Name: Zawartość flawonoidów podczas wzrostu i rozwoju kwiatowego nagietka lekarskiego (Calendula officinalis L.) (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-27T12:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Poznaj metodę kolorymetryczną do ilościowego oznaczania flawonoidów w nagietku lekarskim Calendula officinalis. Technika ta pozwala określić optymalny czas zbioru rośliny w celu maksymalizacji jej potencjału leczniczego i handlowego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Chcemy wyrazić naszą szczerą wdzięczność Dr. Manuelowi Jiménezowi Vasquezowi za jego nieocenione wsparcie w utrzymaniu roślin na polu. Jego pomoc była kluczowa dla powodzenia tych badań.

1. Ogólne materiały i metody
<ol>
	<li>Eksperyment terenowy do wykrywania inicjacji kwiatowej
	<ol>
		<li>Skonfiguruj eksperyment w warunkach terenowych. Przesadzaj sadzonki nagietka na powierzchni 153 m2 z gęstością sadzenia roślin na metr kwadratowy, w odstępach 60 cm od siebie.</li>
		<li> Ustal zlokalizowany system nawadniania kropelkowego z rozmiarem 16/8000 UWAGA: Partia nasion użyta w tym eksperymencie została zebrana z jednego genotypu, a następnie wybrana metodą hodowli masowej w trzech poprzednich cyklach uprawy. W klimacie umiarkowanym czas siewu jest najlepszy w sezonie wiosennym, a następnie przesadzanie około 2 miesiące później, gdy sadzonki są gotowe. Nawadnianie zaleca się raz w tygodniu. Należy unikać szkodników i chorób, a zarządzanie agronomiczne powinno być prowadzone w oparciu o potrzeby upraw.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Próbki z wybranych roślin należy pobierać co drugi dzień, zaczynając 14 dni po przesadzeniu. Obserwuj merystem wierzchołkowy pod mikroskopem stereoskopowym (około 40X) w celu określenia daty pojawienia się zawiązka kwiatostanu. 
	UWAGA: Gdy merystem kwiatowy (FM) pojawia się w co najmniej połowie próbek, wówczas datę tę można zapisać jako właściwy wiek dla FM. Jednostką doświadczalną do obserwacji inicjacji kwiatowej było pięć merystemów w jednej roślinie, z ośmioma replikacjami (roślinami). Analiza wzrostu i rozwoju kwiatów
	<ol>
		<li>Zbierz wierzchołkową główkę, gdy otworzy się pąk kwiatowy. 
		UWAGA: Upewnij się, że kwiaty języczkowate są widoczne.</li>
		<li>Przeprowadzanie kolekcji organów kwiatowych w ciągu ostatnich siedmiu faz kwiatowych12 (Rysunek 1). 
		UWAGA: W tym eksperymencie użyto pięciu kapitulumów z ośmiu różnych roślin na każdym etapie rozwoju. We wszystkich przypadkach kwiaty zostały zebrane z wierzchołkowej części rośliny.</li>
		<li>Pobieraj próbki całych roślin sześć razy w cyklu biologicznym.</li>
		<li>Suszyć pobrane próbki przez 48 godzin. Zmierzyć suchą masę narządów wegetatywnych i rozrodczych. 
		UWAGA: Zaleca się suszenie w temperaturze 40 °C w piecu z obiegiem powietrza.</li>
		<li>Oblicz wytrzymałość zlewu (SS) i aktywność zlewu (SA) zarówno dla narządów wegetatywnych, jak i rozrodczych13. 
		UWAGA: W przypadku SS i SA należy użyć wzorów odpowiadających odpowiednio bezwzględnej stopie wzrostu (AGR) i względnej szybkości wzrostu (RGR).</li>
		<li>Wykreśl krzywe wzrostu za pomocą arkusza kalkulacyjnego.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Kwantyfikacja całkowitej ilości flawonoidów14
<ol>
	<li>Suszyć materiał roślinny w suszarce z wymuszonym obiegiem powietrza w temperaturze 40 °C przez 48 godzin.</li>
	<li>Wysuszony materiał przechowuj w papierowych torebkach. Przechowuj je w ciemności w temperaturze pokojowej (RT).</li>
	<li>Zamroź materiał roślinny za pomocą ciekłego azotu, aby przygotować go do mielenia.</li>
	<li>Zamrożony materiał zmielić w moździerzu porcelanowym, aż osiągnie jednolitą konsystencję. 
	UWAGA: Zachowaj ostrożność podczas obchodzenia się z ciekłym azotem, ponieważ może on rozprysnąć się w kontakcie z materiałem roślinnym.</li>
	<li>Przygotowanie próbki: Odważyć 25 mg sproszkowanej suchej masy z każdej próbki. Dodaj 500 μl 80% metanolu.</li>
	<li>Ekstrakcja flawonoidów: Inkubować mieszaninę w urządzeniu ultradźwiękowym w temperaturze 70 °C przez jedną godzinę. Następnie odwiruj go przy 731 g przez 13 min15.</li>
	<li>Przygotuj podwielokrotności: Weź 150 μL otrzymanego ekstraktu i dodaj 37 μL 80% metanolu.</li>
	<li>Wymieszać 50 μl ekstraktu, 100 μl 10% chlorku glinu i 100 μl 1 M octanu potasu. Dodaj wodę destylowaną, aby uzyskać całkowitą objętość do 5 ml.</li>
	<li>Pozostaw roztwór na 30 minut w temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Do pomiaru absorbancji przy długości fali 415 nm użyto spektrofotometru.</li>
	<li>Wygeneruj krzywą kalibracyjną: Przygotuj roztwór podstawowy, rozpuszczając 2,7 mg kwercetyny w 10 ml 80% metanolu. Z tego wywaru przygotuj serię 5 roztworów kwercetyny w zakresie od 50, 100,175, 250 i 350 μl i rozcieńcz do 10 ml.</li>
	<li>Przygotuj próbki kalibracyjne: Do każdego roztworu kwercetyny (500 μl) dodaj 100 μl 10% chlorku glinu i 100 μl 1M octanu potasu, 1,5 ml 80% metanolu i 2,8 ml wody destylowanej.</li>
	<li>Pozostaw roztwór na 40 minut w temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Zmierzyć absorbancję próbek kalibracyjnych przy długości fali 415 nm za pomocą spektrofotometru. Zapisać wartości absorbancji w celu skonstruowania krzywej kalibracyjnej. 
	UWAGA: Porównaj całkowite stężenie flawonoidów w kwiatach płaszczek, kwiatach rurkowych i całych główkach kwiatów. W tym eksperymencie wykorzystano całkowicie losowy projekt eksperymentalny z pięcioma powtórzeniami na zabieg. Zmienną odpowiedzi było stężenie flawonoidów; środki leczenia porównano z testem Tukeya (SAS Institute, 2003).</li>
</ol>

