Zmodyfikowany model preparatu do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu
31 maja 2024
Ten protokół opisuje proces przygotowania do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu przez tętnicę szyjną wspólną.
Zakres naszych badań to modernizacja w zakresie niedokrwienia mózgu. Podjęliśmy próbę wprowadzenia nici jedwabnej z tętnicy szyjnej wspólnej i nacięcia pięcioma nićmi jedwabnymi z tętnicy szyjnej wspólnej i tętnicy szyjnej zewnętrznej. Uważa się, że metoda jest niewystarczająca, ale uważa się, że wpływa ona na dopływ krwi do mięśni.
Operacja jest złożona i dla początkujących. Nasz protokół odnosi się do powyższego, następuje i zapewnia alternatywne podejście. Nasz protokół ułatwia większej liczbie lekarzy opanowanie nowoczesności niedokrwiennej mózgu i szybkie odkrycie potencjalnych leków neuroprotekcyjnych.
Po znieczuleniu szczura i zdezynfekowaniu obszaru operacyjnego wykonaj dwucentymetrowe nacięcie wzdłuż linii środkowej szyi za pomocą ostrza chirurgicznego. Zastosuj retraktory, aby bocznie odciągnąć skórę i gruczoły ślinowe, odsłaniając mięśnie mostkowo-obojczykowo-sutkowe i szyjne. Następnie oddziel mięśnie mostkowo-obojczykowo-sutkowe i szyjne, aby odsłonić obszar szyjny.
Oddziel wspólną tętnicę szyjną i zidentyfikuj anatomię naczyniową wspólnej tętnicy szyjnej wewnętrznej i zewnętrznej. Następnie oddziel pochodzącą z tętnicy szyjnej wspólnej, tętnicę szyjną zewnętrzną i tętnicę szyjną wewnętrzną. Za pomocą jedwabnej nici 3/O zawiąż łatwo rozplątujący się węzeł nad tętnicą szyjną zewnętrzną i tętnicą szyjną wspólną, aby tymczasowo zablokować przepływ krwi.
Umieść klips naczyniowy na wspólnej tętnicy szyjnej około 0,5 centymetra od pierwszego węzła i umieść luźny węzeł między pierwszym klipsem naczyniowym a węzłem nici jedwabnej. Teraz ufarbuj igłę pięciomililitrowej strzykawki na czarno. Następnie za pomocą barwionej na czarno igły wykonaj małe nakłucie w tętnicy szyjnej wspólnej i zaznacz otwory na szpilki na czarno.
Włóż nylonowy szew monofilamentowy do wspólnej tętnicy szyjnej przez znak. Otwórz zacisk naczyniowy i poprowadź nylonowy drut do tętnicy szyjnej wewnętrznej, aż zatrzyma się z lekkim oporem. Następnie mocno zaciśnij drugi węzeł, aby utrzymać nylonowy szew monofilamentowy na miejscu wewnątrz tętnicy, zapobiegając przemieszczeniu się z pozycji blokującej.
Rozwiąż węzły na tętnicy szyjnej zewnętrznej, aby umożliwić reperfuzję krwi. Po zabezpieczeniu szwu monofilamentowego i jego wyjęciu należy rozwiązać węzeł na tętnicy szyjnej wspólnej. Założyć klips naczyniowy przed zamocowanym szwem monofilamentowym, aby zapobiec krwawieniu.
Następnie zastąp pierwszy wspólny węzeł tętnicy szyjnej klipsem naczyniowym. Użyj pęsety, aby obrócić nacięcie naczynia na boki. Zacisnąć nacięcie pęsetą i podwiązać je za pomocą nici 6/O, aby naprawić nacięcie.
Zdejmij klips naczyniowy, sprawdź, czy nie ma wycieków i potwierdź całkowitą reperfuzję. Laserowe obrazowanie przepływu plamkowego wykazało, że przed zamknięciem tętnicy środkowej mózgu lub MCA występował obfity przepływ krwi w obszarze MCA. Po zamknięciu MCA wartość przepływu krwi po niedokrwiennej stronie mózgu gwałtownie spadła.
Przepływ krwi po stronie niedokrwiennej został ponownie sprawdzony przed zdjęciem szwu, potwierdzając okluzję MCA z niewielką zmianą przepływu krwi. Po wycofaniu szwu perfuzja krwi szybko się przywróciła.
Przegląd
Niniejszy protokół opisuje proces przygotowania do reperfuzji po zamknięciu środkowej tętnicy mózgowej poprzez wspólną tętnicę szyjną. Metoda ta ma na celu uproszczenie złożonej procedury dla praktyków, co ułatwia badanie niedokrwienia mózgu.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Niedokrwienie mózgu
- Neuroprotekcja
Wprowadzenie
- Badanie koncentruje się na niedokrwieniu mózgu i jego skutkach.
- Nić jedwabna jest wprowadzana przez wspólną tętnicę szyjną.
- Operacja jest złożona, szczególnie dla osób początkujących.
- Protokół ma na celu zapewnienie alternatywnego podejścia w celu zwiększenia dostępności.
Cel badania
- Uproszczenie procedury reperfuzji po zamknięciu tętnicy środkowej mózgu.
- Umożliwienie większej liczbie badaczy opanowania tej techniki.
