27 października 2023
Ten protokół przedstawia model chronicznego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) dla depresji oparty na mongolskiej teorii medycznej, wraz z metodami walidacji testów behawioralnych.
Zakres naszych badań to Mongolskie Badania Medyczne. W niniejszej pracy badamy czynniki przyczyniające się do depresji w medycynie mongolskiej, ze szczególnym naciskiem na interakcję między czynnikami wewnętrznymi, takimi jak wiatr, biofilm, a czynnikami zewnętrznymi. Problem dostosowania się do braku tradycyjnych mongolskich modeli medycznych został rozwiązany.
Protokół ten odnosi się do ustanowienia modelu zwierzęcego opartego na mongolskiej teorii medycznej i zawiera pewne sugestie dotyczące przyszłych badań nad medycyną mongolską. W badaniach nad zaburzeniami depresyjnymi ustalenie modelu zwierzęcego ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia patologicznych mechanizmów i skutków nowych leków. W porównaniu z innymi technikami, protokół ten jest bardziej zgodny z patogenezą i zasadami leczenia depresji w tradycyjnej medycynie mongolskiej, co pomoże w przyszłych badaniach nad leczeniem depresji w medycynie mongolskiej.
Protokół może wykazać związek między czynnikami zewnętrznymi i wewnętrznymi oddziałującymi na siebie w celu wywołania choroby i jest zgodny z systemem teoretycznym medycyny mongolskiej. Przyczyni się do rozwoju podstawowych badań tradycyjnej medycyny nad depresją i dostarczy pewnych zaleceń, które pomogą kolejnym badaczom w badaniach, rozwoju i wykorzystaniu tradycyjnych leków. Po podzieleniu szczurów na grupę kontrolną lub CON i modelową lub MOD, trzymaj je w indywidualnych klatkach.
W przypadku metody zacisku ogonowego zabezpiecz ogon szczura i zmierz czas zaciskania przez jedną minutę. W przypadku metody pozbawiania wody wyjmij butelkę do karmienia z klatki i nagrywaj szczura przez 24 godziny. W przypadku metody pozbawiania pokarmu wyjmij pokarm z klatki i nagrywaj szczura przez 24 godziny.
Aby uzyskać zimną stymulację w temperaturze czterech stopni Celsjusza, umieść szczura w wiadrze z zimną wodą i monitoruj jego aktywność przez pięć minut. Następnie osusz szczura dmuchawą i włóż go z powrotem do pierwotnej klatki. Aby poradzić sobie ze stresem cieplnym o temperaturze 45 stopni Celsjusza, umieść szczura w piekarniku i monitoruj przez pięć minut.
Aby odwrócić cykl światło-ciemność, zawiń klatkę w czarną szmatkę na godzinę, aby stymulować ciemność w ciągu dnia. Następnie oświetl klatkę przez 12 godzin w nocy, aby naśladować światło dzienne i rejestruj dane przez 24 godziny. W eksperymencie z mokrą wyściółką wlej 200 mililitrów wody do klatki zawierającej 100 gramów wyściółki.
Umieść szczura w mokrej klatce i monitoruj przez 24 godziny. Po wysuszeniu szczura, jak pokazano wcześniej, umieść go z powrotem w klatce zawierającej świeże wióry drzewne. W metodzie nachylenia klatki umieść szczura w klatce ustawionej pod kątem 45 stopni przy ścianie i monitoruj ją przez 24 godziny.
W przypadku wytrząsania z dużą prędkością umieść szczura w wytrząsarkach mechanicznych ustawionych na 160 obr./min i rejestruj dane przez 15 minut. Po zastosowaniu stresorów przenieś klatkę grupy mod z pomieszczenia CUMS do pomieszczenia z obudową. Po podzieleniu szczurów na grupę kontrolną lub CON i modelową lub MOD, umieść je w indywidualnych klatkach.
W przypadku testu w otwartym polu podziel czarną skrzynkę na 25 kwadratowych odcinków o równej powierzchni. Zainstaluj system analizy śledzenia wideo w pudełku. Umieść szczura na centralnym placu i monitoruj jego aktywność poziomą i pionową przez pięć minut.
Po teście zdezynfekuj pudełko 75% alkoholem, aby usunąć wszelkie pozostałe zapachy szczurów. Aby ocenić anhedonię za pomocą testu preferencji sacharozy, zważ butelkę A zawierającą wodę i butelkę B zawierającą 1% sacharozy. Umieść obie butelki na pokrywie klatki i pozwól szczurowi na dostęp ad libitum do obu roztworów.
Po spożyciu zważ butelki i korzystając z podanego wzoru, oblicz 60-minutowe stawki preferencji sacharozy w danych dniach. Aby wykonać test labiryntu wodnego Morrisa, podziel basen na cztery ćwiartki i ponumeruj je od jednego do czterech. W trzeciej ćwiartce umieść platformę spoczynkową jeden centymetr poniżej powierzchni wody.
Dodaj mleko do basenu, aby zwiększyć nieprzezroczystość wody i utrzymuj temperaturę wody około 23 stopni Celsjusza przez cały czas trwania eksperymentu. Umieść szczura w jednej ćwiartce labiryntu i korzystając z systemu śledzenia wideo labiryntu wodnego Morris, zarejestruj czas opóźnienia, aby zidentyfikować platformę przez 120 sekund. Na koniec usuń ukrytą platformę z basenu.
Następnie umieść szczura w wodzie i rejestruj liczbę przekroczeń strefy przez 120 sekund. W teście otwartym grupa MOD wykazywała niższe wyniki pionowe i poziome w porównaniu z grupą CON, co wskazuje na skuteczną indukcję lęku. Po 28 dniach grupa MOD wykazała niższy procent preferencji sacharozy niż grupa CON.
Test labiryntu wodnego Morrisa ujawnił, że grupa MOD miała dłuższe opóźnienie w zlokalizowaniu platformy i przekroczyła ją mniej razy w porównaniu z grupą CON. Co więcej, grupa MOD wykazywała obniżony poziom 5HT w hipokampie w porównaniu z grupą CON.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejszy protokół opisuje model depresji oparty na przewlekłym nieprzewidywalnym łagodnym stresie (CUMS), opracowany w oparciu o mongolską teorię medyczną, wraz z metodami walidacji testów behawioralnych. Jego celem jest analiza czynników przyczyniających się do depresji z unikalnej perspektywy tradycyjnej medycyny mongolskiej.
Solidne modele przedkliniczne, odtwarzające fenotypy depresyjne, są niezbędne dla neuronauki translacyjnej oraz procesu odkrywania leków psychiatrycznych. Protokół chronicznego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) u szczurów, zgodny z mongolską teorią medyczną, umożliwia systematyczną analizę mechanizmów depresji i punktów końcowych w zakresie zachowania. Model ten zwiększa wiarygodność prognostyczną wczesnej walidacji celów terapeutycznych i dostarcza informacji niezbędnych do podejmowania decyzji dotyczących portfolio leków neuropsychiatrycznych.
Ten model szczurzy oparty na CUMS wpisuje się w kontinuum od wczesnego etapu odkrywania do walidacji przedklinicznej w procesie opracowywania leków neuropsychiatrycznych.