Zmodyfikowany model preparatu do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu
May 31st, 2024
Ten protokół opisuje proces przygotowania do reperfuzji niedrożności tętnicy środkowej mózgu przez tętnicę szyjną wspólną.
Zakres naszych badań to modernizacja w zakresie niedokrwienia mózgu. Podjęliśmy próbę wprowadzenia nici jedwabnej z tętnicy szyjnej wspólnej i nacięcia pięcioma nićmi jedwabnymi z tętnicy szyjnej wspólnej i tętnicy szyjnej zewnętrznej. Uważa się, że metoda jest niewystarczająca, ale uważa się, że wpływa ona na dopływ krwi do mięśni.
Operacja jest złożona i dla początkujących. Nasz protokół odnosi się do powyższego, następuje i zapewnia alternatywne podejście. Nasz protokół ułatwia większej liczbie lekarzy opanowanie nowoczesności niedokrwiennej mózgu i szybkie odkrycie potencjalnych leków neuroprotekcyjnych.
Po znieczuleniu szczura i zdezynfekowaniu obszaru operacyjnego wykonaj dwucentymetrowe nacięcie wzdłuż linii środkowej szyi za pomocą ostrza chirurgicznego. Zastosuj retraktory, aby bocznie odciągnąć skórę i gruczoły ślinowe, odsłaniając mięśnie mostkowo-obojczykowo-sutkowe i szyjne. Następnie oddziel mięśnie mostkowo-obojczykowo-sutkowe i szyjne, aby odsłonić obszar szyjny.
Oddziel wspólną tętnicę szyjną i zidentyfikuj anatomię naczyniową wspólnej tętnicy szyjnej wewnętrznej i zewnętrznej. Następnie oddziel pochodzącą z tętnicy szyjnej wspólnej, tętnicę szyjną zewnętrzną i tętnicę szyjną wewnętrzną. Za pomocą jedwabnej nici 3/O zawiąż łatwo rozplątujący się węzeł nad tętnicą szyjną zewnętrzną i tętnicą szyjną wspólną, aby tymczasowo zablokować przepływ krwi.
Umieść klips naczyniowy na wspólnej tętnicy szyjnej około 0,5 centymetra od pierwszego węzła i umieść luźny węzeł między pierwszym klipsem naczyniowym a węzłem nici jedwabnej. Teraz ufarbuj igłę pięciomililitrowej strzykawki na czarno. Następnie za pomocą barwionej na czarno igły wykonaj małe nakłucie w tętnicy szyjnej wspólnej i zaznacz otwory na szpilki na czarno.
Włóż nylonowy szew monofilamentowy do wspólnej tętnicy szyjnej przez znak. Otwórz zacisk naczyniowy i poprowadź nylonowy drut do tętnicy szyjnej wewnętrznej, aż zatrzyma się z lekkim oporem. Następnie mocno zaciśnij drugi węzeł, aby utrzymać nylonowy szew monofilamentowy na miejscu wewnątrz tętnicy, zapobiegając przemieszczeniu się z pozycji blokującej.
Rozwiąż węzły na tętnicy szyjnej zewnętrznej, aby umożliwić reperfuzję krwi. Po zabezpieczeniu szwu monofilamentowego i jego wyjęciu należy rozwiązać węzeł na tętnicy szyjnej wspólnej. Założyć klips naczyniowy przed zamocowanym szwem monofilamentowym, aby zapobiec krwawieniu.
Następnie zastąp pierwszy wspólny węzeł tętnicy szyjnej klipsem naczyniowym. Użyj pęsety, aby obrócić nacięcie naczynia na boki. Zacisnąć nacięcie pęsetą i podwiązać je za pomocą nici 6/O, aby naprawić nacięcie.
Zdejmij klips naczyniowy, sprawdź, czy nie ma wycieków i potwierdź całkowitą reperfuzję. Laserowe obrazowanie przepływu plamkowego wykazało, że przed zamknięciem tętnicy środkowej mózgu lub MCA występował obfity przepływ krwi w obszarze MCA. Po zamknięciu MCA wartość przepływu krwi po niedokrwiennej stronie mózgu gwałtownie spadła.
