Name: Mysi model rozwarstwienia aorty piersiowej wywołanego doustną infuzją β-aminopropionitrylu i podskórnej angiotensyny II (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-16T14:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Poznaj metodę indukcji rozwarstwienia aorty piersiowej u myszy za pomocą β-aminopropionitrylu i angiotensyny II. Ten protokół umożliwia precyzyjne badanie mechanizmów choroby i testowanie terapii.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Prace te były wspierane przez grant z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (82370299) oraz Projekt Budowlany Kluczowej Dyscypliny Medycznej (Specjalizacji) w Tianjin (TJYXZDXK-060B).

Protokoły na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Ich Użytkowania Uniwersytetu Medycznego w Tiencinie (numer zatwierdzenia TMUaMEC 2022036). W badaniu wykorzystano trzytygodniowe samce myszy C57BL/6J. Szczegółowe informacje na temat stosowanych odczynników i sprzętu są wymienione w Tabeli materiałów.
1. Utrzymanie i grupowanie zwierząt
<ol>
	<li>Wychowuj myszy na standardowej karmie konserwacyjnej. Do tego badania wykorzystano trzytygodniowe myszy.</li>
	<li>Losowo przypisz myszy do grupy kontrolnej (kontrola), grupy doustnej BAPN (BAPN), grupy doustnego BAPN i grupy infuzji soli fizjologicznej (BAPN + sól fizjologiczna) oraz grupy doustnej BAPN i grupy infuzji Ang II (BAPN + Ang II) (Figura 1). Zapewnij myszom z grupy kontrolnej normalną wodę pitną.</li>
	<li>Podawaj myszom z grupy BAPN wodę pitną uzupełnioną BAPN w dawce 1 mg/g/dobę przez 4 tygodnie. Podawać myszom w grupie BAPN + Ang II Ang II (1 ng/g/min), a myszom w grupie BAPN + sól fizjologiczna równoważną ilość soli fizjologicznej przez 24 godziny po 4 tygodniach doustnego podawania BAPN.</li>
</ol>
2. Przygotowanie do wody pitnej z dodatkiem BAPN
<ol>
	<li>Zapewnij myszom wodę pitną uzupełnioną BAPN przez 4 kolejne tygodnie po 3 dniach karmienia adaptacyjnego, ustawiając 1 dzień jako cykl indukcyjny.</li>
	<li>Zważ myszy w każdej klatce, aby obliczyć ilość BAPN wymaganą w wodzie pitnej.</li>
	<li>Zapisz objętość wody (vol) w każdej klatce w ciągu ostatniego dnia.</li>
	<li>Aby zapewnić odpowiednie spożycie wody, należy użyć 1,3-krotności dziennej objętości wody (1,3 x obj.) jako ilości wody w cyklu indukcyjnym. W związku z tym rozpuść 1,3-krotność wymaganej masy BAPN w obliczonej objętości wody pitnej. Szczegółową metodę obliczeń oraz przykład przedstawiono w tabeli 1. UWAGA: Myszy w tym wieku są nadal w okresie szybkiego wzrostu. Zaleca się, aby objętość wody pobieranej przez myszy była rejestrowana codziennie przez cały okres indukcji modelu oraz aby woda pitna uzupełniona BAPN w klatce była wymieniana codziennie. Aby zapobiec rozkładowi BAPN, zawiń butelkę w folię aluminiową, aby chronić ją przed światłem.</li>
</ol>
3. Obliczanie masy Ang II
<ol>
	<li>Zważ każdą mysz i oblicz masę Ang II wymaganą do eksperymentu w oparciu o maksymalną masę ciała.</li>
	<li>Użyj szablonu obliczeniowego (Tabela 2), aby obliczyć masę Ang II potrzebną do przeprowadzenia eksperymentu.</li>
	<li>Obliczyć masę Ang II potrzebną na 130 μl roztworu Ang II na mysz, ponieważ każda pompa wymaga około 100 μL.</li>
	<li>Użyj szablonu obliczeniowego (Tabela 3), aby obliczyć objętość napełnienia roztworem Ang II i soli fizjologicznej potrzebną do eksperymentu.</li>
</ol>
4. Rozwiązanie Ang II
<ol>
	<li>Przechowywać liofilizowany proszek Ang II w szczelnie zamkniętej fiolce w temperaturze -80 °C. Aby zapobiec kondensacji wilgoci, pozwól Ang II zrównoważyć się do temperatury pokojowej, a następnie odwiruj go przed otwarciem.</li>
	<li>Zważyć obliczoną ilość Ang II w sterylnej mikroprobówce za pomocą wagi analitycznej.</li>
	<li>Dodaj obliczoną objętość soli fizjologicznej do mikroprobówki zawierającej liofilizowany Ang II i dokładnie wiruj, aż do całkowitego rozpuszczenia.</li>
	<li>Przygotuj wymagany roztwór Ang II osobno dla każdej myszy na czystej ławce w oparciu o masę ciała. Odwróć mikroprobówkę do góry nogami, aby upewnić się, że roztwór jest dobrze wymieszany.</li>
</ol>
5. Napełnianie pompy osmotycznej
<ol>
	<li>Weź dwie części pompy osmotycznej z opakowania i przygotuj pompę za pomocą sterylnych narzędzi, aby uniknąć ryzyka infekcji.</li>
	<li>Zważ każdą pompę, łącznie z korpusem pompy i moderatorem przepływu, za pomocą wagi analitycznej. Zapisz dane i wykorzystaj je do obliczenia współczynnika napełnienia.</li>
	<li>Podłączyć probówkę do napełniania do świeżo otwartej sterylnej strzykawki o pojemności 1 ml i ostrożnie odessać przygotowany roztwór Ang II opisany powyżej, uważając, aby nie zassać pęcherzyków powietrza.</li>
	<li>Trzymać rurkę do napełniania w pozycji do góry i ostrożnie usunąć wszelkie pęcherzyki powietrza ze strzykawki. Utrzymuj tę pozycję, aby zapobiec przedostawaniu się pęcherzyków powietrza do rurki napełniającej.</li>
	<li>Delikatnie włóż koniec rurki napełniającej do otworu w górnej części pompy osmotycznej, aż nie będzie można jej dalej włożyć.</li>
	<li>Trzymać pompę osmotyczną w pozycji pionowej i powoli ściskać tłok strzykawki. Gdy roztwór Ang II pojawi się na wylocie, natychmiast zatrzymaj się i ostrożnie wyjmij rurkę do napełniania.</li>
