Name: Działanie przeciwnadciśnieniowe i mechanizmy wywaru z tongluo Huotan Jiedu u szczurów z nadciśnieniem typu H (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Poznaj mechanizm działania wywaru HTJDTLD w nadciśnieniu typu H u szczurów. Badanie wykazuje, że ziołowa formuła chińska skutecznie obniża ciśnienie poprzez hamowanie apoptozy indukowanej stresem ER.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Jilin (nie. YDZJ202301ZYTS189).

Antihypertensive Effects of Huotan Jiedu Tongluo in H-Type Hypertensive Rats

<ol><li>Noone, C., Dwyer, C. P., Murphy, J., Newell, J., Molloy, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+effectiveness+of+physical+activity+interventions+and+antihypertensive+pharmacological+interventions+in+reducing+blood+pressure+in+people+with+hypertension%3A+Protocol+for+a+systematic+review+and+network+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Syst+Rev%22%5BJournal%5D)">Comparative effectiveness of physical activity interventions and antihypertensive pharmacological interventions in reducing blood pressure in people with hypertension: Protocol for a systematic review and network meta-analysis.</a> Syst Rev. 7 (1), 128(2018).</li>
<li>Huang, K., Zhang, Z., Huang, S., Jia, Y., Zhang, M., Yun, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+association+between+retinal+vessel+abnormalities+and+h-type+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurol%22%5BJournal%5D)">The association between retinal vessel abnormalities and h-type hypertension.</a> BMC Neurol. 21 (1), 6(2021).</li>
<li>Tan, Y., Nie, F., Wu, G., Guo, F., Wang, Y., Wang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+h-type+hypertension+on+intraplaque+neovascularization+assessed+by+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22J+Atheroscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Impact of h-type hypertension on intraplaque neovascularization assessed by contrast-enhanced ultrasound.</a> J Atheroscler Thromb. 29 (4), 492-501 (2022).</li>
<li>Towfighi, A., Markovic, D., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronounced+association+of+elevated+serum+homocysteine+with+stroke+in+subgroups+of+individuals%3A+A+nationwide+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pronounced association of elevated serum homocysteine with stroke in subgroups of individuals: A nationwide study.</a> J Neurol Sci. 298 (1-2), 153-157 (2010).</li>
<li>Zhong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+homocysteine+and+blood+pressure+related+to+poor+outcome+of+acute+ischemia+stroke+in+Chinese+population%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">High homocysteine and blood pressure related to poor outcome of acute ischemia stroke in Chinese population.</a> Plos One. 9 (9), e107498(2014).</li>
<li>Hao, P., Jiang, F., Cheng, J., Ma, L., Zhang, Y., Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traditional+Chinese+medicine+for+cardiovascular+disease%3A+Evidence+and+potential+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Traditional Chinese medicine for cardiovascular disease: Evidence and potential mechanisms.</a> J Am Coll Cardiol. 69 (24), 2952-2966 (2017).</li>
<li>Tian, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Huotan+Jiedu+Tongluo+decoction+inhibits+balloon-injury-induced+carotid+artery+intimal+hyperplasia+in+the+rat+through+the+perk-eif2%CE%B1-atf4+pathway+and+autophagy+mediation%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Huotan Jiedu Tongluo decoction inhibits balloon-injury-induced carotid artery intimal hyperplasia in the rat through the perk-eif2α-atf4 pathway and autophagy mediation.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536237(2021).</li>
<li>Simko, F., Pechanova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+roles+of+melatonin+and+chronotherapy+among+the+new+trends+in+hypertension+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pineal+Res%22%5BJournal%5D)">Potential roles of melatonin and chronotherapy among the new trends in hypertension treatment.</a> J Pineal Res. 47 (2), 127-133 (2009).</li>
<li>Li, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((H-type+hypertension+is+a+risk+factor+for+cerebral+small-vessel+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">H-type hypertension is a risk factor for cerebral small-vessel disease.</a> BioMed Res Int. 2020, 6498903(2020).</li>
<li>Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+and+essential+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Homocysteine and essential hypertension.</a> J Clin Pharmacol. 43 (12), 1299-1306 (2003).</li>
<li>Lehmann, M., Gottfries, C. G., Regland, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+cognitive+impairment+in+the+elderly%3A+Homocysteine+is+an+early+marker%5BTitle%5D)+AND+%22Dement+Geriatr+Cogn%22%5BJournal%5D)">Identification of cognitive impairment in the elderly: Homocysteine is an early marker.</a> Dement Geriatr Cogn. 10 (1), 12-20 (1999).</li>
<li>dos Santos, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+that+folic+acid+deficiency+is+a+major+determinant+of+hyperhomocysteinemia+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Metab+Brain+Dis%22%5BJournal%5D)">Evidence that folic acid deficiency is a major determinant of hyperhomocysteinemia in Parkinson's disease.</a> Metab Brain Dis. 24 (2), 257-269 (2009).</li>
