><td>150x20 mm wymiary</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>(Uwaga: szalki Petriego mogą być plastikowe, jeśli zostaną użyte tylko raz)</td></tr><tr><td>Szalka Petriego PS</td><td>Cralplast</td><td>18130</td><td>Wymiary 60x15 mm</td></tr><tr><td>Plastikowa pipeta Pasteura</td> <td>-</td><td></td> <td>3 ml (objętość całkowita)</td></tr> <tr><td>Cytrynian sodu</td><td>Synth</td><td>C11033.01.AG</td><td>3,8% Cytrynian sodu (38 g rozcieńczony w 1 l przefiltrowanej wody)</td></tr> <tr><td>Łyżki</td> <td>-</td><td></td> <td>Potrzeba więcej niż jednej łyżki. Użyj jednego dla każdego rodzaju podłoża mięsnego. Najlepiej ze stali nierdzewnej.</td></tr><tr><td>Szpatułka ze stali nierdzewnej</td><td>Generic-Flat</td><td></td> <td>end i końcówka łyżkowa</td></tr><tr><td>Stereoskop</td> Bioptika-WF10X<td></td><td></td><td>/22 soczewki</td></tr><tr><td>Pęseta</td> <td>-</td><td></td> <td>wykonana z metalu i drobna końcówka</td></tr><tr><td>Białe paski świetlne led</td><td>NA</td><td>NA 4,8</td><td>W, 2x0,05 mm&sup2;, 320 lumenów, Temperatura barwowa:6500 K (biały)</td></tr></tbody></table>

badanie wyborów dotyczących historii życia: wykorzystanie temperatury i rodzaju podłoża jako czynników oddziałujących na larwy plujki i preferencje samic

Exploring Life History Choices: Using Temperature and Substrate Type as Interacting Factors for Blowfly Larval and Female Preferences

Plujki (Diptera: Calliphoridae) prezentują szeroki zakres larwalnego trybu życia, zazwyczaj klasyfikowany jako obligatoryjne pasożytnictwo, fakultatywne pasożytnictwo i kompletna sapro-nekrofagia. Kilka gatunków pasożytniczych, zarówno obligatoryjnych, jak i fakultatywnych, uważa się za mające znaczenie sanitarne i gospodarcze, ponieważ ich larwy mogą powodować muszycę (inwazję larw w żywych tkankach). Warto jednak zauważyć, że dorosła samica odgrywa decydującą rolę, ponieważ wybiera miejsce składania jaj, a zatem w dużej mierze decyduje o zwyczaju żywieniowym i warunkach rozwoju larw. W tym badaniu zaproponowano dwa protokoły do badania preferencji żywieniowych larw i preferencji miejsca składania jaj przez samice, biorąc pod uwagę dwa oddziałujące na siebie czynniki: rodzaj podłoża mięsnego i temperaturę. Przedstawione tu konfiguracje pozwoliły na przetestowanie larw Lucilia cuprina i grawitujących samic w teście czterokrotnego wyboru z dwiema temperaturami (33 ± 2 °C i 25 ± 2 °C) i dwoma rodzajami substratów mięsnych (świeże mięso uzupełnione krwią i 5-dniowe zgniłe mięso). Larwy lub ciężarne samice mogą zdecydować się na zakopywanie się lub składanie jaj odpowiednio w jednym z następujących elementów: zgniłe mięso w temperaturze 25 °C (symulujące stan gatunku nekrafagicznego), świeże mięso uzupełnione krwią w temperaturze 33 °C (symulujące stan gatunku pasożytniczego) oraz dwie grupy kontrolne, zgniłe mięso w temperaturze 33 °C lub świeże mięso uzupełnione krwią w temperaturze 25 °C. Preferencję ocenia się, licząc liczbę larw lub jaj złożonych w każdym wariancie dla każdej kontrpróby. Porównanie obserwowanych wyników z rozkładem losowym pozwoliło na oszacowanie istotności statystycznej preferencji. Wyniki wskazują, że larwy L. cuprina silnie preferują zgniłe podłoże w temperaturze 25 °C. I odwrotnie, preferencje samic dotyczące miejsca składania jaj były bardziej zróżnicowane w zależności od rodzaju mięsa. Metodologię tę można dostosować do badania preferencji innych gatunków owadów o podobnej wielkości. Inne pytania można również zbadać, stosując alternatywne warunki.

