Zmodyfikowana metoda cewnikowania dooponowego u szczurów

Cewnikowanie dokanałowe jest szeroko stosowane w eksperymentach na zwierzętach, zwłaszcza w przypadku bólu neuropatycznego. Jednak tradycyjne metody nadal mają kilka ograniczeń. Chociaż niektórzy badacze próbowali udoskonalić tradycyjne metody, dostępne metody nadal wymagają modyfikacji.

W niniejszym artykule przedstawiamy zmodyfikowaną metodę cewnikowania dooponowego u szczurów, która stanowi proste, wygodne i niezawodne podejście do powtarzalnego dokanałowego podawania leków. Przygotuj rurkę PE10 o długości 15 centymetrów. Włóż drut ze stali nierdzewnej o długości 20 centymetrów z dwoma polerowanymi końcami do rurki PE10 jako podporę i zaznacz rurkę dwa centymetry od jednego końca.

Odetnij ostrą końcówkę igły 22G i uszczelnij dystalny koniec parą kleszczy. Wytnij cewnik zewnątrzoponowy na jednocentymetrowe fragmenty. Następnie włóż te fragmenty do igły 22G bez ostrej końcówki i uszczelnij dystalny koniec parą rozgrzanych prostych kleszczyków.

Aparat ten nazywano nasadką uszczelniającą rurkę. Przygotuj antyalergiczną opaskę o wymiarach 0,3 centymetra razy 0,5 centymetra za pomocą nożyczek. Przygotuj narzędzia do cewnikowania dooponowego, które zostały wysterylizowane przed operacją.

W zestawie kleszcze zębate, nożyczki, aparat do wbijania w głębnik, rękojeść skalpela i ostrza numer 10. Sterylizuj probówkę PE10 i przewód doprowadzający etanolem przez około dwie godziny. Znieczulenie szczurów 3% izofluranem przy natężeniu przepływu trzech litrów na minutę.

Umieść szczura na stole operacyjnym, a tylna łapa zostanie przycięta parą kleszczy. Brak ruchu tylnego bieguna w odpowiedzi na stymulację potwierdził skuteczne znieczulenie. Odpowiednie i przeciwbólowe podawano we wstrzyknięciu domięśniowym jednego miligrama na kilogram meloksykamu przed cewnikowaniem dooponowym.

Usuwa włosy z odcinka lędźwiowego kręgosłupa na plecach i na obszarze między dwoma uszami za pomocą golarki. Umieść probówkę wirówkową pod brzuchem szczura na skrzyżowaniu talii. Wysterylizuj miejsca operacyjne roztworem powidonjodu i roztworem etanolu trzy razy.

Przykryj szczura aseptycznym opatrunkiem i odsłoń miejsca operacji. A następnie umyj zwykłą solą fizjologiczną przed zabiegiem. Określ lokalizację przestrzeni międzykręgowej między L5 i L6, lokalizując wyrostek rdzeniowy L6 w punkcie środkowym między lewym i prawym obustronnym grzebieniem biodrowym.

Przymocuj skórę lewym kciukiem i palcem wskazującym operatora, a następnie wykonaj nacięcie linii środkowej o długości od trzech do czterech centymetrów tuż nad wyrostkiem kolczystym między L4 a S1. Tępo oddziel tkanki podskórne nożyczkami. Ponownie zlokalizuj przestrzeń międzykręgową między L5 i L6. Zaciśnij i podnieś wyrostek grzbietowy L5 za pomocą pary ząbkowanych kleszczy, aby rozszerzyć przestrzeń międzykręgową.

Następnie tępo oddziela mięśnie wokół trzonu kręgu za pomocą nożyczek w górnej części wyrostka grzbietowego L6 został całkowicie odsłonięty. Gdy wyrostek grzbietowy L5 zostanie podniesiony za pomocą pary ząbkowanych kleszczy, a przestrzeń międzykręgowa zostanie rozszerzona przez inną parę kleszczy, oczyść przestrzeń międzykręgową od L5 do sześciu wacikiem, aż odwrócony obszar V zostanie całkowicie odsłonięty. Nakłuć kręgosłup igłą 23G w odwróconym obszarze V, tuż pod górną częścią wyrostka grzbietowego L6.

Ostrożnie włóż rurkę PE10 zawierającą drut ze stali nierdzewnej do kanału kręgowego w miejscu nakłucia nachylonym o 30 stopni w kierunku ogona. Kąt wsunięcia był regulowany do momentu, gdy rurkę PE10 można było z powodzeniem włożyć bez żadnego oporu. Gdy zaznaczony obszar rurki PE10 dotrze do mięśnia tylnego, cewnikowanie zostaje zatrzymane.