<li>Zhao, W., Gao, F., Lv, L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+of+hypertension+and+homocysteine+increases+the+risk+of+mortality+among+middle-aged+and+older+population+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">The interaction of hypertension and homocysteine increases the risk of mortality among middle-aged and older population in the United States.</a> J Hypertens. 40 (2), 254-263 (2022).</li>
<li>Woo, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocyst%28e%29inemia+is+a+risk+factor+for+arterial+endothelial+dysfunction+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocyst(e)inemia is a risk factor for arterial endothelial dysfunction in humans.</a> Circulation. 96 (8), 2542-2544 (1997).</li>
<li>Lu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intervention+of+enalapril+maleate+and+folic+acid+tablet+on+the+expressions+of+the+grp78+and+chop+and+vascular+remodeling+in+the+vascular+smooth+muscle+cells+of+h-hypertensive+rats+with+homocysteine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Rev+Med+Pharmaco%22%5BJournal%5D)">The intervention of enalapril maleate and folic acid tablet on the expressions of the grp78 and chop and vascular remodeling in the vascular smooth muscle cells of h-hypertensive rats with homocysteine.</a> Eur Rev Med Pharmaco. 22 (7), 2160-2168 (2018).</li>
<li>López-García, P., Moreira, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+forces+for+the+origin+of+the+eukaryotic+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22BioEssays%22%5BJournal%5D)">Selective forces for the origin of the eukaryotic nucleus.</a> BioEssays. 28 (5), 525-533 (2006).</li>
<li>Minamino, T., Komuro, I., Kitakaze, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+as+a+therapeutic+target+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress as a therapeutic target in cardiovascular disease.</a> Circ Res. 107 (9), 1071-1082 (2010).</li>
<li>Chen, X., Cubillos-Ruiz, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+signals+in+the+tumour+and+its+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress signals in the tumour and its microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 21 (2), 71-88 (2021).</li>
<li>Ji, C., Kaplowitz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocysteinemia%2C+endoplasmic+reticulum+stress%2C+and+alcoholic+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroentero%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury.</a> World J Gastroentero. 10 (12), 1699-1708 (2004).</li>
<li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+induces+programmed+cell+death+in+human+vascular+endothelial+cells+through+activation+of+the+unfolded+protein+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response.</a> J Biol Chem. 276 (38), 35867-35874 (2001).</li>
<li>Cunard, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress%2C+a+driver+or+an+innocent+bystander+in+endothelial+dysfunction+associated+with+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cur+Hypertens+Rep%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress, a driver or an innocent bystander in endothelial dysfunction associated with hypertension.</a> Cur Hypertens Rep. 19 (8), 64(2017).</li>
<li>Casas, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GRP78+at+the+centre+of+the+stage+in+cancer+and+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">GRP78 at the centre of the stage in cancer and neuroprotection.</a> Front Neurosci. 11, 177(2017).</li>
<li>Urano, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+of+stress+in+the+ER+to+activation+of+JNK+protein+kinases+by+transmembrane+protein+kinase+ire1%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Coupling of stress in the ER to activation of JNK protein kinases by transmembrane protein kinase ire1.</a> Science. 287 (5453), 664-666 (2000).</li>
<li>Borghi, A., Verstrepen, L., Beyaert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRAF2+multitasking+in+tnf+receptor-induced+signaling+to+nf-%CE%BAb%2C+map+kinases+and+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">TRAF2 multitasking in tnf receptor-induced signaling to nf-κb, map kinases and cell death.</a> Biochem Pharmacol. 116, 1-10 (2016).</li>
<li>Wen, X. -R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butylphthalide+suppresses+neuronal+cells+apoptosis+and+inhibits+JNK-caspase3+signaling+pathway+after+brain+ischemia+%2Freperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Butylphthalide suppresses neuronal cells apoptosis and inhibits JNK-caspase3 signaling pathway after brain ischemia /reperfusion in rats.</a> Cell Mol Neurobiol. 36 (7), 1087-1095 (2016).</li>
<li>Jin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-threonine+protein+kinase+activation+may+be+an+effective+target+for+reducing+neuronal+apoptosis+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Serine-threonine protein kinase activation may be an effective target for reducing neuronal apoptosis after spinal cord injury.</a> Neural Regen Res. 10 (11), 1830-1835 (2015).</li>
<li>Xu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen+and+propofol+combination+therapy+inhibits+endoplasmic+reticulum+stress+and+remarkably+attenuates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+and+ogd+injury+in+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Estrogen and propofol combination therapy inhibits endoplasmic reticulum stress and remarkably attenuates cerebral ischemia-reperfusion injury and ogd injury in hippocampus.</a> Biomed Pharmacother. 108, 1596-1606 (2018).</li>
</ol>

