Mysi model naczyniowych zaburzeń poznawczych i otępienia oparty na asymetrycznym obustronnym zwężeniu tętnicy szyjnej wspólnej prowadzonym igłą

Nasze laboratorium posłużyło do zidentyfikowania nowych metod leczenia udaru niedokrwiennego i naczyniowych zaburzeń poznawczych oraz demencji. W tym badaniu stworzyliśmy nowy model myszy do badania naczyniowych zaburzeń poznawczych i demencji.

Głównym wyzwaniem jest to, że naczyniowe upośledzenie funkcji poznawczych i demencja to złożony termin, który łączy w sobie wiele klinicznych reprezentacji i przyczyn. Dlatego naukowcy powinni zawsze o tym pamiętać przy wyborze modelu zwierzęcego do swoich eksperymentów.

Stworzyliśmy nowatorski model VCID, który umożliwia dynamiczne monitorowanie fal mózgowych za pomocą rezonansu magnetycznego w dalszym zapaleniu, a mechanizm ten odgrywa kluczową rolę w VCID.

Nasz model jest wysoce niezawodny, pozwala na precyzyjne dostrojenie jego parametrów w zależności od potrzeb badacza, ma ultra niski koszt, a także pozwala na skanowanie MRI u żywych zwierząt. Stan zapalny odgrywa kluczową rolę w VCID, a my będziemy dalej analizować mechanizm, w jaki sposób stan zapalny prowadzi do demencji i jak złagodzić chorobę poprzez modulowanie stanu zapalnego.

[Narrator] Na początek umieść fragmenty igły o długości czterech milimetrów na sterylnej szalce Petriego. Delikatnie postukaj ostrym końcem igieł o twardą powierzchnię, aby je stępić. Za pomocą uchwytu na igłę ostrożnie oddziel igły od ich plastikowych kawałków i wstępnie przytnij jedwabne szwy 7-0 na kawałki o długości od jednego do dwóch centymetrów. Po znieczuleniu myszy umieść ją na poduszce grzewczej brzuszną stroną do góry. Wysterylizuj miejsce operowane roztworem Betadine zawierającym 10% jodu i odjodowizuj skórę 70% etanolem. Upewnij się, że poziom znieczulenia jest odpowiedni za pomocą testu szczypania palców u nóg. Teraz wykonaj pionowe nacięcie w linii środkowej wzdłuż tchawicy. Za pomocą mikrokleszczyków delikatnie oddziel obustronne gruczoły tarczycy, a następnie odciągnij skórę i tkankę pod spodem za pomocą sterylnych małych retraktorów skóry. Pod mikroskopem użyj kątowej pęsety, aby ostrożnie odsłonić i tępo wypreparować jeden z CCA z nerwu błędnego i otaczającej go osłonki. Jeśli CCA ma tendencję do przylegania do kleszczy, zwilż miejsce nacięcia sterylną wodą lub PBS. W razie potrzeby umieść małą plastikową strzykawkę pod szyją, aby podtrzymać postawę. Następnie, za pomocą kątowej pęsety, nawlecz trzy wstępnie przycięte fragmenty jedwabnego szwu 7-0 pod CCA, zachowując odstępy około jednego milimetra od siebie. Stwórz bardzo luźny podwójny węzeł wokół CCA na jednym z fragmentów szwu. Przygotowany fragment igły ustawić równolegle do CCA, umieszczając go w luźnym węźle. Ostrożnie zacisnąć główny węzeł zarówno wokół igły, jak i CCA, aż do zatrzymania przepływu krwi. Następnie zabezpiecz go węzłem wtórnym. Delikatnie wyciągnij igłę, aby umożliwić wznowienie częściowego przepływu krwi i przytnij końce szwu. Upewnij się, że wszystkie trzy opaski do szwów na CCA są bezpiecznie zawiązane, ale nie są tak ciasne, aby całkowicie utrudnić przepływ krwi. Upewnij się, że CCA nie jest blady za węzłami i że szwy są równomiernie rozmieszczone. Powtórz izolację i podwiązanie CCA po drugiej stronie i potwierdź prawidłową odległość i przywrócenie przepływu krwi. Dwuwymiarowe laserowe obrazowanie plamkowe wykazało, że hipoperfuzja mózgowa była bardziej wyraźna w lewej półkuli i utrzymywała się przez co najmniej 24 tygodnie po operacji. Wskaźnik przeżycia samców myszy po operacji przez sześć tygodni odnotowano na poziomie 81,6% z wyższą śmiertelnością w pierwszym tygodniu. Obrazy MRI zależne od T2 wykryły hipo- lub hiperintensywne regiony w wielu obszarach mózgu u myszy operowanych ABCS, co wskazuje na uszkodzenie mózgu. Kierunkowo kodowane mapy kolorów z obrazowania tensora dyfuzji wykazały uszkodzenia strukturalne u myszy ABCS w porównaniu z grupą Sham. Testy labiryntu wodnego Morrisa wykazały wydłużone opóźnienie ucieczki u myszy obsługiwanych przez ABCS, co wskazuje na znaczne trudności w uczeniu się. Skrócony czas spędzony w kwadrancie docelowym podczas próby sondy dodatkowo potwierdził upośledzenie pamięci. Deficyty te utrzymywały się przez co najmniej 24 tygodnie po operacji.