Aby zademonstrować skuteczność przedstawionych metod, eksperymenty przeprowadzono z wykorzystaniem laboratoryjnej populacji Lucilia cuprina (rodzina: Calliphoridae), fakultatywnego pasożytniczego rodzaju muchówek2. Cały surowy zestaw danych uzyskanych dla tego gatunku znajduje się w Pliku uzupełniającym S3 wraz z wynikami testów preferencji podłoża dla larw i samic. Aby ocenić, czy larwy i samice wykazują preferencję do jakiegokolwiek podłoża, dane obserwacyjne porównano ...

Tutaj szczegółowo opisano dwa protokoły oceny preferencji dotyczących źródła pożywienia i składania jaj u larw i samic plujek. Składają się one z czterech opcji, w których na siebie oddziałują dwa czynniki: rodzaj podłoża i temperatura. Testy umożliwiają określenie preferencji larw dotyczących źródła pożywienia oraz preferencji miejsca składania jaj przez samice.

Badanie wyborów dotyczących historii życia: wykorzystanie temperatury i rodzaju podłoża jako czynników oddziałujących na larwy plujki i preferencje samic

Blowflies (Diptera: Calliphoridae) present a wide range of larval lifestyles, typically classified as obligate parasitism, facultative parasitism, and ...

Muchy plujki to zróżnicowana grupa much, które mogą być pasożytami obligatoryjnymi lub fakultatywnymi, a także sapro-nekrofagicznymi. Obligatoryjne gatunki pasożytnicze żywią się wyłącznie żywymi tkankami i powodują muszycę kręgowców, podczas gdy gatunki sapro-nekrofagiczne żywią się rozkładającą się materią organiczną. Fakultatywne pasożyty mogą żywić się zarówno żywym, jak i rozkładającym się materiałem i żyć jako pasożyty lub nie.Chociaż stadium larwalne jest najbardziej problematyczne, samica odgrywa decydującą rolę, ponieważ wybiera miejsce składania jaj, a tym samym w dużej mierze kontroluje, gdzie larwy będą się żywić i rozwijać. Ogólnym celem przedstawionych metod jest ocena zarówno preferencji substratów pokarmowych larw, jak i wyboru miejsca składania jaj przez samice u muchówek. Preferencje żywieniowe larw.Krok pierwszy, przygotowanie szalek Petriego z agarem 2%Przygotuj szalki Petriego z 2%agarem. W tym celu dodaj sześć gramów agaru bakteriologicznego do 300 mililitrów wody i rozpuść tę mieszankę w kuchence mikrofalowej. Następnie podziel objętość na cztery szalki Petriego.Przygotuj liczbę szalek Petriego z agarem zgodnie z pożądaną liczbą powtórzeń. Po zestaleniu się agaru przebij cztery otwory w agarze za pomocą narzędzia tnącego dostarczonego w naszym papierze w 50-mililitrowej stożkowej probówce o średnicy trzech centymetrów, po dwa otwory z każdej strony szalki Petriego. Krok drugi, przygotowanie podłoży.Aby przygotować świeże mięso z krwią, użyj 12 mililitrów rozcieńczonej krwi bydlęcej, która jest w połowie krwią, z roztworem antykoagulantu i w połowie przefiltrowaną wodą. Następnie dodaj ten roztwór do 200 gramów świeżej mielonej wołowiny wołowej i dobrze wymieszaj. Pamiętaj, aby używać różnych cylindrów z podziałką i łyżek do każdego rodzaju mięsa, aby uniknąć innych zanieczyszczeń między podłożami.Aby przygotować zgniłe podłoże, dodaj 12 mililitrów przefiltrowanej wody do 200 gramów zgniłego mięsa i wymieszaj tak, jak zrobiono to ze świeżym mięsem. Przed rozpoczęciem eksperymentu mięso pozostawia się do zgnicia na pięć dni w temperaturze 25 stopni Celsjusza w inkubatorze. Po przygotowaniu podłoża mięsnego wypełnij otwory w agarze świeżym i zgniłym mięsem z każdej strony.Pamiętaj, aby losowo ustawić pozycję mięsa na szalkach Petriego, jak pokazujemy tutaj. Krok trzeci, konfiguracja eksperymentalna. W pomieszczeniu o