Oświadczamy, że badanie zostało przeprowadzone przy braku jakichkolwiek powiązań handlowych lub finansowych, które mogłyby być interpretowane jako potencjalny konflikt interesów.

Nadciśnienie tętnicze jest jednym z najczęstszych zaburzeń sercowo-naczyniowych, które dotyka jedną trzecią dorosłej populacji i zwiększa ryzyko udaru mózgu, choroby niedokrwiennej serca oraz niewydolności serca i nerek8. Nadciśnienie typu H jest szczególnym rodzajem nadciśnienia tętniczego, które odnosi się do współwystępowania nadciśnienia pierwotnego i podwyższonego poziomu homocysteiny i od lat przyciąga szeroką uwagę9. W ostatnich latach stosowanie doustnego EM w połączeniu z lekami przeciwnadciśnieniowymi wykazało lepszą skuteczność w zakresie kontrolowania ciśnienia krwi i obniżania poziomu Hcy we krwi, ale nadal istnieje wiele przeciwwskazań, skutków ubocznych, oporności na leki i innych niedociągnięć, takich jak ból głowy, zawroty głowy, zmęczenie, kaszel i niedociśnienie. Tradycyjna medycyna chińska oferuje korzyści w leczeniu nadciśnienia typu H dzięki spersonalizowanemu podejściu, zajęciu się przyczynami leżącymi u podstaw i zapewnieniu uzupełniających efektów przy mniejszej liczbie skutków ubocznych, umożliwiając skuteczne długoterminowe leczenie choroby. W tym badaniu odkryliśmy, że formuła tradycyjnej medycyny chińskiej HTJDTLD miała oczywiście działanie przeciwnadciśnieniowe na nadciśnienie typu H wywołane metioniną. Co ważniejsze, HTJDTLD znacząco zwiększył skuteczność przeciwnadciśnieniową EM, która jest pierwszym zatwierdzonym lekiem na nadciśnienie związane z podwyższonym Hcy. Jednak podawanie EM czasami wywołuje pewne działania niepożądane. 
Poziom Hcy, aminokwasu zawierającego siarkę powstającego podczas metabolizmu metioniny, jest podwyższony w chorobach sercowo-naczyniowych i neurodegeneracyjnych, w tym nadciśnieniu tętniczym10, chorobie Alzheimera, demencji11 i chorobie Parkinsona12. Wcześniejsze badanie wykazało również, że interakcja między nadciśnieniem a homocysteiną wpływa na ryzyko śmiertelności wśród osób w średnim i starszym wieku. Woo i wsp.14 stwierdzili, że podwyższony poziom Hcy powoduje dysfunkcję śródbłonka i jest związany ze sztywnością tętnic, która jest wynikiem niszczenia włókien elastyny i zwiększania produkcji kolagenu. W tym badaniu stwierdziliśmy, że poziom Hcy w osoczu był znacznie zwiększony w grupie leczonej metioniną, co było również połączone z podwyższonym ciśnieniem krwi i znaczącymi zmianami patologicznymi w tętnicach. Jednak leczenie HTJDTLD znacznie obniżyło ciśnienie krwi, złagodziło patologiczne uszkodzenia tętnic i obniżyło poziom Hcy. EM, nowy preparat złożony zawierający zarówno enalapryl, jak i kwas foliowy, służył jako pierwsza zatwierdzona metoda leczenia nadciśnienia tętniczego związanego z podwyższonym poziomem Hcy15. Warto zauważyć, że HTJDTLD nasilał działanie hipotensyjne, na co wskazuje spadek poziomu Hcy i złagodzenie zmian patologicznych.
Retikulum endoplazmatyczne (ER) jest centralną organellą służącą do syntezy, fałdowania i modyfikacji wydzielanych i transbłonowych białek16. Zaburzenia normalnej funkcji ER mogą prowadzić do stresu ER, który jest związany z wieloma chorobami, a ostatnio z nadciśnieniem17,18. Co więcej, wcześniejsze doniesienia wskazywały, że Hcy może aktywować stres ER poprzez zakłócanie tworzenia wiązań dwusiarczkowych i zmniejszanie żywotności śródbłonka i wazorelaksacji19. Stres ER wywołany przez Hcy może również powodować apoptozę śródbłonka20,21. Jednak to, czy HTJDTLD wywiera działanie przeciwnadciśnieniowe poprzez regulację stresu ER, nie zostało zbadane. W związku z tym zbadaliśmy przeciwnadciśnieniowe działanie HTJDTLD za pośrednictwem szlaku apoptozy wywołanego stresem ER. GPR78, znany również jako Bip, jest głównym opiekunem i jest aktywowany po stresie ER22. Udowodniono również, że czynnik 2 związany z receptorem czynnika martwicy nowotworów (TRAF2) jest związany z odpowiedziami komórkowymi na sygnały wewnętrzne, takie jak stres ER23. TRAF2 inicjuje kaskady transdukcji sygnału, prowadzące do aktywacji kinazy N-końcowej c-Jun (JNK) w sposób zależny od komórki i kontekstu24. Kaspaza-3, kluczowy wykonawca apoptozy, odgrywa kluczową rolę w procesie apoptozy i może być aktywowana przez różne szlaki w różnych typach komórek ssaków25. Kaspaza-3, kluczowy wykonawca apoptozy, odgrywa kluczową rolę w procesie apoptozy i może być aktywowana przez różne szlaki w różnych typach komórek ssaków26. Kaspaza-3 bierze udział w apoptozie za pośrednictwem stresu ER i służy jako ostateczny wspólny członek różnych kaskad apoptotycznych27. W tym badaniu wykryliśmy ekspresję genów i białek GPR78, TRAF2, JNK i kaspazy 3 za pomocą qRT-PCR i western blot. Wyniki wykazały, że leczenie metioniną znacznie zwiększyło ekspresję genów i białek GPR78, TRAF2, JNK i kaspazy 3, a HTJDTLD znacząco hamowało ekspresję tych genów i białek. Jednak nadal istnieją pewne ograniczenia dotyczące korzystania tylko z tych dwóch metod. Idealnym rozwiązaniem może być ocena mechanizmu działania HTJDTLD poprzez zastosowanie inhibitora szlaku sygnałowego związanego z ERS i wykrycie apoptozy komórek za pomocą cytometrii przepływowej. Będziemy nadal ulepszać nasz protokół eksperymentalny w przyszłych badaniach.
Nasze wyniki wskazały, że HTJDTLD ma działanie przeciwnadciśnieniowe u szczurów z nadciśnieniem typu H wywołanym metioniną. Podstawowy mechanizm może polegać na hamowaniu apoptozy wywołanej aktywacją stresu ER. Biorąc pod uwagę jego działanie przeciwnadciśnieniowe i potencjalny mechanizm u szczurów z nadciśnieniem indukowanym metioniną, HTJDTLD jest bardzo obiecujący dla przyszłych zastosowań terapeutycznych w leczeniu nadciśnienia tętniczego.

