Farmakologia sieciowa i walidacja mechanizmów przeciwdepresyjnych Qiangzhifang w modelu szczura depresji wywołanej przewlekłym stresem

Badania te mają na celu zbadanie, w jaki sposób Qiangzhifang działa przeciwko depresji, zidentyfikowanie kluczowych składników aktywnych i zrozumienie ich mechanizmów działania. Badanie to wypełnia lukę w zrozumieniu specyficznych mechanizmów i aktywnych składników Qiangzhifang w śledzeniu depresji.

Będziemy badać, jak Qiangzhifang wpływa na układ odpornościowy, aby znaleźć depresję i zbadać jego potencjalne nowe zastosowania terapeutyczne.

[Narrator] Aby rozpocząć, zbuduj urządzenie przytrzymujące szczury, wybierając przezroczystą plastikową rurkę o średnicy i długości odpowiedniej do wielkości szczura, pozwalając szczurowi stać i obracać się do środka, jednocześnie uniemożliwiając ucieczkę. Za pomocą elektrycznego dziurkacza do lutownicy wykonaj otwory po bokach plastikowej rurki i na pokrywie, aby zapewnić odpowiednią cyrkulację powietrza. Podziel szczury na cztery grupy, upewniając się, że każda grupa składa się z 10 szczurów. Godzinę po codziennym podawaniu leku do żołądka, delikatnie umieść szczury w urządzeniach przytrzymujących, z wyłączeniem tych z grupy kontrolnej, i upewnij się, że są w wygodnej pozycji. Podawać fluoksetynę w dawce 2,7 miligrama na kilogram dziennie grupie fluoksetyny i Qiangzhifang w dawce dwóch gramów na kilogram dziennie grupie Qiangzhifang przez zgłębnik, stosując objętość dawki 1 mililitr na 100 gramów masy ciała dla obu roztworów. Napełnij butelki do picia zwierząt doświadczalnych czystą wodą lub 1% wodnym roztworem sacharozy. Umieść każdy roztwór w osobnej butelce, a następnie zważ butelki. Umieść jedną butelkę roztworu sacharozy i jedną butelkę czystej wody w każdym klatku dla szczurów. Jeden po lewej i jeden po prawej dla swobodnego dostępu do picia. Po 30 minutach zamień pozycje butelek, aby uniknąć preferencji bocznych. Po godzinie wyjmij wszystkie butelki z wodą. Zważ je niezwłocznie, aby zmierzyć wartości zużycia dla obu roztworów. Następnie oblicz tygodniowy stosunek preferencji sacharozy, korzystając z podanego równania. Waż szczury co tydzień o ustalonej porze siódmej rano. Do monitorowania zmian masy ciała. Dostosuj oświetlenie w otwartym polu, aby uzyskać równomierne rozprowadzenie i wyraźną widoczność szczurów w oprogramowaniu śledzącym. Użyj systemu śledzenia i analizy wideo, aby podzielić dolną powierzchnię otwartego pola na dziewięć równych kwadratowych siatek z ośmioma siatkami przylegającymi do ścian jako obszar obwodowy i środkiem jako obszar centralny. Umieść szczura w środkowej części otwartego pudełka polowego i rejestruj jego ruch przez pięć minut za pomocą systemu śledzenia. Po przetestowaniu każdego szczura wyczyść otwartą komorę polową 75% etanolem, aby usunąć resztki zapachu i zapobiec ingerencji w zachowanie następnego szczura. Wprowadź łączną odległość działań w terenie otwartym i liczbę wpisów w siatce centralnej w rekordach testów na otwartym polu. Weź przezroczysty cylinder na wodę z pleksi i napełnij go wodą o temperaturze od 23 do 25 stopni Celsjusza. Dostosuj głębokość wody do wagi zwierzęcia, upewniając się, że ogon szczura pozostaje w pewnej odległości nad dnem. Po aktywowaniu kamery i systemu akwizycji sygnału, powoli umieść szczury w cylindrze z wodą, zachowując ciszę przez cały czas trwania eksperymentu. Obserwuj i rejestruj czas trwania unoszenia się w powietrzu w ciągu 300 sekund. Pod koniec sesji natychmiast wyjmij szczury z wody i wysusz je. Po każdej sesji wymień wodę w cylindrze, aby zapobiec wpływowi na następnego szczura. Access, baza danych tradycyjnej farmakologii systemów medycyny chińskiej lub TCMSP, baza danych ziół i baza danych TCMID. Użyj nazw ośmiu tradycyjnych chińskich leków w Qiangzhifang jako słów kluczowych do wyszukiwania związków aktywnych i celów ziół. Zbieraj informacje o celach z TCMSP i szwajcarskiej bazy danych przewidywania celów. Ustawienie wartości filtru na prawdopodobieństwo większe od zera. Teraz przejdź do bazy danych GeneCards i wyszukaj słowo kluczowe depresja. Po uzyskaniu docelowych genów związanych z depresją pobierz elektroniczny arkusz kalkulacyjny, odfiltruj wyniki genów, które są wyższe niż średnia, i sporządź listę celów związanych z depresją. Teraz uzyskaj dostęp do narzędzia gen i prześlij złożone cele, a następnie pliki docelowe choroby. Wykreśl nakładające się geny między przypuszczalnymi celami związku a celami choroby. Następnie pobierz obraz diagramu. Na koniec uzyskaj dostęp do bazy danych ciągów i wklej nakładające się geny, w szczególności nakładającą się listę celów przeciwdepresyjnych Qiangzhifang do okna dialogowego listy nazw. Wybierz homo sapiens w sekcji organizmów i kliknij Szukaj, a następnie Kontynuuj. Wybierz opcję eksportu z paska tytułu i pobierz tabelę podsumowującą sieć interakcji białko-białko w formatach PNG i TSV. W teście preferencji sacharozy po 28 dniach, grupa stresu przewlekłego ograniczenia miała znacznie niższą preferencję sacharozy niż grupa kontrolna. Podczas gdy zarówno grupy leczone Qiangzhifang, jak i fluoksetyną wykazały znacznie wyższe wartości w porównaniu z grupą stresującą. Przyrost masy ciała był znacznie zmniejszony w grupie przewlekłego stresu związanego z ograniczeniami w porównaniu z grupą kontrolną po 28 dniach, ale znacznie wzrósł w grupie Qiangzhifang i fluoksetyny w porównaniu z grupą stresu. Wykresy ruchu w terenie otwartym wykazały zmniejszoną eksplorację obszaru centralnego w grupie stresu. Podczas gdy obie grupy leczone wykazywały widocznie większą aktywność centralną. Łączny dystans przebyty w teście w terenie otwartym nie wykazał istotnych różnic między wszystkimi grupami. Czas przebywania w obszarze centralnym został również znacznie skrócony w grupie stresu i znacznie wydłużony w obu grupach leczenia. Co więcej, czas bezruchu w teście wymuszonego pływania był dłuższy w grupie stresu i znacznie skrócony przy obu zabiegach.