Powoli usuwa drut ze stali nierdzewnej z probówki PE10, a następnie podłącza rurkę PE10 do strzykawki, przez którą wstrzykuje się 20 mikrolitrów zwykłej soli fizjologicznej. Po wyjęciu strzykawki sól fizjologiczna mogła wypływać w sposób ciągły z rurki PE10, co wskazuje, że rurka PE10 została pomyślnie wprowadzona do przestrzeni podpajęczynówkowej. Po potwierdzeniu, że PE10 two jest drożny, zszyj mięśnie po jednej stronie trzonu kręgu za pomocą szwu z czterema zerami i zawiąż węzeł.

Następnie zawiąż szew wokół rurki PE10 i wykonaj kolejny węzeł. Nie przecinaj szwu, a zszyj mięśnie po drugiej stronie. Ponownie zawiąż szew wokół rurki PE10.

Zrób trzeci węzeł i przetnij szew. Wykonaj nacięcie o długości 0,5 centymetra w odległości jednego centymetra tuż poniżej środka między uszami. Tępo oddziel tkanki podskórne nożyczkami.

I włóż metalową rurkę zgłębnika przez nacięcie w kierunku ogona. Aż końcówka będzie widoczna w nacięciu lędźwiowym. Włóż dystalny koniec rurki PE10 do rurki do zgłębnika, aż rurka PE10 wyjdzie z drugiego końca rurki do zgłębnika.

Następnie delikatnie wycofuje zgłębnik. Gdy potwierdzi się, że rurka PE10 jest ponownie drożna, zszyj pozostałe mięśnie wokół nacięcia lędźwiowego za pomocą szwu z czterema zerami. Zawiązuje szew wokół rurki PE10 i tworzy kolejny węzeł.

Ponownie zamocuj rurkę PE10. Zszyj skórę, unikając uszkodzenia rurki PE10, a następnie zszyj skórę szyi czterema zerowymi szwami. Zawiąż szew wokół rurki PE10 i zawiąż węzeł, aby przymocować rurkę PE10.

Po ponownym potwierdzeniu, że rurka PE10 jest drożna, należy uszczelnić pozaustrojowy koniec rurki PE10 za pomocą nasadki uszczelniającej. Rurkę PE10 wysuszono kawałkiem chusteczki i kilkakrotnie zawiązano antyalergiczną opaskę wokół rurki PE10, aby zapobiec cofaniu się rurki PE10 podczas ruchu szczura. Po operacji szczur wrócił do klatki i ściśle monitorował go podczas rekonwalescencji po znieczuleniu, aż odzyska przytomność.

Po tym, jak szczur jest w pełni wybudzony, zdejmij nakrętkę uszczelniającą i wstrzyknij 20 mikrolitrów 2% lidokainy do probówki PE10 w tempie 0,2 mikrolitra na sekundę za pomocą strzykawki Hamiltona, a następnie wstrzyknij 10 mikrolitrów normalnej soli fizjologicznej. Uszczelka rurki PE10 z nakrętką uszczelniającą. Połóż szczura na stole i uważnie obserwuj.

Paraliż kończyn dolnych po dokanałowym wstrzyknięciu lidokainy wskazuje na udane cewnikowanie. Paraliż kończyn tylnych trwa zwykle około 30 minut. Ściśle monitoruj szczura w okresie rekonwalescencji, aż do całkowitego przywrócenia funkcji kończyny.

Całkowita paraplegia obu kończyn dolnych szczurów po dokanałowym nakazie lidokainy wskazywała na udane cewnikowanie. Porównanie wskaźnika udanego cewnikowania między naszymi zmodyfikowanymi metodami a wcześniej opisaną metodą. Wskaźnik udanego cewnikowania dokanałowego dla naszej zmodyfikowanej metody wynosił 95%, co było większe niż 88% wskaźnik osiągnięty przy użyciu metody opisanej przez Hou i wsp.

Porównanie częstości stosowania cewnika przez długi czas między naszą zmodyfikowaną metodą a poprzednio opisaną metodą. Odsetek długotrwałego cewnika w drugim, piątym i siódmym dniu po cewnikowaniu dooponowym wynosił odpowiednio 94%81% i 65%, w badaniu przeprowadzonym przez Storkson i wsp. Częstość długotrwałego cewnikowania po dwóch, pięciu i siedmiu dniach po cewnikowaniu dooponowym wynosiła odpowiednio 95%90% i 85% dla naszej metody.

Podsumowując, zmodyfikowana metoda cewnikowania dooponowego może służyć jako użyteczne narzędzie do powtarzalnego dokanałowego podawania i podawania leków oraz stanowi prosty, wygodny i niezawodny sposób na skrócenie czasu trwania eksperymentów.