Nadciśnienie, główny czynnik ryzyka zawału serca, udaru mózgu i niewydolności nerek, stało się poważnym wyzwaniem dla zdrowia publicznego, które dotyka 1 miliard ludzi na całym świecie1. Homocysteina (Hcy), aminokwas zawierający grupę tiolową, jest ważnym metabolicznym pośrednikiem metabolizmu metioniny. Nadciśnienie tętnicze z podwyższonym poziomem Hcy w osoczu definiuje się jako nadciśnienie typu H, które może być istotnym czynnikiem ryzyka wystąpienia i nawrotu chorób układu krążenia i naczyń krwionośnych, takich jak udar mózgu2,3. Ostatnie badania wykazały, że jednoczesne przebywanie nadciśnienia typu H może nasilać skutki uboczne chorób sercowo-naczyniowych i naczyniowo-mózgowych4. Warto zauważyć, że 75% pacjentów w Chinach z nadciśnieniem typu H ma nadciśnienie pierwotne, co poważnie wpływa na jakość życia5. Obecnie leczenie nadciśnienia tętniczego typu H obejmuje głównie medycynę zachodnią. Może jednak powodować pewne działania niepożądane i słabe przestrzeganie zaleceń lekarskich oraz nie może już zaspokoić potrzeb w zakresie kompleksowego leczenia nadciśnienia tętniczego typu H.
Tradycyjna medycyna chińska (TCM) to unikalne źródło z historią sięgającą ponad 2 000 lat w Chinach. Ze względu na niezaspokojoną potrzebę kontroli nadciśnienia tętniczego w medycynie zachodniej, klinicyści zaczęli rozważać potencjalną rolę TCM w zapobieganiu i leczeniu nadciśnienia typu H6. Huotan Jiedu Tongluo Decoction (HTJDTLD) to formuła tradycyjnej medycyny chińskiej opracowana przez profesora Yue Denga, czerpiąca z jego rozległej wiedzy klinicznej7. W ciągu ponad 20 lat stosowania klinicznego HTJDTLD wykazał niezwykłą skuteczność w leczeniu chorób sercowo-naczyniowych i naczyniowo-mózgowych1. Nie podano jednak, czy HTJDTLD ma działanie terapeutyczne w nadciśnieniu tętniczym typu H. Dlatego naszym celem było zbadanie działania przeciwnadciśnieniowego i specyficznych mechanizmów HTJDTLD u szczurów z nadciśnieniem typu H oraz zidentyfikowanie potencjalnych leków terapeutycznych w leczeniu nadciśnienia typu H.

<table><tbody><tr><td>1. nić syntezy cDNA SuperMix do qPCR</td><td>Yeasen, Chiny</td> Zestaw do syntezy cDNA <td>11149ES</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-beta-aktynowe</td><td>Bioss, Chiny</td><td>bs-0061R</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-kaspazowe-3</td><td>Bioss, Chiny</td><td>bs-0081R</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-GPR78</td><td>Abcam, USA</td><td>ab108513</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-JNK</td><td>Abcam, USA</td><td>ab76572</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-p-JNK</td><td>Bioss, Chiny</td><td>bsm-52462R</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-królicze IgG</td><td>Bioss, Chiny</td><td>bs-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-TRAF2</td><td>Bioss, Chiny</td><td>bs-22372R</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad CFX96 System dotykowy&nbsp;</td><td>System detekcji PCR w czasie rzeczywistym</td> <td>Bio-Rad</td><td>CFX96</td>&nbsp;</tr><tr><td>Podłoża ECL Western Blot</td><td>Merck, MA, Stany Zjednoczone</td><td>WBULP-10ML</td><td></td></tr><tr><td>Tabletki kwasu foliowego maleinianu enalaprylu</td><td>Firma farmaceutyczna Yangzijiang, Chiny</td><td>20040991</td><td></td></tr><tr><td>FastStart SYBR Green Master</td><td></td><td>Sigma FSSGMMRO</td><td></td></tr><tr><td>Fructus Trichosanthis</td><td>Pierwszy szpital stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Hirudo</td><td>Pierwszy Szpital Stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru</td><td></td>katalogowego</tr><tr><td>inteligentny nieinwazyjny ciśnieniomierz&nbsp;</td><td>Firma biotechnologiczna Beijing Softron</td><td>BP-2010A</td><td></td></tr><tr><td>Lonicerae Japonicae Flos</td><td>Pierwszy szpital stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Metionina</td><td>Sigma, USA</td><td>M9500</td><td></td></tr><tr><td>Radix Angelicae Sinensis</td><td>Pierwszy szpital stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Glycyrrhizae</td><td>Pierwszy szpital stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Nardostachyos</td><td>Pierwszy szpital stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae</td><td>Pierwszy Szpital Stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru</td><td></td>katalogowego</tr><tr><td>Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae</td><td>Pierwszy Szpital Stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun w Chinach</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Radix Scrophulariae</td><td>Pierwszy Szpital Stowarzyszony Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Changchun, Chiny</td><td>Brak numeru katalogowego</td><td></td></tr><tr><td>Zestawy Rat Hcy ELISA</td><td>Shanghai Meimian Industrial Company, Chiny</td><td>MM-0293R2</td><td></td></tr><tr><td>Bufor RIPA</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology company</td><td>P0013B</td><td></td></tr></tbody></table>

działanie przeciwnadciśnieniowe i mechanizmy wywaru z tongluo huotan jiedu u szczurów z nadciśnieniem typu h

The Antihypertensive Effects and Mechanisms of Huotan Jiedu Tongluo Decoction in Rats with H-Type Hypertension

Nadciśnienie typu H, które jest specyficzną formą nadciśnienia charakteryzującą się podwyższonym poziomem homocysteiny (Hcy) w osoczu, stało się głównym wyzwaniem dla zdrowia publicznego na całym świecie. W badaniu tym zbadano hipotensyjne działanie i mechanizmy leżące u podstaw wywaru Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), wysoce skutecznej formuły tradycyjnej medycyny chińskiej powszechnie stosowanej w leczeniu zwężenia naczyń krwionośnych. Metioninę stosowano w celu wywołania nadciśnienia typu H u szczurów, a HTJDTLD podawano dożołądkowo. Następnie skurczowe i rozkurczowe ciśnienie krwi w tętnicy ogonowej szczurów mierzono za pomocą nieinwazyjnej manometrii ogonowej szczura. Ocenę histologiczną aorty przeprowadzono za pomocą barwienia hematoksyliną i eozyną (HE). Do pomiaru poziomów Hcy zastosowano test immunoenzymatyczny (ELISA), a ilościową reakcję łańcuchową polimerazy odwrotnej transkryptazy (qRT-PCR) i western blot wykorzystano do określenia poziomów mRNA i białka regulatorowego glukozy 78 (GRP78), czynnika związanego z receptorem czynnika 2 związanego z czynnikiem martwicy nowotworu (TNF) (TRAF2), kinaz N-końcowych c-Jun (JNK) i kaspazy-3. Wyniki wykazały, że HTJDTLD istotnie obniżył ciśnienie krwi, złagodził zmiany histopatologiczne i obniżył poziom Hcy po leczeniu metioniną. Co więcej, HTJDTLD znacząco hamował ekspresję genów i białek GRP78, JNK, TRAF2 i kaspazy 3, które są zaangażowane głównie w szlak apoptozy wywołanej stresem retikulum endoplazmatycznego (ER). Ogólnie rzecz biorąc, wyniki wskazały, że HTJDTLD ma skuteczne działanie przeciwnadciśnieniowe u szczurów z nadciśnieniem typu H i ujawniło mechanizmy przeciwnadciśnieniowe związane z hamowaniem aktywacji szlaku apoptozy wywołanej stresem ER.