	<li>Ostrożnie i powoli włóż moderator przepływu do otworu pompy osmotycznej, aż nie będzie widoczna szczelina między moderatorem przepływu a górną częścią pompy. Zetrzyj nadmiar roztworu Ang II sterylnym papierem absorpcyjnym.</li>
	<li>Zważyć załadowaną pompę na wadze analitycznej i zanotować to. Różnica w masie pompy przed i po infuzji to masa załadowanego roztworu Ang II.</li>
	<li>Oblicz szybkość napełniania, korzystając z następującego wzoru: Szybkość napełniania = (masa napełnionej pompy - masa pustej pompy) / (objętość standardowa) x 100% UWAGA: Objętość napełnienia powinna być większa niż 90% standardowej objętości wskazanej w instrukcji obsługi. Jeśli tak, wypełnienie zakończyło się pomyślnie. Jeśli nie, pompę należy opróżnić i ponownie napełnić.</li>
	<li>Umieścić napełnione pompy w sterylnym roztworze soli fizjologicznej w temperaturze 37 °C z głowicą moderatora skierowaną do góry na co najmniej 6 godzin, aż do implantacji.</li>
</ol>
6. Zabieg chirurgiczny implantacji pompy
<ol>
	<li>Wszystkie narzędzia chirurgiczne, w tym nożyczki, hemostatyki, pęsety, kleszczyki igłowe i igły do szwów, należy sterylizować w autoklawie na 24 godziny przed implantacją pompy.</li>
	<li>Karprofen w tabletkach (5 mg/kg mc., doustnie) należy podawać na 2-4 godziny przed zabiegiem. Umieść mysz w anestezjologicznej komorze indukcyjnej z 1,5%-2% izofluranem o natężeniu przepływu 2 l/min i ustabilizuj mysz na 2 minuty. Ogol włosy myszy na obszarze około 2 cm × 1 cm na skórze środkowej części łopatki. UWAGA: Ponieważ reakcja myszy na izofluran jest zmienna, może być konieczne dostosowanie stężenia w celu utrzymania stabilnego znieczulenia.</li>
	<li>Umieść mysz w pozycji leżącej z nosem w stożku nosowym podłączonym do urządzenia do znieczulania izofluranem. Nałóż maść weterynaryjną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Upewnij się, że mysz nie reaguje na bolesne bodźce przed i w trakcie implantacji pompy.</li>
	<li>Zdezynfekuj skórę grzbietową trzykrotnie jodoforem medycznym.</li>
	<li>Ostrożnie wykonaj poprzeczne nacięcie około 1 cm na skórze za pomocą skalpela.</li>
	<li>Delikatnie chwyć brzeg sieczny zakrzywionymi kleszczami i tępo wypreparuj tkankę podskórną kolejną parą zakrzywionych kleszczy, aby utworzyć kieszeń na pompę. Upewnij się, że kieszeń jest wystarczająco duża, aby pompa mogła się swobodnie poruszać.</li>
	<li>Włóż napełnioną pompkę do kieszeni podskórnej z głowicą moderatora przepływu umieszczoną w kierunku ogonowego końca myszy. Pozostaw wystarczająco dużo miejsca, aby zamknąć nacięcie i uniknąć nadmiernego rozciągania skóry.</li>
	<li>Po wszczepieniu pompy starannie wyrównaj brzeg sieczny i zamknij skórę niewchłanialnymi szwami 6-0. UWAGA: Dokładnie sprawdź miejsce nacięcia, aby upewnić się, że rana jest całkowicie zamknięta i że pompa nie naciska bezpośrednio na nacięcie.</li>
	<li>Ponownie oczyść nacięcie jodoforem i nałóż miejscowo 5% żel znieczulający z lidokainą za pomocą sterylnego bawełnianego wacika. Wyłączyć izofluran (0%).</li>
</ol>
7. Pooperacyjna opieka nad zwierzętami
<ol>
	<li>Uważnie monitoruj myszy po implantacji pompy i umieść je w klatce regeneracyjnej wraz z podgrzewanym kocem elektrycznym.</li>
	<li>Pozwól myszom dojść do siebie samodzielnie w ciepłej klatce przez co najmniej 20 minut, aż się obudzą, a następnie wróć do pierwotnej klatki.</li>
	<li>Obserwuj myszy co godzinę przez pierwsze 6 godzin po zabiegu. Przez następne 18 godzin obserwuj myszy w odstępach 6-godzinnych. W razie potrzeby podawaj pooperacyjne środki przeciwbólowe i natychmiast pobieraj próbki, jeśli myszy są w stanie agonalnym lub umierają podczas podawania Ang II.</li>
</ol>
8. Pobieranie, naprawianie, czyszczenie i obrazowanie aort
<ol>
	<li>Znieczulij myszy ze wszystkich grup eksperymentalnych izofluranem, a następnie uśmierc je przez zwichnięcie szyjki macicy pod koniec badania.</li>
	<li>Umieść myszy w pozycji leżącej na plecach i zabezpiecz je na talerzu myszy. Wykonaj nacięcie w dolnej części brzucha i rozciągnij je w poprzek ściany klatki piersiowej, aż klatka piersiowa i jama brzuszna zostaną całkowicie odsłonięte.<ol>
		<li>Natychmiast wykonaj małe nacięcie w prawym przedsionku, włóż sterylną strzykawkę do lewej komory i powoli wstrzyknij około 10 ml lodowatej soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS) przez lewą komorę, aż płuca i wątroba staną się białe.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Następnie wykonaj resekcję płuc, wątroby, śledziony i jelit. Całkowicie odsłoń całą aortę i zmierz maksymalną średnicę aorty piersiowej za pomocą suwmiarki cyfrowej. Wypreparuj aortę z serca i przetnij wszystkie gałęzie tętnicze i wspólne tętnice biodrowe, aby pobrać całą aortę.</li>
	<li>Zobrazuj aortę za pomocą aparatu cyfrowego, zachowaj ją w 4% paraformaldehydzie przez 24-48 godzin i zanurz w parafinie w celu cięcia. UWAGA: Uważaj, aby uniknąć uszkodzenia przewodu pokarmowego, ponieważ może to zakłócać analizę tkanek.</li>
	<li>Wyciąć skrawki parafiny aortalnej o grubości 3-5 μm za pomocą mikrotomu, a następnie wykonać odparafinowanie i nawodnienie. Wybarwić skrawki hematoksyliną i eozyną (H&E) oraz Elastic-Van Gieson (EVG) przy użyciu odpowiednich zestawów do barwienia zgodnie z instrukcjami producenta.</li>
</ol>