<ol><li>Vârban, D. A. N., Duda, M. M., Vârban, R., Muntean, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aV%C3%A2rban%2C+DAN+%22The+influence+of+the+nutrition+space+upon+the+production%2C+at+Calendula+officinalis+L.+in+the+conditions+of+Cluj-Napoca%22">The influence of the nutrition space upon the production, at Calendula officinalis L. in the conditions of Cluj-Napoca</a>. , https://agricultura.usab-tm.ro/Simpo2008pdf/Volumul%201/Sectiunea%201/50%20Varban%20Dan.pdf (2006).</li>
<li>Hindle, V. A., Mathijssen-Kamman, A. A., Stockhofe, N., Cone, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+performance+of+young+pigs+fed+different+amounts+of+marigold+%28Calendula+officinalis%29+meal%3B+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Netherlands+J+Agric+Sci%22%5BJournal%5D)">The performance of young pigs fed different amounts of marigold (Calendula officinalis) meal; a pilot study.</a> Netherlands J Agric Sci. 50, 83-94 (2002).</li>
<li>Acosta De La Luz, L., Rodríguez, F. C., Sánchez, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Instructivo+t%C3%A9cnico+de+Calendula+officinalis%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Cuba+Plantas+Med%22%5BJournal%5D)">Instructivo técnico de Calendula officinalis.</a> Rev Cuba Plantas Med. 6, 23-27 (2001).</li>
<li>Komissarenko, N. Y., Chernobai, V. T., Derkach, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flavonoids+of+inflorescences+of+Calendula+officinalis%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Nat+Compd%22%5BJournal%5D)">Flavonoids of inflorescences of Calendula officinalis.</a> Chem Nat Compd. 24, 675-680 (1988).</li>
<li>Neukirch, H., Ambrosio, M. D., Via, J. D., Guerriero, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+quantitative+determination+of+eight+triterpenoid+monoesters+from+flowers+of+10+varieties+of+Calendula+officinalis+L.+and+characterisation+of+a+new+triterpenoid+monoester%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochem+Anal%22%5BJournal%5D)">Simultaneous quantitative determination of eight triterpenoid monoesters from flowers of 10 varieties of Calendula officinalis L. and characterisation of a new triterpenoid monoester.</a> Phytochem Anal. 15 (1), 30-35 (2004).</li>
<li>Muley, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phytochemical+constituents+and+pharmacological+activities+of+Calendula+officinalis+Linn+%28Asteraceae%29%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Trop+J+Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Phytochemical constituents and pharmacological activities of Calendula officinalis Linn (Asteraceae): a review.</a> Trop J Pharm Res. 8, 455-465 (2009).</li>
<li>Vella, F. M., Pignone, D., Laratta, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Mediterranean+species+Calendula+officinalis+and+Foeniculum+vulgare+as+valuable+source+of+bioactive+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">The Mediterranean species Calendula officinalis and Foeniculum vulgare as valuable source of bioactive compounds.</a> Molecules. 29, 1-23 (2024).</li>
<li>Sapkota, B., Kunwar, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+traditional+uses%2C+phytochemistry+and+pharmacological+activities+of+Calendula+officinalis+Linn%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Prod+Commun%22%5BJournal%5D)">A review on traditional uses, phytochemistry and pharmacological activities of Calendula officinalis Linn.</a> Nat Prod Commun. 19 (6), 1-22 (2024).</li>
<li>Ejiohuo, O., Folami, S., Maigoro, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calendula+in+modern+medicine%3A+advancements+in+wound+healing+and+drug+delivery+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Chem+Rep%22%5BJournal%5D)">Calendula in modern medicine: advancements in wound healing and drug delivery applications.</a> Eur J Med Chem Rep. 12, 100199(2024).</li>