Jak pokazano w Tabeli 4 i Tabeli 5, skurczowe ciśnienie tętnicze (SBP) oraz rozkurczowe ciśnienie tętnicze (DBP) były znacznie wyższe w grupie MET niż w grupie CON od 1. do 4. tygodnia. Po leczeniu HTJDTLD wartości SBP i DBP u szczurów były znacznie niższe niż w grupie MET. Warto zauważyć, że połączone zastosowanie HTJDTLD i EM wykazalo silniejszy efekt hipotensyjny niż samo leczenie HTJDTLD.
Zgodnie z barwieniem HE i barwieniem trichromem Massona, śródbłonek ściany naczynia aorty był niekompletny i niegładki, a błona środkowa była znacznie pogrubiona. W grupie MET, w porównaniu z grupą CON, stwierdzono proliferację i hipertrofię komórek mięśni gładkich, zwiększenie liczby warstw ich układu oraz nieuporządkowanie włókien. Jednakże w grupach MET + HTJDTLD + EM, MET + EM i MET + HTJDTLD śródbłonek naczyniowy regenerował się w stopniu bardziej kompletnym i gładkim, pogrubienie błony środkowej było znacznie mniejsze, a uszkodzenia wewnętrznej warstwy naczynia zostały istotnie złagodzone (Rysunek 1 i Rysunek 2). Ponadto stężenie Hcy w grupie metioninowej było 2-krotnie wyższe niż w grupie kontrolnej. Jednakże stężenia Hcy w grupach MET + HTJDTLD + EM, MET + EM i MET + HTJDTLD były znacznie niższe niż w grupie MET. Co istotne, najsilniejszą redukcję zaobserwowano w grupie MET + HTJDTLD + EM, gdzie poziom był około 1-krotnie niższy niż w grupie MET (Rysunek 3). Wyniki ekspresji mRNA i białek wykazały, że ekspresja GPR78, TRAF2, JNK, p-JNK i kaspazy-3 była wyraźnie zwiększona po zastosowaniu metioniny. Jednakże HTJDTLD, EM oraz kombinacja HTJDTLD i EM znacząco hamowały nadekspresję GPR78, TRAF2, JNK i kaspazy-3. Co istotne, najsilniejszy efekt wywołało połączone zastosowanie HTJDTLD i EM (Rysunek 4 i Rysunek 5).
<img alt="Rycina 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig01.jpg" /> 
Rycina 1: Barwienie HE. Histologiczne zmiany w tkankach aorty piersiowej w grupach (A) CON, (B) MET, (C) MET + HTJDTLD + EM, (D)&#160;MET + EM oraz (E) MET + HTJDTLD. Jądra są zabarwione na niebiesko, natomiast cytoplazma i macierz pozakomórkowa wykazują różny stopień różowego zabarwienia (100x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Rysunek 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig02.jpg" /> 
Rysunek 2: Barwienie Massona. (A) grupa CON, (B) grupa MET, (C)&#160;grupa MET + HTJDTLD + EM, (D) grupa MET + EM oraz (E) grupa MET + HTJDTLD. Wykonano barwienie Massona naczyń aorty w każdej grupie w celu oceny wpływu HTJDTLD na depozycję i włóknienie (100x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Rysunek 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig03v2.jpg" /> 
Rysunek 3: Poziom Hcy. Stężenie Hcy w surowicy dla każdej grupy określono metodą ELISA. Dane przedstawiono jako średnia ± SD (n = 6, SD wynoszą odpowiednio: CON: 236,5 nmol/L, MET: 185 nmol/L, MET + HTJDTLD + EM: 126,8 nmol/L, MET + EM: 124 nmol/L, MET + HTJDTLD: 325 nmol/L). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Rysunek 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig04.jpg" /> 
Rysunek 4: Ekspresja mRNA GRP78, TRAF2, JNK i kaspazy-3. Po zastosowaniu MET, MET + EM + HTJDTLD oraz MET + EM wykryto ekspresję genów związanych z ERS metodą qRT-PCR. Dane przedstawiono jako średnia ± SD (n = 6, SD następująco: GRP78 [CON: 0.12, MET: 0.13, MET + HTJDTLD + EM: 0.11, MET + EM: 0.17, MET + HTJDTLD: 0.12]; TRAF2 [CON: 0.09, MET: 0.09, MET + HTJDTLD + EM: 0.07, MET + EM: 0.11, MET + HTJDTLD: 0.13]; JNK [CON: 0.99, MET: 0.01, MET + HTJDTLD + EM: 0.03, MET + EM: 0.06, MET + HTJDTLD: 0.07]; kaspaza-8 [CON: 0.06, MET: 0.10, MET + HTJDTLD + EM: 0.01, MET + EM: 0.13, MET + HTJDTLD: 0.03). * oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą CON, # oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET, Δ oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET + HTJDTLD, a ∇ oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET + EM. p &#60; 0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig04large.jpg" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Rysunek 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig05.jpg" /> 
Rysunek 5: Ekspresja białek GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK i kaspazy-3. (A) Próbki białek przeanalizowano metodą western blotting z użyciem przeciwciał przeciwko GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK oraz kaspazie-3. Jako kontrolę zastosowano GAPDH. (B) Ilościowe oznaczenie poziomu białek GRP78, RAF2, JNK, p-JNK i kaspazy-3 wykonano metodą densytometrii i znormalizowano względem GAPDH. Dane przedstawiono jako średnia ± SD (n = 6). * oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą CON, p &#60; 0.01. # oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET, Δ oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET + HTJDTLD, a ∇ oznacza istotną różnicę w porównaniu z grupą MET + EM. p &#60; 0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig05large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Reakcja odwrotnej transkrypcji</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Komponent&#160;</td>
			<td>Objętość (ml)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Całkowity RNA</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mieszanina do trawienia gDNA</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperMix plus</td>
			<td>5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Woda wolna od RNaz&#160;</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Program reakcji był następujący: 25 &#176;C, 5 min; 55 &#176;C, 15 min; 85 &#176;C, 5 min.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RT-PCR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Komponent&#160;</td>