- Ułatwienie odkrywania potencjalnych leków neuroprotekcyjnych.
Zastosowane metody
- Przygotowanie do okluzji środkowej tętnicy mózgowej.
- Wykorzystanie nici jedwabnej do okluzji tętnicy.
- Techniki nacięcia obejmujące wspólną i zewnętrzną tętnicę szyjną.
- Omówienie trudności operacyjnych dla osób początkujących.
Główne wyniki
- Protokół zapewnia praktykom bardziej przejrzystą metodę.
- Rozwiązuje on niedoskonałości poprzednich metod.
- Ułatwia badanie leków neuroprotekcyjnych.
- Zwiększa zrozumienie wpływu ukrwienia na mięśnie.
Wnioski
- Protokół ten upraszcza złożoną procedurę chirurgiczną.
- Zwiększa on dostępność metody dla badaczy z tej dziedziny.
- Zachęca do dalszego zgłębiania strategii neuroprotekcyjnych.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Zmodyfikowany model reperfuzji po zatorze tętnicy środkowej mózgu (MCAO/R) rozwiązuje krytyczne problemy z powtarzalnością i wyzwaniami translacyjnymi w przedklinicznych badaniach nad udarem. Dzięki zachowaniu integralności naczyniowej i umożliwieniu niezawodnej reperfuzji, protokół ten zwiększa pewność prognostyczną w procesie odkrywania leków neuroprotekcyjnych oraz minimalizacji ryzyka mechanistycznego na wczesnym etapie odkryć. Prostota operacyjna modelu sprzyja jego szerszemu zastosowaniu i standaryzacji w ramach portfeli badawczo-rozwojowych przedsiębiorstw.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne etapy odkrywania i walidacja celu
- Umożliwia rzetelną weryfikację hipotez dotyczących neuroprotekcji w kontrolowanym środowisku niedokrwiennym.
- Wspiera funkcjonalną walidację celów terapeutycznych poprzez indukowanie powtarzalnego niedokrwiennego uszkodzenia nerwu.
- Ułatwia ograniczanie ryzyka mechanistycznego dzięki mierzalnym punktom końcowym w badaniach neurologicznych i histologicznych.
Przesiewy i opracowywanie testów
- Zapewnia zwalidowany system in vivo do oceny potencjalnych związków neuroprotekcyjnych.
- Standaryzuje ocenę neurologiczną i barwienie tkanek w celu uzyskania ilościowych i powtarzalnych wyników.
- Zapewnia gotowość testu do wysokoksiączowego przesiewu związków oraz badań porównawczych.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Jest zgodne z patofizjologią istotną dla danej choroby w celu translacyjnego oceny biomarkerów.
- Zapewnia ciągłość od wczesnej fazy odkrywania po przedkliniczną walidację skuteczności.
- Wspiera decyzje dotyczące postępów w badaniach, skorygowane o ryzyko, w oparciu o powtarzalne wyniki niedokrwienne.
Integracja potoku i przepływu pracy
Ten zmodyfikowany model MCAO/R wpisuje się w kontinuum od wczesnego odkrywania do walidacji przedklinicznej w procesie opracowywania leków neuroprotekcyjnych.
- Biologia odkrywcza: Umożliwia testowanie hipotez i wyjaśnianie szlaków w modelach niedokrwienia mózgu.
- Przesiewanie: Zapewnia powtarzalne, ilościowe wyniki neurologiczne i histologiczne do oceny związków.
- Analityka: Dostarcza standaryzowanych pomiarów, takich jak obrazowanie przepływu metodą plamek laserowych oraz barwienie TTC, w celu porównania różnych warunków.
- Badania translacyjne: Łączy fazę odkrywczą z fazą przedkliniczną za pomocą punktów końcowych istotnych dla choroby.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Oferuje skalowalny, standaryzowany protokół, który można dostosować do potrzeb różnych zespołów badawczych i projektów.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorczy
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność prognostyczną i redukuje niejednoznaczność mechanistyczną w badaniach nad neuroprotekcją.
- Wartość operacyjna: Upraszcza złożone procedury, poprawiając powtarzalność i skalowalność w wieloośrodkowych działaniach B+R.
- Wartość strategiczna: Umożliwia podejmowanie bardziej świadomych decyzji o kontynuacji lub przerwaniu badań (go/no-go) oraz efektywniejsze pod kątem kapitałowym zarządzanie portfelem.
- Wpływ na portfolio: Wspiera priorytetyzację skorygowaną o ryzyko oraz rozwój kandydatów na leki neuroprotekcyjne.
Uwagi dotyczące implementacji
- Wymagana jest biegłość w technikach mikrosurgicalnych oraz znajomość anatomii naczyniowej gryzoni.
- Niezbędny jest dostęp do obrazowania przepływu metodą laser speckle oraz standaryzowanych narzędzi do oceny neurologicznej.
- Wymagane jest ścisłe przestrzeganie protokołu przez cały zespół w celu zapewnienia powtarzalności i porównywalności danych.
- Metoda jest możliwa do zastosowania w różnych modelach gryzoni, lecz może wymagać optymalizacji dla różnych szczepów lub grup wiekowych.
- Potencjalne ograniczenia obejmują okres nauki technik chirurgicznych oraz zmienność wyników niedokrwiennych specyficzną dla danego modelu.