<li>Olennikov, D. N., Kashchenko, N. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+isorhamnetin+glycosides+and+other+phenolic+compounds+from+Calendula+officinalis%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Nat+Compd%22%5BJournal%5D)">New isorhamnetin glycosides and other phenolic compounds from Calendula officinalis.</a> Chem Nat Compd. 49, 833-840 (2013).</li>
<li>Kurkin, V. A., Sharova, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flavonoids+from+Calendula+officinalis+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Nat+Compd%22%5BJournal%5D)">Flavonoids from Calendula officinalis flowers.</a> Chem Nat Compd. 43, 216-217 (2007).</li>
<li>Zhang, T., Elomaa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evolution+of+the+Asteraceae+capitulum%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Development and evolution of the Asteraceae capitulum.</a> New Phytol. 242, 33-48 (2024).</li>
<li>Hunt, R., Causton, D. R., Shipley, B., Askew, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modern+tool+for+classical+plant+growth+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Bot%22%5BJournal%5D)">A modern tool for classical plant growth analysis.</a> Ann Bot. 90, 485-488 (2002).</li>
<li>Chang, C., Yang, M., Wen, H., Chern, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+total+flavonoid+content+in+propolis+by+two+complementary+colorimetric+methods%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Drug+Anal%22%5BJournal%5D)">Estimation of total flavonoid content in propolis by two complementary colorimetric methods.</a> J Food Drug Anal. 10 (3), 3(2002).</li>
<li>Meneses, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizaci%C3%B3n+del+proceso+de+extracci%C3%B3n+de+flavonoides+de+flor+de+manzanilla+%28Matricaria+recutita+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Agrociencia%22%5BJournal%5D)">Optimización del proceso de extracción de flavonoides de flor de manzanilla (Matricaria recutita L).</a> Agrociencia. 42, 425-433 (2008).</li>
<li>Albani, M. C., Coupland, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+flowering+in+annual+and+perennial+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of flowering in annual and perennial plants.</a> Curr Top Dev Biol. 91, 323-348 (2010).</li>
<li>Bernier, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+control+of+floral+evocation+and+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Plant+Physiol+Plant+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The control of floral evocation and morphogenesis.</a> Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol. 39, 175-219 (1988).</li>
<li>Chaves, N., Escudero, J. C. Variation of Flavonoid Synthesis Induced by Ecological Factors. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChaves%2C+N+%22Principles+and+Practices+in+Plant+Ecology%22">Principles and Practices in Plant Ecology</a>. , CRC Press. Boca Raton. (1999).</li>
<li>Treutter, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Significance+of+flavonoids+in+plant+resistance%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Chem+Lett%22%5BJournal%5D)">Significance of flavonoids in plant resistance: a review.</a> Environ Chem Lett. 4, 147-157 (2006).</li>
<li>Vargas, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cin%C3%A9tica+de+acumulaci%C3%B3n+y+distribuci%C3%B3n+de+flavonoides+en+guayaba+%28Psidium+guajava+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Agrociencia%22%5BJournal%5D)">Cinética de acumulación y distribución de flavonoides en guayaba (Psidium guajava L.).</a> Agrociencia. 40, 109-115 (2006).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Zidentyfikowano dwa rodzaje kwiatów, języczkowate i rurkowate (ryc. 5). Odkryliśmy, że kwiaty języczkowate zawierają niższe stężenie flawonoidów niż kwiaty rurkowe, przy różnicach od 11% do 53%. Oznacza to, że kwiaty rurkowe gromadzą więcej flawonoidów niż kwiaty języczkowate, ponieważ kwiaty rurkowe mają więcej biomasy i wyższe stężenie tych związków.
Porównując etapy rozwoju kwiatów, stwierdzono, że stężenie flawonoidów w kwiatach języczkowatych miało tendencję ...