			<td>Objętość (mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Szablon</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>starter forward (10&#956;M)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>starter odwrotny (10&#956;M)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mieszanina do qPCR typu Green</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Woda wolna od nukleaz</td>
			<td>7.2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Program reakcji był następujący: wstępna denaturacja 95 &#176;C, 5 min; denaturacja 95 &#176;C, 10 s; przymieścanie/elongacja 60 &#176;C, 45 s, przez łącznie 40 cykli.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Objętości reakcji odwrotnej transkrypcji.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td >Nazwa startera</td>
			<td >Sekwencja (5’ do 3’)</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >GPR78-F</td>
			<td >CGTCGTATGTGGCCTTCACT</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >GPR78-R</td>
			<td >ATTCCAAGTGCGTCCGATGA</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >TRAF2-F</td>
			<td >GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >TRAF2-R</td>
			<td >GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >JNK-F</td>
			<td >GTCAGAATCCGAACGAGA</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >JNK-R</td>
			<td >GTCTACGCAGGCAATCG</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Caspase-3-F</td>
			<td >GCGGTATTGAGACAGACAGTGGAAC</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Caspase-3-R</td>
			<td >GCGGTAGAGTAAGCATACAGGAAGTC</td>
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 2: Lista starterów.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td >Żel rozdzielający 10%, system 5 mL:</td>
			<td ></td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Składnik</td>
			<td >Objętość (mL)</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >H2O</td >
			<td >1.9</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >30% akryloamidu</td >
			<td >1.7</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >1.5 mol/L Tris-HCL (pH 8.8)</td >
			<td >1.3</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >10% SDS</td >
			<td >0.05</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >10% persiarczanu amonu</td >
			<td >0.05</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >TEMED</td >
			<td >0.002</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Żel zagęszczający 5%, system 3 mL:</td>
			<td ></td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Składnik&#160;</td>
			<td >Objętość (mL)</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >H2O</td >
			<td >2.1</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >30% akryloamidu</td >
			<td >0.5</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >1.0 mol/L Tris-HCL (pH 6.8)</td >
			<td >0.38</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >10% SDS</td >
			<td >0.03</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >10% persiarczanu amonu</td >
			<td >0.03</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >TEMED</td >
			<td >0.003</td >
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 3: Skład żelu rozdzielającego i zagęszczającego.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td >Grupa</td>
			<td >1 tydzień</td>
			<td >2 tydzień</td>
			<td >3 tydzień&#160;</td>
			<td >4 tydzień</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >CON</td>
			<td >163.4 ± 6</td>
			<td >150.1 ± 7.0</td>
			<td >134.2 ± 9.9</td>
			<td >158.8 ± 10.2</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET</td>
			<td >192.1 ± 9.5##</td>
			<td >166.7 ± 12.8#</td>
			<td >177.3 ± 19.7##</td>
			<td >187 ± 23.6##</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td >165.4 ± 9.2##</td>
			<td >148.9 ± 11.1*</td>
			<td >134.5 ± 12.3**</td>
			<td >159.2 ± 19.6**</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+EM</td>
			<td >173 ± 9.1##</td>
			<td >149.9 ± 18.7*</td>
			<td >145 ± 12.5**</td>
			<td >162.4 ± 19.1**</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+HTJDTLD</td>
			<td >176.7 ± 8.4##</td>
			<td >154.9 ± 22.8</td>
			<td >168.3 ± 10.2</td>
			<td >172.2 ± 17.4</td>
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 4: Zmiany ciśnienia skurczowego.&#160;#p &#60; 0.05 i ##p &#60; 0.01 względem grupy kontrolnej, *p &#60;0.05 i **p &#60; 0.01 względem grupy MET.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td >Grupa</td>
			<td >1 tydzień</td>
			<td >2 tydzień</td>
			<td >3 tydzień&#160;</td>
			<td >4 tydzień</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >CON</td>
			<td >138.4 ± 13.8</td>
			<td >121.2 ± 12.5</td>
			<td >107 ± 19.7</td>
			<td >131.1 ± 16.3</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET</td>
			<td >147.9 ± 7.7#</td>
			<td >131 ± 11.9</td>
			<td >143.7 ± 19.6##</td>
			<td >146 ± 21.4##</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td >139.4 ± 10</td>
			<td >123.1 ± 18.5</td>
			<td >117.1 ± 9.6**</td>
			<td >129.2 ± 18.6**</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+EM</td>
			<td >140.9 ± 13.4</td>
			<td >119.6 ± 7.8</td>
			<td >123.6 ± 10.8**</td>
			<td >128 ± 25.2**</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >MET+HTJDTLD</td>
			<td >140.4 ± 11.3</td>
			<td >129.5 ± 11.1</td>
			<td >138.3 ± 15.1</td>
			<td >132.8 ± 16</td>
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 5: Zmiany ciśnienia rozkurczowego.#p &#60; 0,05 i ##p &#60; 0,01 w porównaniu z grupą kontrolną, **p &#60; 0,01 w porównaniu z grupą MET.