<ol><li>Erbel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2014+ESC+guidelines+on+the+diagnosis+and+treatment+of+aortic+diseases%3ADocument+covering+acute+and+chronic+aortic+diseases+of+the+thoracic+and+abdominal+aorta+of+the+adult%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">2014 ESC guidelines on the diagnosis and treatment of aortic diseases:Document covering acute and chronic aortic diseases of the thoracic and abdominal aorta of the adult.</a> Eur Heart J. 35 (41), 2873-2926 (2014).</li>
<li>Bossone, E., Eagle, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+management+of+aortic+disease%3A+Aortic+aneurysms+and+acute+aortic+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and management of aortic disease: Aortic aneurysms and acute aortic syndromes.</a> Nat Rev Cardiol. 18 (5), 331-348 (2021).</li>
<li>Carrel, T., Sundt, T. M., Von Kodolitsch, Y., Czerny, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Acute aortic dissection.</a> Lancet. 401 (10378), 773-788 (2023).</li>
<li>Goldfinger, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> J Am Coll Cardiol. 64 (16), 1725-1739 (2014).</li>
<li>Zhou, Z., Cecchi, A. C., Prakash, S. K., Milewicz, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+thoracic+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Risk factors for thoracic aortic dissection.</a> Genes. 13 (10), 1814(2022).</li>
<li>Saraff, K., Babamusta, F., Cassis, L. A., Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+dissection+precedes+formation+of+aneurysms+and+atherosclerosis+in+angiotensin+II-infused%2C+apolipoprotein+E-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler.+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Aortic dissection precedes formation of aneurysms and atherosclerosis in angiotensin II-infused, apolipoprotein E-deficient mice.</a> Arterioscler. Thromb Vasc Biol. 23 (9), 1621-1626 (2003).</li>
<li>Hameed, I., Cifu, A. S., Vallabhajosyula, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+thoracic+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Management of thoracic aortic dissection.</a> JAMA. 329 (9), 756-757 (2023).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+RNA+sequencing+identifies+an+IL1RN%28%2B%29%2FTREM1%28%2B%29+macrophage+subpopulation+as+a+cellular+target+for+mitigating+the+progression+of+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discov%22%5BJournal%5D)">Single-cell RNA sequencing identifies an IL1RN(+)/TREM1(+) macrophage subpopulation as a cellular target for mitigating the progression of thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> Cell Discov. 8 (1), 11(2022).</li>
<li>Kanematsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologically+induced+thoracic+and+abdominal+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Pharmacologically induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice.</a> Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).</li>
<li>Zheng, H. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+thoracic+aortic+dissection%3A+A+mini-review+of+%CE%B2-aminopropionitrile-related+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Zhejiang+Univ+Sci+B%22%5BJournal%5D)">Induction of thoracic aortic dissection: A mini-review of β-aminopropionitrile-related mouse models.</a> J Zhejiang Univ Sci B. 21 (8), 603-610 (2020).</li>
<li>Hatipoglu, O. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficiency+of+CD44+prevents+thoracic+aortic+dissection+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Deficiency of CD44 prevents thoracic aortic dissection in a murine model.</a> Sci Rep. 10 (1), 6869(2020).</li>
<li>Ren, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-aminopropionitrile+monofumarate+induces+thoracic+aortic+dissection+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">β-aminopropionitrile monofumarate induces thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice.</a> Sci Rep. 6, 28149(2016).</li>
<li>Wawzonek, S., Ponseti, I. V., Shepard, R. S., Wiedenmann, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epiphyseal+plate+lesions%2C+degenerative+arthritis%2C+and+dissecting+aneurysm+of+the+aorta+produced+by+aminonitriles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Epiphyseal plate lesions, degenerative arthritis, and dissecting aneurysm of the aorta produced by aminonitriles.</a> Science. 121 (3133), 63-65 (1955).</li>
<li>Fyfe, F. W., Gillman, T., Oneson, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+combined+quantitative+chemical%2C+light%2C+and+electron+microscope+study+of+aortic+development+in+normal+and+nitrile-treated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">A combined quantitative chemical, light, and electron microscope study of aortic development in normal and nitrile-treated mice.</a> Ann N Y Acad Sci. 149 (2), 591-627 (1968).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((S-nitrosylation+of+septin2+exacerbates+aortic+aneurysm+and+dissection+by+coupling+the+TIAM1-RAC1+axis+in+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">S-nitrosylation of septin2 exacerbates aortic aneurysm and dissection by coupling the TIAM1-RAC1 axis in macrophages.</a> Circulation. 149 (24), 1903-1920 (2024).</li>
<li>Pan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Legumain+is+an+endogenous+modulator+of+integrin+%CE%B1v%CE%B23+triggering+vascular+degeneration%2C+dissection%2C+and+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Legumain is an endogenous modulator of integrin αvβ3 triggering vascular degeneration, dissection, and rupture.</a> Circulation. 145 (9), 659-674 (2022).</li>
<li>Groth, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+events+in+a+nationwide+Marfan+syndrome+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Res+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Aortic events in a nationwide Marfan syndrome cohort.</a> Clin Res Cardiol. 106 (2), 105-112 (2017).</li>
