Model chirurgiczny jednoetapowych rurek urotelialnych inżynierii tkankowej u świnek miniaturowych

Na początek pościć dorosłego mini świnkę z Getyngi na 12 godzin przed zabiegiem. Po wykonaniu standardowej laparotomii dolnej linii środkowej u znieczulonej świni, należy pociągnąć pęcherz moczowy międzyotrzewnowy do rany. Teraz wykonaj profilaktyczną hemostazę na przedniej ścianie pęcherza moczowego i nacij mięsień wypieracza za pomocą diatermii.

Następnie przetnij wewnętrzną warstwę błony śluzowej nożyczkami, aby wyciąć segment pęcherza moczowego o pełnej ścianie. Zamknij ścianę pęcherza za pomocą szybko wchłanialnego plecionego szwu biegowego, pozostawiając proksymalny otwór o długości jednego centymetra kwadratowego. Ostrożnie wypreparuj warstwę błony śluzowej wyciętej próbki w sterylnych warunkach i zmiel próbkę błony śluzowej na mikroprzeszczepy o milimetrze kwadratowym w celu osadzenia rusztowania.

Za pomocą kleszczy umieść cząstki błony śluzowej na dopasowanej biodegradowalnej siatce o współczynniku rozszerzalności od jednego do sześciu. Umieść siatkę z mikroprzeszczepami skierowanymi do góry w prostokątnej stalowej formie wypełnionej roztworem kolagenu. Po zestaleniu nasuń hydrożel na nylonową siatkę spoczywającą na perforowanej stalowej płycie i delikatnie wyjmij formę.

Usuń wodę z hydrożelu, umieszczając nylonową siatkę, a następnie stalową płytkę na wierzchu żelu, a następnie pasywnie ściskaj 120-gramowym ciężarkiem umieszczonym na wierzchu stalowej płytki przez pięć minut. Po ściśnięciu delikatnie usuń ciężarek i nylonową siatkę. Teraz przeszczep jest gotowy do zabiegu chirurgicznego.

Zwiń spłaszczone rusztowanie wokół biodegradowalnego stentu z mikroprzeszczepami skierowanymi w stronę stentu i zszyj rusztowanie wzdłużnie za pomocą wolno wchłanialnego szwu monofilamentowego. Zamocuj korek lewatywy z okrężnicy antegrade wewnątrz światła stentu, przyszywając stent do czapeczki za pomocą dwóch lub trzech przerwanych szwów niewchłanialnych. Po wykonaniu rusztowania należy zespoleć konstrukcję rurkową z pozostałym otworem na przedniej ścianie pęcherza moczowego za pomocą wolno wchłanialnego szwu biegowego z monofilamentu.

Zaciśnij zespolenie za pomocą szwu sznurkowego w torebce i podwiąż dystalny koniec przewodu. Zbierz płat otrzewnowy z więzadła łonowego i załataj rusztowanie rurkowe wzdłużnie za pomocą biegnącego, wolno wchłanialnego szwu monofilamentowego. Wstrzyknąć sól fizjologiczną przez cewnik cewki moczowej, aby potwierdzić drożność zespolenia.

Tępo wypreparuj kanał trans powięziowy bocznie do linii środkowej obok ogonowego gruczołu sutkowego po prawej stronie. Umieść przewód w kieszonce podskórnej i oznacz przewód niewchłanialnymi szwami na poziomie skóry. Po zamknięciu powięzi mięśniowej przedniej mięśnia brzucha należy zamknąć skórę niewchłanialnym szwem biegowym z monofilamentu.

Pod koniec sześciu tygodni obserwacji należy sprawdzić światło przewodu za pomocą endoskopii pod kątem ciągłości i wyściółki nabłonka. Wykonaj tomografię komputerową ze wzmocnieniem kontrastowym, aby zapewnić drożność przewodów. Po sześciu tygodniach obserwacji mikroskopowa ocena tkanki rusztowania nie wykazała żadnych oznak odrzucenia gospodarza lub infekcji, a rusztowanie rurkowe pozostało nietknięte i drożne.

Oceny histologiczne wykazały warstwowy nabłonek świetlny pochodzenia urotelialnego pokrywający całe rusztowanie z pozostałościami biomateriałów wzmacniających, które po sześciu tygodniach są nadal widoczne.