Tutaj prezentujemy protokół indukcji nadciśnienia typu H i oceniamy przeciwnadciśnieniowe działanie wywaru Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) podawanego dożołądkowo. U szczurów z nadciśnieniem typu H HTJDTLD miał skuteczne działanie przeciwnadciśnieniowe, prawdopodobnie związane z hamowaniem aktywacji szlaku apoptozy wywołanej stresem retikulum endoplazmatycznego (ER).

Działanie przeciwnadciśnieniowe i mechanizmy wywaru z tongluo Huotan Jiedu u szczurów z nadciśnieniem typu H

H-type hypertension, which is a specific form of hypertension characterized by elevated plasma homocysteine (Hcy) levels, has become a major public health ...

Nadciśnienie typu H stało się poważnym wyzwaniem dla zdrowia publicznego człowieka. Opiera się głównie na leczeniu medycyny zachodniej, które może mieć wspomniane efekty. Nasze badania badają działanie przeciwnadciśnieniowe i mechanizmy Huotan Jiedu Tongluo Decoction, formuły tradycyjnej medycyny chińskiej u szczurów z nadciśnieniem typu H.Nasze badanie wykazało, że Huotan Jiedu Tongluo Decoction ma działanie przeciwnadciśnieniowe u szczurów z nadciśnieniem typu H. Podstawowy mechanizm może obejmować hamowanie apoptozy wywołanej aktywacją stresu ER, co stanowi skuteczną opcję leczenia dla pacjentów. Będziemy badać potencjalne biomarkery do wczesnej diagnozy i rokowania, a w przyszłości opracujemy nowe strategie terapeutyczne dla nadciśnienia typu H.Na początek podziel 50 szczurów z nadciśnieniem tętniczym na pięć grup, w tym kontrolną. Podawaj szczurom w grupie pierwszej metioniny lub grupie met dietę składającą się z 3% metioniny przez 28 dni w celu wywołania nadciśnienia typu H. W przypadku szczurów z grupy od 2 do 4 należy podawać kombinację wywaru Huotan Jiedu Tongluo i maleinianu enalaprylu jako dodatek do diety metioninowej przez 28 dni.Następnie utwórz urządzenie krępujące, umieszczając cylindryczną siatkę ograniczającą w rurze termicznej i umieszczając rurkę termiczną w płóciennym pokrowcu. Po 28 dniach leczenia umieść szczura w siatce. Następnie umieść sygnałowy nieinwazyjnego ciśnieniomierza pod pokrywą.Umieść ogon szczura w szczelinie w pokrowcu i zabezpiecz go na podkładce stabilizującej. Przenieś szczura do cichego miejsca pomiaru, 20 do 30 minut przed pomiarem ciśnienia krwi. Teraz podłącz przyłącze węża powietrznego czujników ciśnieniowych, złącze sygnałowe i rurkę przytrzymującą.Umieść czujnik ciśnienia na końcu ogona szczura. Fala tętna powinna pojawić się po włożeniu ogona szczura do czujnika. Naciśnij start/stop, aby rozpocząć lub zatrzymać pomiar.Po zakończeniu badania ciśnienia krwi automatycznie pojawi się menu wyników. Sprawdź średnią wartość pomiaru, odchylenie standardowe, normę i współczynnik zmienności w menu wyników. Po eutanazji szczura należy go wyciąć nożyczkami chirurgicznymi i kleszczami do zębów od krocza do szyi.Odwróć zawartość klatki piersiowej i brzucha. Następnie przejdź do rozwidlenia aorty brzusznej między dwiema nerkami. Zbierz aortę do odcinka łuku aorty.Skurczowe i rozkurczowe ciśnienie krwi było istotnie wyższe w grupie met w porównaniu z grupą kontrolną od jednego do czterech tygodni. Ciśnienie krwi zmniejszyło się po podaniu wywaru z tongluo Huotan Jiedu. Łączne działanie wywaru i (lub) maleinianu enalaprylu miało silniejsze działanie przeciwnadciśnieniowe niż sam wywar.Na początek odwirować zakrzepłe probówki zawierające krew w temperaturze 626 do 1, 409 G przez 20 minut w temperaturze od dwóch do ośmiu stopni Celsjusza. Następnie ostrożnie zebrać supernatant w nowej probówce. Przechowywać supernatant w temperaturze 80 stopni Celsjusza.Następnie skonfiguruj studzienki ślepe, standardowe i na próbki. Odpipetować 50 mikrolitrów rozcieńczonych wzorców do płytki ELISA, a następnie przenieść 40 mikrolitrów rozcieńczonych próbek do dołków na próbki. Dodaj 10 mikrolitrów surowicy do dołków na próbki.Teraz uszczelnij płytkę folią uszczelniającą. Umieść szczelnie zamkniętą płytkę w inkubatorze w temperaturze 37 stopni Celsjusza na 30 minut. Rozcieńczyć 30x stężony roztwór płuczący wodą destylowaną, aby uzyskać roztwór płuczący o pojedynczej mocy.Następnie usuń folię sufitową z płyty i wylej płyn. Teraz napełnij każdą studzienkę pięciokrotnie 200 mikrolitrami roztworu myjącego. Po ostatnim wyrzuceniu supernatantu należy osuszyć płytkę.Odpipetować 50 mikrolitrów odczynnika enzymatycznego do wszystkich studzienek innych niż ślepe próby. Następnie uszczelnij płytkę folią sufitową przed umieszczeniem jej w inkubatorze w temperaturze 37 stopni Celsjusza na 30 minut. Po umyciu płytki jeszcze pięć razy dodaj 50 mikrolitrów każdego z wywoływaczy kolorów A i B. Delikatnie potrząśnij płytką, aby dobrze wymieszać, a następnie inkubuj płytkę w temperaturze 37 stopni Celsjusza przy słabym świetle przez 10 minut.Teraz odpipetuj 50 mikrolitrów roztworu zatrzymującego do każdej studzienki, aby zakończyć reakcję. Zmierz absorbancję każdego dołka sekwencyjnie przy 450 nanometrach. Stężenie homocysteiny w osoczu w grupie metioniny było dwukrotnie większe niż w grupie kontrolnej.Stężenia homocysteiny w osoczu były relatywnie niższe w badanych grupach.