<li>Eagleton, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+complications+of+vascular+Ehlers-Danlos+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Arterial complications of vascular Ehlers-Danlos syndrome.</a> J Vasc Surg. 64 (6), 1869-1880 (2016).</li>
<li>Sawada, H., Beckner, Z. A., Ito, S., Daugherty, A., Lu, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-aminopropionitrile-induced+aortic+aneurysm+and+dissection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22JVS+Vasc+Sci%22%5BJournal%5D)">β-aminopropionitrile-induced aortic aneurysm and dissection in mice.</a> JVS Vasc Sci. 3, 64-72 (2022).</li>
<li>Franklin, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-aminopropionitrile+induces+distinct+pathologies+in+the+ascending+and+descending+thoracic+aortic+regions+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">β-aminopropionitrile induces distinct pathologies in the ascending and descending thoracic aortic regions of mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 44 (7), 1555-1569 (2024).</li>
<li>Izawa-Ishizawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+novel+aortic+dissection+mouse+model+and+evaluation+of+drug+efficacy+using+in-vivo+assays+and+database+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Development of a novel aortic dissection mouse model and evaluation of drug efficacy using in-vivo assays and database analyses.</a> J Hypertens. 37 (1), 73-83 (2019).</li>
<li>Anzai, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adventitial+CXCL1%2FG-CSF+expression+in+response+to+acute+aortic+dissection+triggers+local+neutrophil+recruitment+and+activation+leading+to+aortic+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Adventitial CXCL1/G-CSF expression in response to acute aortic dissection triggers local neutrophil recruitment and activation leading to aortic rupture.</a> Circ Res. 116 (4), 612-623 (2015).</li>
<li>Nishida, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+salt+intake+worsens+aortic+dissection+in+mice%3A+Involvement+of+IL-17A-dependent+ECM+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">High salt intake worsens aortic dissection in mice: Involvement of IL-17A-dependent ECM metabolism.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 40 (1), 189-205 (2020).</li>
<li>Chen, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+aortic+stiffness+and+attenuated+lysyl+oxidase+activity+in+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Increased aortic stiffness and attenuated lysyl oxidase activity in obesity.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (4), 839-846 (2013).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> J Vis Exp. (103), e53191(2015).</li>
<li>Qi, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated+mouse+model+capable+of+recapitulating+the+protective+effects+of+female+sex+hormones+on+ascending+aortic+aneurysms+and+dissections%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rep%22%5BJournal%5D)">A validated mouse model capable of recapitulating the protective effects of female sex hormones on ascending aortic aneurysms and dissections.</a> Physiol Rep. 8 (22), e14631(2020).</li>
<li>Obama, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidermal+growth+factor+receptor+inhibitor+protects+against+abdominal+aortic+aneurysm+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Sci+%28Lond%22%5BJournal%5D)">Epidermal growth factor receptor inhibitor protects against abdominal aortic aneurysm in a mouse model.</a> Clin Sci (Lond. 128 (9), 559-565 (2015).</li>
<li>Aicher, B. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+aerobic+exercise+prevents+matrix+degradation+and+death+in+a+mouse+model+of+aortic+dissection+and+aneurysm%29%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Moderate aerobic exercise prevents matrix degradation and death in a mouse model of aortic dissection and aneurysm).</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 320 (5), H1786-H1801 (2021).</li>
<li>Aicher, B. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+micro-CT+analysis+of+aortopathy+in+a+mouse+model+of+%CE%B2-aminopropionitrile-induced+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Quantitative micro-CT analysis of aortopathy in a mouse model of β-aminopropionitrile-induced aortic aneurysm and dissection.</a> J Vis Exp. (137), e57589(2018).</li>
<li>Ohno-Urabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Authentication+of+in+situ+measurements+for+thoracic+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Authentication of in situ measurements for thoracic aortic aneurysms in mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 41 (6), 2117-2119 (2021).</li>
<li>Sawada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+monitoring+of+descending+aortic+aneurysms+and+dissections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasound monitoring of descending aortic aneurysms and dissections in mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 40 (10), 2557-2559 (2020).</li>
<li>Deery, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+sex+independently+predicts+mortality+after+thoracic+endovascular+aortic+repair+for+intact+descending+thoracic+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Female sex independently predicts mortality after thoracic endovascular aortic repair for intact descending thoracic aortic aneurysms.</a> J Vasc Surg. 66 (1), 2-8 (2017).</li>
<li>Rylski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender-related+differences+in+patients+with+acute+aortic+dissection+type+A%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Gender-related differences in patients with acute aortic dissection type A.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 162 (2), 528-535.e1 (2021).</li>
<li>Fashandi, A. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+exhibit+abdominal+aortic+aneurysm+protection+in+an+established+rupture+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Female mice exhibit abdominal aortic aneurysm protection in an established rupture model.</a> J Surg Res. 247, 387-396 (2020).</li>
</ol>