Rosnące zainteresowanie wtórnymi metabolitami z roślin leczniczych wynika z ich różnorodnych zastosowań w przemyśle farmaceutycznym, terapeutycznym, kosmetycznym i innych. Wśród nich jest Calendula officinalis L., jednoroczna roślina zielna z rodziny astrowatych pochodząca z regionu śródziemnomorskiego1, ale szeroko uprawiana na całym świecie, zyskała uznanie ze względu na różne zastosowania swoich kwiatów, w tym ozdobne, lecznicze, przemysłowe i kulinarne2. Obecnie Anglia jest największym na świecie producentem C. officinalis3.  
Główki kwiatów są najczęściej wykorzystywanym organem tej rośliny, ponieważ zawierają związki bioaktywne, takie jak flawonoidy, karotenoidy, terpenoidy, olejki eteryczne, garbniki, kumaryny, węglowodany i kwasy tłuszczowe3,4,5,6. Te naturalne związki przyczyniają się do jego właściwości farmakologicznych, w tym działania przeciwzapalnego, przeciwutleniającego, przeciwbakteryjnego i gojenia ran7. Historycznie rzecz biorąc, C. officinalis, powszechnie znany jako nagietek lekarski, był stosowany w systemach medycyny tradycyjnej, takich jak ajurweda i homeopatia, do łagodzenia szerokiego zakresu dolegliwości, od ran skóry i zaburzeń żołądkowo-jelitowych po nieprawidłowości miesiączkowania i stany zapalne8. Nowoczesne zastosowania obejmują przemysł farmaceutyczny, spożywczy i kosmetyczny, gdzie ekstrakty z nagietka są dodawane do kremów, serum, nalewek i systemów dostarczania leków9. Pomimo szeroko zakrojonych badań, nadal istnieją wyzwania związane z pełnym wykorzystaniem potencjału terapeutycznego C. officinalis. Zmienność stężenia związków bioaktywnych spowodowana czynnikami środowiskowymi i uprawowymi podkreśla potrzebę standaryzacji procesów ekstrakcji i formulacji. Aktywność biologiczna flawonoidów i ich identyfikacja w tkankach roślinnych są istotnymi aspektami kontroli jakości10,11.
W Meksyku uprawa nagietka często odbywa się bez szczegółowego zrozumienia procesów wzrostu i rozwoju kwiatów, co ogranicza jego wydajność fizjologiczną, plon i korelację między związkami bioaktywnymi a czynnikami agronomicznymi. Na stężenie i rozmieszczenie flawonoidów w tkankach roślinnych mają wpływ warunki wzrostu i uprawy, co podkreśla znaczenie badania procesów fizjologicznych i rozwojowych tego gatunku.
To badanie miało na celu analizę rozkładu biomasy i relacji między zlewem a źródłem w organach wegetatywnych i rozrodczych C. officinalis, zidentyfikowanie kluczowych wydarzeń związanych z rozwojem kwiatów oraz ilościowe określenie całkowitego stężenia flawonoidów w główkach kwiatów za pomocą proponowanej tutaj metody mikrospektrofotometrycznej. Odkrycia te mają na celu optymalizację praktyk rolniczych i poprawę jakości produktów pochodzących z tej rośliny.

