Waloryzacja wodorostów czerwonych Gracilaria gracilis za pomocą podejścia biorafineryjnego

Nasze badania koncentrują się na poszukiwaniu nowych związków bioaktywnych z wodorostów, które mogą być przydatne w różnych sektorach, takich jak przemysł spożywczy, kosmetyczny i farmaceutyczny. W społeczeństwie rośnie świadomość na temat potencjału organizmów morskich w dostarczaniu związków bioaktywnych. Związki te mogą być wykorzystywane do produkcji zrównoważonych i bezpieczniejszych kosmetyków funkcjonalnych w celu poprawy jakości produktów spożywczych i służyć jako źródło nowych struktur chemicznych do opracowywania nowych leków farmaceutycznych.

Jednym z wyzwań związanych z wykorzystaniem wodorostów do opracowywania nowych produktów spożywczych jest unikanie stosowania dużych ilości, które mogłyby prowadzić do nieprzyjemnych właściwości sensorycznych żywności. Stosowanie ekstraktów z wodorostów to sposób na obejście tego problemu. Dzięki temu protokołowi udało nam się opracować makaron, który ma wartość odżywczą dzięki włączeniu wszystkich alg.

Zazwyczaj uzależnienie od tego składnika zapewnia mniej powszechne właściwości sensoryczne. Jednak dzięki opracowanej formule nadal osiągnięto akceptację konsumentów. Na początek uprawiaj gracilaria gracilis w 250 mililitrach kolb z płaskim dnem w klimatycznym pomieszczeniu.

Po przeskalowaniu, wysuszeniu i zmieleniu biomasy należy zważyć powstałą wysuszoną biomasę. Rozpuść go w 100 mililitrach rozpuszczalnika i wymieszaj, mieszając w naczyniu chronionym przed światłem przez 30 minut. Ekstrakcje etanolem i wodą należy wykonywać oddzielnie w temperaturze pokojowej.

Przefiltruj płynne ekstrakty przez bibułę filtracyjną, aby oddzielić je od pozostałej biomasy. Odwirować ekstrakty w temperaturze 8 000 G przez 10 minut w temperaturze pokojowej. Liofilizować ekstrakty wodne i używać wyparki obrotowej w temperaturze 40 stopni Celsjusza do odparowania ekstraktów etanolowych.

Na początek weź ekstrakty wodne i etanolowe uzyskane z suszonego gracilaria gracilis. Na 96-dołkowej mikropłytce dozować dwa mikrolitry każdej próbki i 198 mikrolitrów DPPH rozpuszczonych w absolutnym etanolu. Następnie za pomocą spektrofotometru z mikropłytkami zmierz absorbancję przy 517 nanometrach.

Weźmy ludzkie keratynocyty hodowane w 96-dołkowych płytkach przez noc. Dodaj dwa mikrolitry rozpuszczonych ekstraktów DMSO do 198 mikrolitrów pożywki w dołkach na mikropłytki. Usuń pożywkę hodowlaną.

Dodaj 100 mikrolitrów MTT do komórek i inkubuj w ciemności przez 30 minut. Aby rozpuścić wewnątrzkomórkowe kryształy formazanu, dodaj 100 mikrolitrów DMSO. Za pomocą czytnika mikropłytek zmierz absorbancję przy 570 nanometrach.

Test DPPH wykazał, że temperatura 40 stopni Celsjusza wykazała wyższe wartości inhibicji aktywności utleniającej w porównaniu z ekstraktami otrzymanymi w temperaturze pokojowej lub 70 stopni Celsjusza. Nie zaobserwowano działania cytotoksycznego na ludzkie keratynocyty, co sugeruje, że przy maksymalnym stężeniu kwasu zarówno ekstrakty wodne, jak i etanolowe są bezpieczne do stosowania na skórę. Na początek połącz w sprzęcie predefiniowane porcje mąki ryżowej, gracilaria gracilis, i chlorelli vulgaris i dodaj do mieszanki około 30% wody.

Po kilku minutach mieszania, a następnie wyciskaniu makaronu za pomocą sprzętu, pokrój go ręcznie. Aby wyprodukować szyfferię, susz makaron w temperaturze 68 stopni Celsjusza przez 42 minuty, a następnie dodatkowe pięć godzin i 30 minut w temperaturze 76 stopni Celsjusza, symulując proces przemysłowy. Na koniec należy zapakować próżniowo próbki i przechowywać je w ciemnym miejscu w temperaturze pokojowej.