temperaturze 25 stopni Celsjusza ustaw poduszkę grzewczą tuż pod źródłem światła, aby równomiernie oświetlić test preferencji w szerokim odchyleniu zachowania w kierunku lub przeciw światłu.Następnie użyj tektury wokół poduszki grzewczej jako podpory, aby utrzymać wszystko na tym samym poziomie. Umieść karton na całym zestawie, poduszce grzewczej i tekturze nośnej, aby zachować ten sam wzór kolorów nad wszystkimi podłożami. Umieść sześć szalek Petriego z agarem i substratem mięsnym na czarnym kartonie z dwoma podłożami, po jednym z każdego rodzaju na poduszce grzewczej, a pozostałe dwa na zewnątrz powierzchni poduszki grzewczej.Robiąc to, pozwolimy, aby każda z szalek Petriego miała cztery podłoża: świeże i zimne, zgniłe i zimne, świeże i gorące, a na końcu zgniłe i gorące. Pozwól substratowi się nagrzać przez około 10 minut. Krok czwarty, badanie larwalne.Sprawdź temperaturę podłoża za pomocą termometru na podczerwień. Chłodniejsza strona powinna mieć około 25 stopni Celsjusza, a cieplejsza około 33 stopni Celsjusza. Po osiągnięciu pożądanej temperatury umieść pięć larw trzeciego stadium w środku każdej szalki Petriego za pomocą pęsety.Następnie przykryj szalkę Petriego pokrywką i pozwól eksperymentowi wyboru trwać dokładnie przez 10 minut. Podczas eksperymentu larwy będą pełzać po szalce Petriego i wybierać jedną z czterech opcji. Jeśli jakieś larwy uciekną, weź je za pomocą pęsety i umieść z powrotem na środku szalki Petriego.Po 10 minutach wyjmij wszystkie eksperymenty Petriego z poduszki grzewczej i umieść je na innej powierzchni. Następnie policz, ile larw znajduje się w każdym podłożu. Zaobserwowaliśmy, że kolorowe larwy pozostają w wybranym przez siebie podłożu.Preferencja miejsca składania jaj przez samice. Krok pierwszy, konfiguracja eksperymentalna. Zadanie można wykonać na zwykłej półce, która wcześniej była pokryta czarnymi kartonami.Te kartony, podobnie jak w teście larwalnym, są potrzebne, więc dla dorosłych samic nie są dostępne żadne wskazówki wizualne. Półka musi być również równomiernie wyłożona taśmami LED. W pomieszczeniu o temperaturze 25 stopni Celsjusza umieść poduszkę grzewczą na środku półki.Użyj tektury wokół poduszki grzewczej jako podpory, aby utrzymać wszystko na tym samym poziomie. Umieść karton na całym zestawie, podkładkę grzewczą oraz tekturę nośną, aby zachować ten sam kolorowy wzór nad wszystkimi podłożami. Umieść poduszki grzewcze pod dwoma ramionami tego samego krzyża pomiędzy dwoma różnymi krzyżami.Pozwoli to na lepsze wykorzystanie przestrzeni w półce. Włącz diody LED i poduszkę grzewczą przed rozpoczęciem eksperymentu. Pamiętaj, aby zawsze czyścić szklanki w kształcie krzyża 70% etanolem, aby uniknąć zanieczyszczenia zapachem między testami.Krok drugi, przygotowanie podłoży. Przygotuj plastikowe szalki Petriego z pięcioma gramami świeżego lub zgniłego mięsa. Podłoże jest takie samo jak w teście larwalnym, świeże i zgniłe w wieku pięciu dni.Do każdej krzyżówki potrzebne są w sumie cztery szalki Petriego, dwie ze świeżym mięsem i dwie ze zgniłym mięsem. Do świeżego mięsa dodać jeden milimetr rozcieńczonej krwi bydlęcej, która stanowi połowę krwi z antykoagulantem i połowę wody. Do zgniłego mięsa dodaj jeden milimetr przefiltrowanej wody.Pamiętaj, aby dobrze wymieszać oba podłoża i używać różnych łyżek, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego zapachem między zgniłym a świeżym mięsem. Sprawdź, czy alkohol całkowicie wyparował na krzyżach. Następnie umieść cztery szalki Petriego z mięsem na końcach ramion krzyża, po jednej z każdego