<table><tbody><tr><td>Piec z obiegiem powietrza</td><td>Precision 17 GCA Corp.</td><td>Nie dotyczy</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Bug clean</td><td>Alternagro</td><td>N/A</td><td>Zwalczanie szkodników rolniczych za pomocą olejów i ekstraktów roślinnych</td></tr><tr><td>Metanol klasy analitycznej</td><td>merck</td><td>822283</td><td>Odczynnik</td></tr><tr><td>Nitrofoska special 12+12+17+2 MgO+8 S</td><td>EUROCHEM</td><td>7/548/CEE,1999/45/CE</td><td>NPK - nawóz granulowany zawiera: saletrę amonową, sole amonowe, fosforany, sole wapnia, potas, w niektórych przypadkach magnez i pierwiastki śladowe. 1H-Pirazol, 3,4-dimetylo-,fosforan (1:1)</td></tr><tr><td>PHC Healthy Start</td><td>PHC Meksyk</td><td>N/A</td><td>PHC Healthy Start 12-16-12 to nawóz poprawiający odżywienie, kolor i wigor roślin.</td></tr><tr><td>Kwercetyna</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>204-187-1</td><td>Substancja wzorcowa</td></tr></tbody></table>

zawartość flawonoidów podczas wzrostu i rozwoju kwiatowego nagietka lekarskiego (calendula officinalis l.)

Flavonoid Content During the Growth and Floral Development of Calendula officinalis L.

Nagietek lekarski (Calendula officinalis L.) o wielorakich zastosowaniach, szczególnie w zastosowaniach leczniczych ze względu na bogactwo i różnorodność metabolitów wtórnych, takich jak flawonoidy, które mają właściwości przeciwzapalne i przeciwutleniające. W badaniu tym przeanalizowano wzrost roślin i rozmieszczenie biomasy, a także całkowite stężenie flawonoidów w kwiatach rurkowych, języczkowatych i główkach kwiatowych podczas całego rozwoju kwiatu. Inicjacja i różnicowanie kwiatów nastąpiło pięć tygodni po przesadzeniu, zgodnie z esowatym wzorcem akumulacji biomasy w organach, a także na wysokości rośliny. Organy powietrzne osiągnęły maksymalną biomasę 76 g/g/roślinę w 69 dniu. Maksymalna bezwzględna szybkość wzrostu wynosiła 2,38 g/dobę po 62 dniach, natomiast najwyższą względną szybkość wzrostu odnotowano w narządach rozrodczych w 48. dniu (0,137 g/g/dobę). Flawonoidy, wyrażone jako ekwiwalenty kwercetyny, wykazywały wyższe stężenia w fazach od pąków kwiatowych do w pełni otwartych główek kwiatowych (145-177 mg/g s.m.). Odkrycia te podkreślają znaczenie zbioru na optymalnych etapach, aby zmaksymalizować zawartość flawonoidów i wykorzystać ich potencjał do zastosowań terapeutycznych i komercyjnych.