Autorzy tego manuskryptu nie mają żadnych konfliktów interesów, o których mogliby zadeklarować.

Ze względu na ograniczoną wiedzę na temat zagrażającego życiu rozwarstwienia aorty piersiowej (TAD), stworzenie stabilnych modeli zwierzęcych jest niezbędne do zbadania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw wystąpienia i progresji TAD. β-aminopropionitryl (BAPN), inhibitor oksydazy lizylowej, jest szeroko stosowany w modelach TAD u gryzoni, ponieważ zaburza sieciowanie kolagenu i elastyny, osłabiając w ten sposób ścianę aorty i zwiększając jej podatność na naprężenia mechaniczne13. Jednak s...

Rozwarstwienie aorty piersiowej (TAD) jest poważną chorobą aorty spowodowaną pęknięciem błony wewnętrznej z powodu krwawienia w ścianie aorty piersiowej, co skutkuje oddzieleniem warstw ściany aorty, przedostaniem się krwi do środka ściany aorty, tworząc fałszywe światło i powodując ucisk na prawdziwe światło 1,2,3. Badania epidemiologiczne sugerują, że częstość występowania TAD wynosi od 7 do 9 przypadków na 100 000 osób rocznie4. Obecnie uważa się, że patogeneza TAD jest spowodowana nieprawidłową budową i hemodynamiką ośrodka aortalnego, a czynniki takie jak nadciśnienie, dyslipidemia i dziedziczna choroba naczyniowa zwiększają ryzyko TAD5. Interwencja chirurgiczna pozostaje podstawową opcją leczenia TAD. Jednak ze względu na wysokie ryzyko okołooperacyjne badanie patogenezy TAD i metod wczesnej interwencji w celu opóźnienia jej postępu ma istotne znaczenie dla poprawy rokowania w przypadku TAD. Ponieważ bardzo trudno jest uzyskać próbki od ludzi i przeprowadzić eksperymenty bezpośrednio na ludziach, konieczne jest stworzenie zwierzęcych modeli TAD, które naśladują cechy ludzkiego TAD.
W ciągu ostatnich kilku dekad szeroko opisano wiele zwierzęcych modeli tętniaka aorty (AA). Wciąż jednak niewiele jest badań dotyczących tworzenia modeli TAD; niektórzy badacze uważali nawet, że TAD jest produktem ubocznym zwierzęcego modelu AA6. W rzeczywistości, biorąc pod uwagę, że TAD wynika z początkowego pęknięcia błony wewnętrznej aorty piersiowej, po którym następuje szybkie rozszerzenie fałszywego światła, ta znacząca różnica w mechanizmie odróżnia TAD od tętniaka aorty7. Do tej pory rozwarstwienie aorty u gryzoni wywołane β-aminopropionitrylem (BAPN) jest najczęściej stosowanym modelem TAD. BAPN, swoisty i nieodwracalny inhibitor oksydazy lizylowej, hamuje sieciowanie włókien elastycznych i włókien kolagenowych w ścianie aorty i jest szeroko stosowany w zwierzęcych modelach rozwarstwienia aorty 8,9,10. W większości przypadków BAPN został dodany do wody pitnej myszy w celu skonstruowania modeli TAD, a połączenie BAPN i angiotensyny II (Ang II) za pośrednictwem pompy osmotycznej zostało zgłoszone w celu skonstruowania modeli TAD11,12. Jednak te metody budowania modeli TAD nie są szczegółowo opisane. Ze względu na różnice w szczepach myszy, podawaniu BAPN oraz stężeniu i czasie trwania Ang II, częstość występowania i zakres zmian TAD były niestabilne w różnych eksperymentach. W związku z tym istnieje pilna potrzeba opracowania stabilnej metody konstruowania mysich modeli TAD.
W tym miejscu protokół ten opisuje szczegółowo, krok po kroku, prostą i bardzo skuteczną metodę wykorzystującą połączenie wody uzupełnionej BAPN i pompy osmotycznej Ang II do budowy mysiego modelu TAD. Protokół ten ma zastosowanie w większości laboratoriów i jest łatwy do nauczenia, dzięki czemu nawet badacze bez doświadczenia w budowie modeli myszy mogą go konsekwentnie wykonywać.