rodzaju mięsa na poduszce grzewczej, a pozostałe dwie na zewnątrz powierzchni poduszki grzewczej.Dzięki temu każda z krzyżówek będzie miała cztery podłoża, świeże i zimne, zgniłe i zimne, świeże i gorące, a na końcu zgniłe i gorące. Zamknij otwór krzyżyków i pozwól substratom się ogrzać przez około 10 minut. Krok trzeci, test dla kobiet.Zbierz samice w klatce muchowej. Charakteryzują się powiększonym i białawo-żółtym brzuchem. Oddziel jedną samicę dla każdej krzyżówki w osobnych probówkach.Sprawdź temperaturę podłoży za pomocą termometru na podczerwień. Chłodniejsza strona powinna mieć około 25 stopni Celsjusza, a cieplejsza około 33 stopni Celsjusza. Umieść jedną rurkę z złapaną samicą w środkowym otworze każdego krzyża.Po wejściu kobiety do krzyża zamknij otwór pokrywą. Po umieszczeniu wszystkich samic w każdym krzyżu, zamknij otwartą część półki czarnym kartonem, aby osłonić ją przed zewnętrznymi źródłami światła. Pozwól eksperymentowi trwać dokładnie cztery godziny.Po upływie tego czasu usuń samicę z krzyży za pomocą rurki. Następnie sprawdź, czy na podłożu nie ma innych pozycji. Zidentyfikuj pokrywę każdej szalki Petriego z nazwą podłoża.Użyj 70% etanolu, aby oczyścić krzyże z wszelkich zapachów z testu. Krok czwarty, liczenie jaj. Szalki Petriego można zamrozić przed liczeniem.W takim przypadku rozmrozić szalki Petriego. Następnie policz liczbę jaj w każdym podłożu za pomocą mikroskopu stereoskopowego. Analiza danych i statystyki.Krok pierwszy, obliczenie indeksu preferencji. Dla każdej powtórzonej próby behawioralnej obliczany jest wskaźnik preferencji oddzielnie dla rodzaju podłoża i temperatury. Wskaźnik preferencji dla rodzaju podłoża jest reprezentowany przez liczbę larw lub jaj na podłożach ze świeżego mięsa podzieloną przez całkowitą liczbę larw lub jaj na wszystkich podłożach.Wskaźnik preferencji dla temperatury jest reprezentowany przez liczbę larw lub jaj na gorących podłożach podzieloną przez całkowitą liczbę larw lub jaj na wszystkich podłożach. Biorąc pod uwagę obie preferencje indeksu, wartości bliskie jednemu odzwierciedlają preferencję dla świeżych lub gorących substratów. A wartości bliskie zeru oznaczają preferencję dla zgniłych lub zimnych podłoży.Krok drugi, porównanie zaobserwowanej preferencji do wyboru losowego. Możemy zwizualizować indeks preferencji dla temperatury na osi Y i indeks preferencji dla mięsa na osi X. Aby określić, czy larwy i/lub samice wykazują preferencję co do danego stanu, porównaliśmy nasze wyniki z losowym wyborem przy użyciu symulowanych danych.Nasze wyniki dotyczące larw znacznie różniły się od wszystkich symulowanych zestawów danych pod względem temperatury i preferencji dotyczących mięsa. Graficznie widać, że larwy wykazywały silną preferencję dla zgniłego i zimnego podłoża. Odkryliśmy, że preferencje kobiet dotyczące rodzaju mięsa znacznie różniły się od losowego wyboru w około 30% porównań.Jeśli chodzi o temperaturę, około 70% naszych porównań wykazało znaczną preferencję. Oba protokoły dają możliwość zbadania preferencji larw i samic pod kątem dwóch czynników oddziałujących na siebie: rodzaju mięsa i temperatury. Testy są proste i można je dostosować do testowania preferencji innych gatunków o tej samej wielkości i/lub innych warunkach.Wiemy, że zachowanie zwierząt jest dość zmienne i zależy od kilku czynników środowiskowych, dlatego należy zachować szczególną ostrożność, aby uniknąć nierównomiernego oświetlenia, utrzymujących się zapachów i innego zanieczyszczenia podłoża przez wspólne naczynia. Dzięki za oglądanie.