Wzrost C. officinalis charakteryzował się sigmoidalną kinetyką akumulacji biomasy w całej roślinie oraz w jej organach. Obserwacja ta jest zgodna z doniesieniami innych autorów, w których konsekwentnie wykazano sigmoidalną krzywą wzrostu. Wśród organów nadziemnych najwięcej biomasy zgromadziły łodygi (Rysunek 3). Początkowy wzrost wszystkich organów nadziemnych był powolny, a kwitnienie i rozwój pąków rozpoczęły się w 41. dniu. Roślina osiągnęła maksymalną suchą biomasę w 69. dniu, ...

Tutaj prezentujemy metodę kolorymetryczną chlorku glinu, bezpośrednią technikę analityczną do ilościowego oznaczania flawonoidów w nagietku. Podejście to wykorzystuje prostą reakcję chemiczną polegającą na traktowaniu ekstraktu z nagietka odczynnikiem chlorku glinu, tworząc kolorowy kompleks. Intensywność koloru, oceniana za pomocą spektrofotometrii, koreluje ze stężeniem flawonoidów.

Zawartość flawonoidów podczas wzrostu i rozwoju kwiatowego nagietka lekarskiego (Calendula officinalis L.)

Pot marigold (Calendula officinalis L.) with multiple uses, notably its medicinal applications due to its richness and diversity in secondary metabolites, ...