<table><tbody><tr><td>Sól fumaranu 3-aminopropionitrylu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A3134 (wersja angielska)</td><td></td></tr><tr><td>Waga analityczna</td><td>Radwag powiedział:</td><td>AS 220.R2</td><td></td></tr><tr><td>Maszyna anestezjologiczna</td><td>Szanghaj Renyi Biological Technology Co., Ltd.</td><td>Język MSS-3</td><td></td></tr><tr><td>Angiotensyna II</td><td>MCE (Certyfikat MCE)</td><td>HY-13948 (wersja angielska)</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J Samce myszy</td><td>GemPharmatech</td><td>N000013</td><td></td></tr><tr><td>Dieta chow</td><td>Sibeifu Beijing Biotechnology Co., Ltd</td><td>SPF-F02-002 (Certyfikat SPF-F02-002)</td><td></td></tr><tr><td>Elektrotermiczny zbiornik na wodę o stałej temperaturze</td><td>Yiheng Technical Co., Sp. z o.o.</td><td>DK-8D</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do barwienia EVG</td><td>Solarbio (Słoneczna Biologia)</td><td>Klasa G1590</td><td></td></tr><tr><td>Pryzmat GraphPad</td><td>Podkładka graficzna</td><td>Wersja 10.0.2</td><td></td></tr><tr><td>H& Zestaw do barwienia E</td><td>Serwis bio</td><td>Zobacz materiał G1076</td><td></td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Shinva Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>ZH240RN</td><td></td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>RWD</td><td>Przekaźnik Przemysłowy R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>Mikroprobówka</td><td>Axygen Scientific, Inc.</td><td>MCT-150-C</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcz igłowy</td><td>Shinva Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>ZM234R/RN/RB</td><td></td></tr><tr><td>Pompa osmotyczna</td><td>Alzet</td><td>Zobacz materiał 1003D</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>Serwis bio</td><td>G1101 powiedział:</td><td></td></tr><tr><td>PBS, 1x</td><td>Serwis bio</td><td>Zobacz materiał G4202</td><td></td></tr><tr><td>Słony</td><td>Serwis bio</td><td>Telefon G4702</td><td></td></tr><tr><td>Skalpel</td><td>Shinva Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>ZB084R/RN</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczek</td><td>Shinva Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>ZC480RN/RB/RNj/RNh</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop stereoskopowy</td><td>Księga Leica</td><td>Zobacz materiał EZ4</td><td></td></tr><tr><td>Szew</td><td>Jinhuan Zaopatrzenie Medyczne Co., Ltd.</td><td>Zobacz materiał F604</td><td></td></tr><tr><td>Pęseta</td><td>Shinva Medical Instrument Co., Ltd.</td><td>ZO022RB</td><td></td></tr></tbody></table>

mysi model rozwarstwienia aorty piersiowej wywołanego doustną infuzją β-aminopropionitrylu i podskórnej angiotensyny ii

Murine Model of Thoracic Aortic Dissection Induced by Oral &#946;-Aminopropionitrile and Subcutaneous Angiotensin II Infusion

Rozwarstwienie aorty piersiowej (TAD) jest wysoce śmiertelną chorobą sercowo-naczyniową, która nie jest skutecznie leczona. Replikacja zwierzęcych modeli patofizjologii TAD jest niezbędna do badania wewnętrznych mechanizmów TAD. Szeroko stosowany model TAD indukowany przez β-aminopropionitryl (BAPN, nieodwracalny i aktywny doustnie inhibitor oksydazy lizylowej) u myszy ma ograniczenie polegające na niespójnym wskaźniku sukcesu. Protokół ten szczegółowo opisuje zgłoszony zmodyfikowany mysi model TAD indukowany doustnym BAPN w połączeniu z podskórnym wlewem angiotensyny II (Ang II). Po czterech tygodniach podawania BAPN, a następnie 24 godzinach infuzji Ang II, niezawodnie indukowano model mysi o charakterystyce podobnej do ludzkiego TAD, a wskaźnik powodzenia budowy modelu TAD uległ znacznej poprawie. Doustny BAPN hamuje sieciowanie elastyny i kolagenu, co prowadzi do zniszczenia struktury ściany aorty i do pewnego stopnia indukuje rozszerzenie i rozwarstwienie aorty. Późniejsza indukcja Ang II dodatkowo nasila zwyrodnienie ściany aorty, sprzyjając w ten sposób występowaniu TAD. W związku z tym połączenie BAPN i Ang II stanowi wyrafinowane podejście do konstruowania mysiego modelu TAD, oferując cenne narzędzie do badania patogenezy i potencjalnych podejść terapeutycznych dla TAD.