Przepływ krwi po stronie niedokrwiennej został ponownie sprawdzony przed zdjęciem szwu, potwierdzając okluzję MCA z niewielką zmianą przepływu krwi. Po wycofaniu szwu perfuzja krwi szybko się przywróciła.
Overview
Ten protokół opisuje proces przygotowania do zamknięcia tętnicy środkowej mózgu z reperfuzją przez tętnicę wspólną szyjną. Metoda ma na celu uproszczenie złożonej procedury dla praktyków, ułatwiając badanie niedokrwienia mózgu.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuroscience
- Cerebral Ischemia
- Neuroprotection
Tło
- Badanie koncentruje się na niedokrwieniu mózgu i jego skutkach.
- Wprowadzany jest nić jedwabna z tętnicy wspólnej szyjnej.
- Operacja jest skomplikowana, szczególnie dla początkujących.
- Protokół ma na celu zapewnienie alternatywnego podejścia, które zwiększy dostępność.
Cel badania
- Uproszczenie procedury zamknięcia tętnicy środkowej mózgu z reperfuzją.
- Umożliwienie większej liczbie praktyków opanowania techniki.
- Ułatwienie odkrywania potencjalnych leków neuroprotekcyjnych.
Metody użyte
- Przygotowanie do zamknięcia tętnicy środkowej mózgu.
- Użycie nici jedwabnej do zamknięcia tętnicy.
- Techniki nacinania obejmujące tętnicę wspólną i zewnętrzną szyjną.
- Rozwiązanie złożoności operacji dla początkujących.
Główne wyniki
- Protokół zapewnia jaśniejszą metodę dla praktyków.
- Usuwa niedociągnięcia poprzednich metod.
- Ułatwia badanie leków neuroprotekcyjnych.
- Poprawia zrozumienie wpływu dopływu krwi na mięsień.
Wnioski
- Protokół upraszcza złożoną procedurę chirurgiczną.
- Poprawia dostępność dla badaczy w tej dziedzinie.
- Zachęca do dalszych badań nad strategiami neuroprotekcyjnymi.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
The modified middle cerebral artery occlusion reperfusion (MCAO/R) model addresses critical reproducibility and translational challenges in preclinical stroke research. By preserving vascular integrity and enabling reliable reperfusion, this protocol enhances predictive confidence for neuroprotective drug discovery and mechanistic de-risking at the early discovery stage. Its operational simplicity supports broader adoption and standardization across enterprise R&D portfolios.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables robust interrogation of neuroprotective hypotheses in a controlled ischemic environment.
- Supports functional target validation by inducing reproducible ischemic nerve damage.
- Facilitates mechanistic de-risking through quantifiable neurological and histological endpoints.
Screening & Assay Development
- Provides a validated in vivo system for evaluating candidate neuroprotective compounds.
- Standardizes neurological scoring and tissue staining for quantitative, reproducible outputs.
- Ensures assay readiness for high-confidence compound screening and comparative studies.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant pathophysiology for translational biomarker assessment.
- Enables continuity from early discovery through preclinical efficacy validation.
- Supports risk-adjusted advancement decisions based on reproducible ischemic outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This modified MCAO/R model fits within the early discovery to preclinical validation continuum for neuroprotective drug development.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis testing and pathway clarification in cerebral ischemia models.
- Screening: Delivers reproducible, quantitative neurological and histological readouts for compound evaluation.
- Analytics: Provides standardized measurements such as laser speckle flow imaging and TTC staining for cross-condition comparison.
- Translational Research: Bridges discovery and preclinical phases with disease-relevant endpoints.
- Enterprise Reuse: Offers a scalable, standardized protocol adaptable across research teams and studies.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in neuroprotection studies.
- Operational Value: Simplifies complex procedures, improving reproducibility and scalability for multi-site R&D.
- Strategic Value: Enables more informed go/no-go decisions and capital-efficient portfolio management.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of neuroprotective candidates.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical techniques and rodent vascular anatomy.
- Needs access to laser speckle flow imaging and standardized neurological scoring tools.
- Demands cross-team adherence to protocol for reproducibility and data comparability.
- Adaptable to various rodent models but may require optimization for different strains or ages.
- Potential limitations include surgical learning curve and model-specific variability in ischemic outcomes.