W naszym badaniu wykorzystano dostępną i wiarygodną metodę kolorymetryczną do ilościowego oznaczania całkowitej flawonoidów, ułatwiając analizę danych w laboratoriach fitochemicznych i wspierając badania nad związkami o właściwościach terapeutycznych.Zawartość flawonoidów w nagietku jest badana podczas rozwoju kwiatów w celu określenia optymalnego czasu zbioru i maksymalizacji jego potencjału leczniczego i komercyjnego.Nasz protokół jest czułą i wydajną mikrotechniką, która umożliwia ilościowe oznaczanie flawonoidów przy użyciu małych ilości próbek, optymalizację użycia rozpuszczalników, a analiza materiału roślinnego jest ograniczona.[Instruktor] Na początek susz materiał roślinny w piekarniku z wymuszonym obiegiem powietrza w temperaturze 40 stopni Celsjusza przez 48 godzin. Po wyschnięciu wyjmij go z piekarnika, przenieś wysuszony materiał do papierowych kopert i przechowuj w ciemności w temperaturze pokojowej. Zamroź materiał roślinny za pomocą ciekłego azotu, aby przygotować się do mielenia. Następnie zamrożony materiał należy zmielić w moździerzu porcelanowym, aż uzyska jednolitą konsystencję. Przygotować próbki, ważąc 25 miligramów sproszkowanego materiału z każdej próbki. Do zważonego materiału dodać 500 mikrolitrów 80% metanolu. Aby wyekstrahować flawonoidy, inkubuj mieszaninę w temperaturze 70 stopni Celsjusza przez godzinę. Po inkubacji odwirować mieszaninę o stężeniu 731 g przez 13 minut. Teraz przygotuj podwielokrotności, biorąc 150 mikrolitrów otrzymanego ekstraktu i dodając do niego 37 mikrolitrów 80% metanolu. Weź 50 mikrolitrów ekstraktu i dodaj 100 mikrolitrów jednego molowego octanu potasu i 100 mikrolitrów 10% chlorku glinu. Uzupełnij roztwór, zwiększając całkowitą objętość mieszaniny do pięciu mililitrów za pomocą wody destylowanej. Ustaw długość fali absorbancji spektrofotometru na 415 nanometrów i zmierz absorbancję roztworu. Wygeneruj krzywą kalibracyjną, przygotowując roztwory kwercetyny w zakresie od 50, 100, 175 i 350 miligramów na mililitr. Aby przygotować próbki kalibracyjne, należy odpipetować 500 mikrolitrów roztworu kwercetyny z ostatniego punktu krzywej kalibracyjnej i dodać do roztworu 100 mikrolitrów 10% chlorku glinu i 100 mikrolitrów jednego molowego octanu potasu. Następnie dodaj 1,5 mililitra 80% metanolu i 2,8 mililitra wody destylowanej. Pozostaw roztwory kalibracyjne na 40 minut w temperaturze pokojowej. Ustaw długość fali absorbancji spektrofotometru na 415 nanometrów i zmierz absorbancję próbek kalibracyjnych, aby skonstruować krzywą kalibracyjną. Na koniec należy obliczyć stężenie flawonoidów i zawartość flawonoidów na gram suchej masy. Poniższa tabela podsumowuje, w jaki sposób stężenie flawonoidów i produkcja flawonoidów na roślinę różnią się od początkowego tworzenia pąków do pełnego kwitnienia i rozwoju owoców w główkach kwiatowych nagietka. Wyższe poziomy całkowitego stężenia flawonoidów zaobserwowano między stadiami ósmym i jedenastym, co odpowiada pąkom z oddzielonymi działkami kielicha do w pełni otwartych główek kwiatowych. We wcześniejszych stadiach, takich jak pąki ze zjednoczonymi działkami, oraz w późniejszych stadiach, takich jak starzejące się główki kwiatowe, stężenia flawonoidów były o 22% do 27% niższe w porównaniu z w pełni otwartymi główkami kwiatowymi. Rysunek ten przedstawia pomiar całkowitego stężenia flawonoidów w suchej masie główek kwiatowych nagietka, kwiatów języczkowatych i kwiatów rurkowych na różnych etapach rozwoju kwiatowego. Wyniki sugerują, że zrozumienie zmienności stężenia flawonoidów między różnymi strukturami i etapami kwiatowymi jest przydatne do określenia optymalnego czasu zbiorów, aby zmaksymalizować zawartość flawonoidów w główkach kwiatowych nagietka.

flavonoid-content-during-growth-floral-development-calendula

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Problemy w przetwarzaniu próbek biologicznych do obserwacji skaningowej mikroskopii elektronowej obejmują zapadanie się komórek, traktowanie próbek z wilgotnych mikrośrodowisk i niszczenie komórek. Niedrogie i stosunkowo szybkie protokoły odpowiednie do przygotowania trudnych próbek, takich jak merystemy kwiatowe, cysty lęgniowców i grzyby (Agaricales) są kompilowane i szczegółowo opisywane tutaj.

Protokoły skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM) dla problematycznych próbek roślin, lęgniowców i grzybów

Tutaj opisane są testy biologiczne przeznaczone do monitorowania rozwoju patogenu grzybowego, Colletotrichum fioriniae, w obecności ekstraktów z kwiatów borówki lub żurawiny na szklanych szkiełkach nakrywkowych. Techniki ekstrakcji kwiatów na bazie wody, chloroformu i wody deszczowej są szczegółowe, a także wgląd w to, jak można zastosować te informacje.

Colletotrichum fioriniae Rozwój ekstraktów z kwiatów borówki i żurawiny na bazie wody i chloroformu

Pochodzenie flawonolu jest kluczowe dla jego zastosowania w opiece zdrowotnej i przemyśle spożywczym. W tym miejscu przedstawiamy szczegółowy protokół biosyntezy flawonolu z flawanonu i omawiamy kluczowe etapy i jego zalety w porównaniu z innymi podejściami.