Pobrać jedną próbkę gramową do szklanego tygla z dnem filtracyjnym i umieścić ją w analizatorze włókien. Dodać 150 mililitrów podgrzanego 1,25% kwasu siarkowego i dwa mililitry środka przeciwpieniącego do kolumny każdego tygla. Usunąć rozpuszczalnik i trzykrotnie przepłukać tygiel wodą dejonizowaną, aby przygotować próbkę do hydrolizy zasadowej.

Po trzykrotnym umyciu tygli 150 mililitrami acetonu, ostrożnie przenieś je do piekarnika nastawionego na 150 stopni Celsjusza na godzinę. Zapisz ostateczną wagę. Przenieś tygle do pieca muflowego ustawionego na 500 stopni Celsjusza na trzy godziny, a następnie zapisz ostateczną wagę.

Aby określić profil kwasów tłuszczowych, dodaj dwa mililitry 2% roztworu kwasu siarkowego w metanolu do 50 miligramowej próbki. Podgrzej mieszaninę w temperaturze 80 stopni Celsjusza przez dwie godziny. Następnie schłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej i dodać jeden mililitr ultraczystej wody i dwa mililitry N heptanu do każdej próbki.

Po wirowaniu mieszaniny przez jedną minutę odwiruj ją przez pięć minut. Później odzyskaj górną fazę N heptanu zawierającą estry metylowe kwasów tłuszczowych i przenieś ją do fiolek do chromatografii gazowej. Analizuj próbki w chromatografie szklanym wyposażonym w kolumnę kapilarną TRFAME, automatyczny próbnik i detektor płomieniowo-jonizacyjny

Określ profil kwasów tłuszczowych, porównując wynikowe czasy retencji z wzorcem. Inkubować tygle porcelanowe przez trzy godziny w temperaturze 105 stopni Celsjusza. Pozwól im ostygnąć w osuszaczu, a następnie zapisz ich wagę.

Po inkubacji 10 gramów próbki, jak wykazano powyżej, należy obliczyć jej wilgotność, korzystając z przedstawionego równania. Następnie przenieść tygle z wysuszonymi próbkami do spalarni podgrzanej do 525 stopni Celsjusza przez cztery godziny. Po schłodzeniu próbek należy zanotować ich masę.

Aby ocenić akceptację konsumentów, użyj próbek makaronu chifferi gotowanych w wodzie destylowanej przez osiem minut. Przeprowadzaj badania sensoryczne w indywidualnych kabinach sensorycznych zlokalizowanych w laboratorium analizy sensorycznej. Oceń wygląd wizualny; kolor, tekstura, zapach, smak morski, ogólny smak, ogólna ocena i zamiar zakupu próbek.

Makaron otrzymał oceny pięć i sześć w hedonicznej skali od jednego do dziewięciu odpowiednio za smak morski i wygląd wizualny. Makaron miał pięć punktów zamiaru zakupu i sześć ogólnych punktów uznania. Na początek dodaj 50 mililitrów buforu fosforanu sodu do jednego grama gracilaria gracilis.

Po homogenizacji mieszaniny należy macerować próbkę za pomocą moździerza i tłuczka przez 10 minut. Przenieść roztwór do probówki i odwirować go przez 20 minut w temperaturze 12 298G. Po połączeniu supernatantu powoli dodawać 65% siarczanu amonu.

Następnie osad osad osad należy odwirować i rozpuścić w wodzie destylowanej. Przeprowadzić dializę ekstraktu za pomocą membrany rurkowej przeciwko wodzie przez 24 godziny, a następnie liofilizować. Aby dodać ekstrakt, wymieszaj go z jogurtem o stężeniu 0,21%Przechowuj próbki w pojedynczych szklanych kolbach w temperaturze czterech stopni Celsjusza do czasu analizy.

Aby sprawdzić stabilność koloru ekstraktu w jogurcie, skalibruj kolorymetr za pomocą białej płytki ceramicznej. Wypełnij komórkę około 28 gramami próbki i przeanalizuj jej kolor. Stabilność koloru jogurtów z pigmentem oceniano przez 12 dni w temperaturze minus czterech stopni Celsjusza.

Włączenie ekstraktów do jogurtów wykazało dobrą trwałość koloru, z różnicą koloru 7,01, plus minus 2,36 po 12 dniach przechowywania.