the-antihypertensive-effects-mechanisms-huotan-jiedu-tongluo

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemia

Tutaj prezentujemy protokół odnerwienia współczulnego nerek (RDN) u myszy z nadciśnieniem wywołanym infuzją angiotensyny II. Zabieg jest powtarzalny, wygodny i pozwala na zbadanie mechanizmów regulacyjnych RDN na nadciśnienie tętnicze i przerost mięśnia sercowego.

Poprawa unerwienia nerek łagodziła nadciśnienie indukowane przez infuzję angiotensyny II

Obecny protokół opisuje technikę miografu drutowego do pomiaru reaktywności naczyniowej tętnicy wieńcowej szczura.

Ustandaryzowane przygotowanie pierścienia wieńcowego u szczurów i rejestracja w czasie rzeczywistym dynamicznych zmian napięcia wzdłuż średnicy naczynia

Tutaj prezentujemy protokół opisujący farmakologię sieciową i techniki dokowania molekularnego, aby zbadać mechanizm działania Jiawei Shengjiang San (JWSJS) w leczeniu nefropatii cukrzycowej.

Antagonistyczny wpływ Jiawei Shengjiang San na szczurzy model nefropatii cukrzycowej: związany ze szlakiem sygnałowym EGFR/MAPK3/1

Ten wysiłek badawczy miał na celu wyjaśnienie mechanizmu miejscowego podawania leków za pomocą synergicznej integracji sieciowych zestawów danych farmakologicznych i ekspresji genów (GEO). W tym artykule oceniono wykonalność, cel i mechanizm ShiDuGao (SDG) w leczeniu egzemy odbytu.

Skuteczność i mechanizmy leżące u podstaw leczenia wyprysku odbytu ShiDuGao na podstawie zestawów danych GEO i farmakologii sieciowej

Elastyczność konformacyjna odgrywa kluczową rolę w funkcjonowaniu białek. W tym artykule opisujemy zastosowanie czasowo-rozdzielczej spektrometrii mas z jonizacją elektronrozpylającą sprzężoną z wymianą wodorowo-deuterową do badania szybkich zmian strukturalnych, które napędzają funkcję w uporządkowanych i nieuporządkowanych białkach.

Spektrometria mas z jonizacją wodorowo-deuterową z jonizacją elektrorozpylającą do badania struktury i dynamiki białek

Niezgodności w sekwencjach ludzkiego antygenu leukocytarnego (HLA) między parami dawców i biorców narządów są główną przyczyną odrzucenia przeszczepu narządów za pośrednictwem przeciwciał. W tym miejscu przedstawiamy zastosowanie niestandardowych macierzy antygenowych, które są oparte na sekwencjach HLA poszczególnych dawców, do badania alloprzeciwciał HLA przeciwko dawcom u biorców narządów.

Spersonalizowane macierze peptydowe do wykrywania alloprzeciwciał HLA w przeszczepach narządów

Tutaj prezentujemy protokół kontrolowanej produkcji mikrokryształów białka. W procesie wykorzystuje się zautomatyzowane urządzenie pozwalające na kontrolowaną manipulację kilkoma parametrami krystalizacji. Krystalizacja białka odbywa się poprzez kontrolowane i zautomatyzowane dodawanie roztworów krystalizacyjnych przy jednoczesnym monitorowaniu i badaniu rozkładu promienia cząstek w kropli krystalizacji.

Hodowla kryształów białkowych o różnych wymiarach przy użyciu automatycznej krystalizacji połączonej z dynamicznym rozpraszaniem światła in situ

Prezentujemy podejścia do biofizycznej i strukturalnej charakterystyki glikoprotein z fałdowaniem immunoglobulin za pomocą interferometrii biowarstwowej, izotermicznej kalorymetrii miareczkowej i krystalografii rentgenowskiej.

Charakterystyka glikoprotein z fałdem immunoglobulinowym za pomocą krystalografii rentgenowskiej i technik biofizycznych

Dostępny jest tutaj protokół do badania interakcji między natywnymi formami, prefibrylarnymi i dojrzałymi fibrylami amyloidowymi różnych peptydów i białek z mitochondriami izolowanymi z różnych tkanek i różnych obszarów mózgu.

Interakcje i przenikanie błony mitochondriów mózgowych przez fibryle amyloidowe

Prezentowane są dwie metody wzbogacania cholesterolu: zastosowanie cyklodekstryny nasyconej cholesterolem do wzbogacenia tkanek i komórek ssaków oraz zastosowanie wzbogaconych cholesterolem dyspersji na bazie fosfolipidów (liposomów) do wzbogacania oocytów Xendopus. Metody te odgrywają zasadniczą rolę w określaniu wpływu podwyższonego poziomu cholesterolu na funkcjonowanie molekularne, komórkowe i narządowe.

Wzbogacanie tkanek ssaków i oocytów Xenopus w cholesterol

Poznaj mechanizm działania wywaru HTJDTLD w nadciśnieniu typu H u szczurów. Badanie wykazuje, że ziołowa formuła chińska skutecznie obniża ciśnienie poprzez hamowanie apoptozy indukowanej stresem ER.

Działanie przeciwnadciśnieniowe i mechanizmy wywaru z tongluo Huotan Jiedu u szczurów z nadciśnieniem typu H

Przeglądaj więcej filmów