Biosynteza flawonolu z flawanonu poprzez utworzenie jednodoniczkowej kaskady bienzymatycznej

Prezentowany tutaj jest protokół do terenowej identyfikacji Matricaria chamomilla za pomocą przenośnego systemu qPCR. Ten łatwy do wykonania protokół jest idealny jako metoda potwierdzania tożsamości gatunku botanicznego w miejscach, w których dostęp do sprzętu laboratoryjnego i wiedzy specjalistycznej jest ograniczony, takich jak gospodarstwa rolne i magazyny.

Identyfikacja terenowa Matricaria chamomilla za pomocą przenośnego systemu qPCR

Kwasy fenolowe są ważnymi substancjami fitochemicznymi, które są obecne w pełnych ziarnach. Posiadają właściwości bioaktywne, takie jak przeciwutleniające funkcje ochronne. Prace te miały na celu przedstawienie informacji na temat uogólnionej metody identyfikacji HPLC, szacowania całkowitej zawartości fenoli oraz oznaczania zdolności przeciwutleniającej kwasów fenolowych w zbożach i roślinach strączkowych.

Uogólniona metoda oznaczania składu swobodnie rozpuszczalnych kwasów fenolowych i zdolności przeciwutleniających zbóż i roślin strączkowych

Celem tego protokołu jest wykrywanie metabolitów fenolowych w osoczu za pomocą metody częściowo ukierunkowanej chromatografii i spektrometrii mas.

Częściowo ukierunkowana ultrawysokosprawna chromatografia sprzężona ze spektrometrią mas Analiza metabolitów fenolowych w osoczu osób w podeszłym wieku

Ten protokół szczegółowo opisuje wykorzystanie metody ekstrakcji mikrofalowej na bazie poliolu do ekstrakcji związków fenolowych i naturalnych przeciwutleniaczy, reprezentując praktyczne i przyjazne dla środowiska podejście do rozwoju gotowych do użycia ekstraktów.

Ekstrakcja mikrofalowa związków fenolowych i przeciwutleniaczy do zastosowań kosmetycznych z wykorzystaniem technologii poliolowej

Tutaj opisane są procedury chemicznego osadzania perfluoroalkanów metodą plazmy na mikroporowatych materiałach, takich jak struktury metaloorganiczne, w celu zwiększenia ich stabilności i hydrofobowości. Ponadto szczegółowo opisano przełomowe badania miligramowych ilości próbek.

Otrzymywanie hydrofobowych struktur metaloorganicznych poprzez chemiczne osadzanie perfluoroalkanów z fazy gazowej wspomagane plazmą w celu usunięcia amoniaku

Ciąża prowadzi do znaczących zmian w składzie kwasów tłuszczowych w tkankach matki. Profile lipidowe można uzyskać za pomocą chromatografii gazowej, aby umożliwić identyfikację i ilościowe określenie kwasów tłuszczowych w poszczególnych klasach lipidów wśród szczurów karmionych różnymi dietami wysoko- i niskotłuszczowymi w czasie ciąży.

Zastosowanie chromatografii gazowej do analizy zmian składu kwasów tłuszczowych w tkance wątroby szczura w czasie ciąży

Tutaj prezentujemy protokół syntezy dwóch karbonylowych karbonylowych karbonylu. Protokół sprawia, że te interesujące związki są łatwo dostępne dla chemików na wszystkich poziomach umiejętności. Oprócz syntezy tych dwóch karbenów opisano również ich zastosowanie w aktywacji białego fosforu.

Otrzymywanie i stosowanie karbenowych karbonylowych karbonylowych w aktywacji białego fosforu

Poznaj metodę kolorymetryczną do ilościowego oznaczania flawonoidów w nagietku lekarskim Calendula officinalis. Technika ta pozwala określić optymalny czas zbioru rośliny w celu maksymalizacji jej potencjału leczniczego i handlowego.

Zawartość flawonoidów podczas wzrostu i rozwoju kwiatowego nagietka lekarskiego (Calendula officinalis L.)

Przeglądaj więcej filmów