exploring-life-history-choices-using-temperature-substrate-type-as

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Muszki owocowe Drosophila potrafią rozróżniać niewielkie zmiany temperatury i dlatego wybierają środowiska o sprzyjających warunkach termicznych. Ten film opisuje test behawioralny, który testuje preferencje temperaturowe larw Drosophila na liniowym gradiencie termicznym.

Test gradientu temperatury: metoda badania preferencji temperatury u larw Drosophila

Samice Drosophila wybierają między substratami i wybierają miejsca, które są atrakcyjne do składania jaj. Ten film opisuje test behawioralny, który testuje ich podejmowanie decyzji, zwany testem preferencji składania jaj. Prezentowany klip demonstruje procedurę z niestandardową konfiguracją, która umożliwia naukowcom nie tylko testowanie zachowania wielu samic w tym samym czasie, ale jest również kompatybilna z nagrywaniem wideo i konfiguracjami optogenetycznymi.

Drosophila Test preferencji składania jaj: metoda testowania podejmowania decyzji u much

Tutaj opisujemy test preferencji jasno-ciemnej dla larw Drosophila. Test ten dostarcza informacji na temat wrodzonej i okołodobowej regulacji wykrywania światła i przetwarzania fotozachowania.

Test preferencji świetlnej w celu zbadania wrodzonego i okołodobowego regulowanego fotozachowania u larw Drosophila

Niedawno zidentyfikowaliśmy nową metodę rytmu preferencji temperatury (TPR) u Drosophila, w której preferowana temperatura u muszek wzrasta w ciągu dnia i spada w nocy. TPR jest regulowany niezależnie od innego okołodobowego wyjścia, aktywności lokomotorycznej. Tutaj opisujemy budowę i analizę TPR u Drosophila.

Projektowanie i analiza zachowania preferencji temperaturowych i ich rytmu okołodobowego u Drosophila

Ten protokół opisuje test o wysokiej przepustowości do testowania preferencji składania jaj przez Drosophila melanogaster w rozdzielczości pojedynczego zwierzęcia.  Ten test zapewnia prostą, wydajną i skalowalną platformę do identyfikacji genów i składników obwodów, które kontrolują prosty proces podejmowania decyzji.

Wysokoprzepustowy test do badania preferencji składania jaj u poszczególnych Drosophila melanogaster

Tutaj prezentujemy protokół do określenia preferowanej temperatury środowiskowej larw Drosophila za pomocą ciągłego gradientu termicznego.

Test gradientu temperatury w celu określenia preferencji termicznych larw Drosophila

Tutaj prezentujemy protokół do badania preferencji przepoczwarzania dojrzałych larw Ectropis grisescens w odpowiedzi na czynniki glebowe (np. rodzaj podłoża i wilgotność) za pomocą wybranych testów biologicznych. Przedstawiamy również protokół testów biologicznych bez wyboru w celu określenia czynników wpływających na zachowania przepoczwarzające i przeżywalność E. grisescens.

Testy biologiczne typu "choice" i "no-choice" w celu zbadania preferencji przepoczwarzenia i powodzenia w pojawianiu się Ectropis grisescens

Tutaj prezentujemy protokół do automatycznego określania sprawności lokomotorycznej Drosophila przy zmieniających się temperaturach za pomocą programowalnej areny kontrolowanej temperaturą, która wytwarza szybkie i dokładne zmiany temperatury w czasie i przestrzeni.

Zautomatyzowana metoda określania wydajności Drosophila w odpowiedzi na zmiany temperatury w czasie i przestrzeni

Tutaj opisujemy budowę i wykorzystanie tunelu aerodynamicznego do testów behawioralnych z owadami za pośrednictwem zapachu. Konstrukcja tunelu aerodynamicznego ułatwia uwalnianie źródeł zapachów na kilka sposobów, z bodźcami wizualnymi lub bez. Eksperymenty w tunelu aerodynamicznym są ważnymi metodami identyfikacji behawioralnie aktywnych lotnych substancji chemicznych.

Tunel aerodynamiczny do testów behawioralnych owadów na podstawie zapachu

Owady mają optymalny zakres temperatur otoczenia, w którym starają się pozostać, a wiele czynników zewnętrznych i wewnętrznych może zmienić tę preferencję. W tym miejscu opisujemy opłacalną i prostą metodę badania wyboru temperatury, która pozwala owadom swobodnie wykazywać swoje naturalne zachowania.

Określanie preferencji temperaturowych komarów i innych ektotermów

Kulometryczna respirometria jest idealna do pomiaru tempa metabolizmu małych organizmów. Po dostosowaniu do Drosophila melanogaster w niniejszym badaniu, zmierzone spożycieO2 mieściło się w zakresie zgłoszonym dla dzikiego typu D. melanogaster w poprzednich badaniach. Konsumpcja O2 na muchę przez mutanty CASK, które są mniejsze i mniej aktywne, była znacznie niższa niż w przypadku typu dzikiego.

Pomiar zużyciaO2 u Drosophila melanogaster za pomocą mikrorespirometrii kulometrycznej

Poznaj metody oceny preferencji pokarmowych larw i miejsc składania jaj przez samice plujek, wykorzystujące typ podłoża i temperaturę jako czynniki oddziałujące. Protokoły te pozwalają badać ekologię behawioralną owadów.

Badanie wyborów dotyczących historii życia: wykorzystanie temperatury i rodzaju podłoża jako czynników oddziałujących na larwy plujki i preferencje samic (Wideo) | JoVE Journal

Badanie wyborów dotyczących historii życia: wykorzystanie temperatury i rodzaju podłoża jako czynników oddziałujących na larwy plujki i preferencje samic

Przeglądaj więcej filmów