Mysi model skojarzonej partycji wątroby i podwiązania żyły wrotnej do etapowego zabiegu hepatektomii wspomaganego mikroskopią

ALPPS może szybko wspomagać regenerację wątroby. Jednak model małego zwierzęcia gryzonia i mechanizm regeneracji są nadal niewystarczające. Model ten pozwala na badanie szlaku molekularnego i komórkowego zaangażowanego w regenerację wątroby po ciężkim uszkodzeniu wątroby.

Ostatnie badania wykazały, że równowaga GATA3 i Ramp2 w hepatocytach reguluje rekonstytucję mięśni wątroby w pooperacyjnej regeneracji wątroby. Sekwencjonowanie pojedynczych komórek, sekwencjonowanie ataków pojedynczych komórek, a także CRISPR pojedynczych komórek utorowały drogę do odkrycia nieznanych wcześniej typów i podtypów komórek w prawidłowej i chorej wątrobie. Technika ALPPS jest stosowana u pacjentów z guzami wątroby, których nie można usunąć chirurgicznie.

Zdolność pozostałej wątroby do regeneracji po zabiegu ma kluczowe znaczenie dla przeżycia pacjenta. Jednak mechanizm leżący u podstaw ALPPS pozostaje całkowicie nieznany. Opierając się na poprzednich raportach dotyczących szczurzych i mysich modeli ALPPS GeCKO, skonstruowaliśmy mysi protokół GeCKO, który był zgodny z operacją kliniczną i natywną kończyną.

Na początek wstrzyknij podskórnie jeden mililitr roztworu Ringera z mleczanami zmieszanego z 5% glukozą znieczulonym myszom. Użyj maszynki do strzyżenia małych zwierząt, aby ogolić dwucentymetrowy obszar w okolicy brzucha myszy. Następnie wykonaj nacięcie w linii środkowej za pomocą skalpela chirurgicznego.

Otwórz nacięcie nożyczkami chirurgicznymi. Użyj retraktora brzusznego, aby rozszerzyć nacięcie, ułatwiając jednocześnie delikatną trakcję dwunastnicy i odcinka jelita cienkiego za pomocą sterylnych, wilgotnych wacików. Przykryj struktury wstępnie przygotowanym sterylnym wacikiem, aby odsłonić wątrobowy odcinek żyły wrotnej.

W celu podwiązania żyły wrotnej oderwij otrzewną i przewód pokarmowy i okrąż główne gałęzie żył wrotnych powolnymi, celowymi, pchającymi i rozpierającymi się ruchami do przodu. Zidentyfikuj prawą tylną gałąź, połączone lewe boczne i środkowe gałęzie oraz gałąź ogoniastą. Następnie, aby wypreparować prawą tylną gałąź, zlokalizuj jej wydatną widoczną gałąź podczas przechodzenia przez wnękę wątroby przez główną żyłę wrotną.

Użyj zwilżonych wacików jako środka folującego, aby oddzielić środkowy płat wątroby od prawego tylnego płata. Przeprowadź sekcję wzdłuż kapsuły Glissona. Przeciągnij jedwabny krawat o długości 1,5 centymetra wokół gałęzi żyły wrotnej.

Następnie użyj 8-0 jedwabny szew do podwiązania prawej tylnej gałęzi. W celu rozwarstwienia lewej gałęzi bocznej i środkowej, najpierw należy wyciąć wszelkie potencjalne szczeliny między lewym płatem bocznym a płatem ogoniastym. Następnie wprowadź parę mikrokleszczyków do utworzonego wejścia.

Gdy wyczujesz opór, lekko wyreguluj mikrokleszcze, aby przesuwały się po powierzchni torebki Glissona prawego płata przyśrodkowego. Remis 8-0 jedwabny szew wokół żyły wrotnej lewej gałęzi bocznej i środkowej. Udane podwiązanie można zaobserwować poprzez rozgraniczenie niedokrwienne w obrębie środkowego płata wątroby, z bladością na płacie lewym.

Następnie rozetnij płat ogonowy. Wypełnij potencjalną przestrzeń między główną żyłą wrotną a płatem ogoniastym wacikiem. Oderwij otrzewną płatów ogoniastych, aby uwidocznić gałęzie żyły wrotnej płata.

Podwiązać gałąź ogoniastą za pomocą szwu zszywającego, upewniając się, że ścieżka igły odpowiednio owija gałąź ogoniastą. Aby przeciąć wątrobę, użyj pisaka do elektrokoagulacji, aby utworzyć 0,5-milimetrową linię cięcia wzdłuż linii demarkacyjnej w środkowym płacie wątroby. Za pomocą mikrokleszczy i długopisu do elektrokoagulacji przetnij tkankę wątroby.

Przetrzyj krwawienie bawełną. Usuń woreczek żółciowy na końcu, ponieważ zapewnia dobry punkt ciągnięcia podczas przecięcia. Użyj bawełnianego wacika, aby zastosować kontrolowany nacisk na hemostazę.

Po zakończeniu transsekcji i cholecystektomii ostrożnie umieść jelito cienkie z powrotem w jamie brzusznej. Zamknij otrzewną i ścianę brzucha za pomocą 6-0 wchłanialnych szwów. Zdezynfekuj powierzchnię skóry, a następnie wstrzyknij podskórnie fentanyl i meloksykam zmieszane z solą fizjologiczną, aby złagodzić ból pooperacyjny.

Umieść mysz na podkładce termostatycznej, aby ułatwić wybudzenie. Przenieś je do indywidualnych klatek, gdy odzyskają przytomność. Podskórnie wstrzyknąć medetomidynę, kontynuując przez 24 godziny po operacji.

Myszy, które poddano ALPPS, wykazywały większą skłonność do proliferacji komórek. Markery stanu zapalnego myszy ALPPS, w szczególności interleukiny-6, były wyższe niż te obserwowane w grupie PVL.