W badaniu wzięło udział łącznie 70 samców myszy C57BL/6J w wieku 3 tygodni, które randomly przypisano do czterech grup: kontrolnej (n = 10), BAPN (n = 20), BAPN + sól fizjologiczna (n = 20) oraz BAPN + Ang II (n = 20). W grupie BAPN u 11 z 20 myszy rozwinęła się rozwarstwienie aorty piersiowej (TAD) 28 dni po podaniu BAPN, przy czym 4 myszy padły w wyniku pęknięcia aorty. W grupie BAPN + sól fizjologiczna TAD rozwinęło się u 12 z 20 myszy, z 4 zgonami spowodowanymi pęknięciem. Co istotne,...

Protokół ten zapewnia szczegółową, krok po kroku procedurę indukcji rozwarstwienia aorty piersiowej u myszy. W szczególności obejmuje dokładne obliczenie wymaganych dawek β-aminopropionitrylu i angiotensyny II, procedurę napełniania pompy osmotycznej oraz technikę implantacji pompy osmotycznej.

Mysi model rozwarstwienia aorty piersiowej wywołanego doustną infuzją β-aminopropionitrylu i podskórnej angiotensyny II

Thoracic aortic dissection (TAD) is a highly fatal cardiovascular disease that lacks efficient medical treatment. Replication of animal models of TAD ...

W badaniu tym ustanowiono mysi model rozwarstwienia aorty piersiowej, TAD, poprzez indukcję BAPN i angiotensyny II, zapewniając szczegółową procedurę, która stanowi cenne narzędzie do badania patogenezy TAD lub podejść terapeutycznych. Kombinacja BAPN i angiotensyny II zapewnia metodę tworzenia mysich modeli TAD, które osiągają wysoki wskaźnik występowania TAD i odtwarzają cechy patofizjologii podobne do tych obserwowanych u ludzi. W przyszłości nasz zespół badawczy połączy badania kliniczne i podstawowe, aby zilustrować patogenezę układu sercowo-naczyniowego, nadając priorytet odkrywaniu nowych strategii terapeutycznych dzięki mechanistycznym wglądom i innowacjom translacyjnym.[Prezenter] Zważyć każdą mysz i zanotować maksymalną masę ciała w celu obliczenia masy angiotensyny II wymaganej w doświadczeniu. Użyj szablonu obliczeniowego, aby określić masę angiotensyny II dla każdej myszy na podstawie maksymalnej masy ciała. Następnie obliczyć całkowitą masę angiotensyny II potrzebną do przygotowania 130 mikrolitrów roztworu angiotensyny II na mysz. Użyj dostarczonego szablonu, aby określić objętość roztworu angiotensyny II i soli fizjologicznej potrzebnych do eksperymentu. Odważyć obliczoną ilość angiotensyny II w sterylnej mikroprobówce za pomocą wagi analitycznej. Dodaj obliczoną objętość soli fizjologicznej do mikroprobówki. Za pomocą mieszalnika wirowego dokładnie rozpuść proszek, aż nie pozostaną żadne widoczne cząstki. Zważyć każdą pompę osmotyczną, łącznie z korpusem pompy i moderatorem przepływu, za pomocą wagi analitycznej. Podłączyć rurkę do napełniania do świeżo otwartej sterylnej strzykawki o pojemności 1 mililitra i ostrożnie odessać przygotowany roztwór angiotensyny II. Trzymać rurkę do napełniania w pozycji do góry i usunąć wszelkie pęcherzyki powietrza ze strzykawki. Delikatnie włóż koniec rurki do napełniania do górnego otworu pompy osmotycznej, aż rurki nie będzie można dalej wkładać. Trzymać pompę w pozycji pionowej i powoli naciskać tłok strzykawki, aż na wylocie pojawi się roztwór angiotensyny II. Następnie zatrzymaj i ostrożnie wyjmij rurkę napełniającą. Następnie ostrożnie i powoli włóż moderator przepływu do otworu pompy, aż nie pozostanie żadna szczelina między moderatorem a górną częścią pompy. Zważyć załadowaną pompę za pomocą wagi analitycznej i zapisać wartość. Umieść napełnione pompy w sterylnym roztworze soli fizjologicznej w temperaturze 37 stopni Celsjusza, z głowicą moderatora skierowaną do góry, na co najmniej sześć godzin przed implantacją. Umieść mysz w pozycji leżącej na powierzchni operacyjnej. Za pomocą skalpela ostrożnie wykonaj 1-centymetrowe poprzeczne nacięcie w skórze. Użyj jednej pary zakrzywionych kleszczy, aby chwycić brzeg sieczny, a drugiej pary kleszczy, aby tępo wypreparować tkankę podskórną, tworząc kieszeń dla pompy osmotycznej. Włóż napełnioną pompkę do kieszeni z głowicą moderatora przepływu skierowaną w stronę ogonowego końca myszy. Starannie wyrównaj brzegi sieczne i zamknij skórę, używając niewchłanialnych szwów 6-0. Rysunek ten ilustruje częstość występowania rozwarstwienia i pęknięcia aorty we wszystkich grupach eksperymentalnych. Rozwarstwienie aorty wystąpiło u 100% myszy w grupie BAPN plus angiotensyna II, przy czym 35% doświadczyło pęknięcia, przekraczając 55% lub 60% częstość obserwowaną w grupie BAPN lub BAPN plus sól fizjologiczna, podczas gdy w grupie kontrolnej nie doszło do rozwarstwienia ani pęknięcia. Morfologia ogólna aorty wykazała postępującą deformację w grupach BAPN, BAPN z solą fizjologiczną i BAPN z angiotensyną II w porównaniu z aortami w grupie kontrolnej. Maksymalne średnice aorty piersiowej były istotnie większe we wszystkich grupach leczonych BAPN w porównaniu z grupą kontrolną, bez istotnych różnic między grupami leczonymi. Barwienie hematoksyliną i eozyną ujawniło cienkie, jednolite ściany aorty w grupie kontrolnej, podczas gdy wszystkie grupy leczone BAPN wykazywały pogrubienie i naciek zapalny. Barwienie elastyną Van Giesona wykazało nienaruszone włókna elastyczne w grupie kontrolnej i postępującą fragmentację włókien z fałszywym tworzeniem światła we wszystkich grupach leczonych BAPN.

murine-model-thoracic-aortic-dissection-induced-oral

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W niniejszym filmie pokazano, jak indukować tętniaki aorty brzusznej (AAA) u myszy poprzez przejściową infuzję wewnątrznaczyniową elastazy trzustkowej pochodzenia świńskiego do odcinka podnerkowego aorty brzusznej. Model ten pozwala na uzyskanie szerokiego wglądu w patobiologię AAA dzięki dostępności licznych myszy transgenicznych i z nokautem genowym.

Wytwarzanie eksperymentalnych tętniaków aorty brzusznej u myszy z użyciem elastazy

Modyfikacje histologiczne i biochemiczne po wykluczeniu endoprzeszczepu tętniaka są nadal niejasne. Opisujemy nowy model implantacji endprzeszczepu na tętniaku myszy. Dzięki analizie skrzepliny z utrzymującym się interfejsem krążącego krwiobiegu i bez niego oraz ocenie nowych biomateriałów wewnątrznaczyniowych, model ten pomoże lepiej zrozumieć patobiologię wykluczenia tętniaka wewnątrznaczyniowego.

Nowy mysi model wewnątrznaczyniowej naprawy tętniaka aorty

Podskórne wszczepianie pomp osmotycznych zapewnia wygodne podejście do długotrwałego i konsekwentnego dostarczania związków. Podejście to było szeroko stosowane do badania tętniaków aorty brzusznej i piersiowej u myszy.

Podskórny wlew angiotensyny II za pomocą pomp osmotycznych indukuje tętniaki aorty u myszy

Zrozumienie komórkowych i molekularnych mechanizmów reendotelializacji po uszkodzeniu po denudacji tętnic ma ogromne znaczenie w zapobieganiu zakrzepicy i restenozie tętnic. W tym miejscu opisujemy protokół powtarzalnego uszkodzenia aorty brzusznej po obnażeniu tętnic. Procedura została opracowana w celu zbadania podstawowych mechanizmów regulujących regenerację śródbłonka przy użyciu modeli mysich.

Powtarzalne uszkodzenie denunacji tętnic przez podnerkowe zaciskanie aorty brzusznej w modelu mysim

Restenoza po zabiegach sercowo-naczyniowych (operacja pomostowania, angioplastyka lub stentowanie) jest poważnym problemem zmniejszającym trwałość tych procedur. Idealna terapia hamowałaby proliferację komórek mięśni gładkich (VSMC), jednocześnie promując regenerację śródbłonka. Opisano model jednoczesnej oceny proliferacji VSMC i funkcji śródbłonka in vivo.

Mysi uraz zmiażdżenia aorty: skuteczny model in vivo proliferacji komórek mięśni gładkich i funkcji śródbłonka

Ten artykuł demonstruje model mysi do badania rozwoju przerostu mięśniowo-intimalnego (MH) po uszkodzeniu balonu aorty.

Uraz balonowy w celu wywołania przerostu mięśniowo-wewnętrznej w aorcie brzusznej myszy

Ten artykuł opisuje szczegółową metodologię użycia nieprzepuszczającego promieni rentgenowskich kauczuku silikonowego na bazie ołowiu do perfuzji mysiego układu krwionośnego do ilościowego określenia średnicy aorty w mysim modelu tętniaka i rozwarstwienia aorty.

Ilościowa analiza aortapatii metodą mikro-CT w mysim modelu tętniaka i rozwarstwienia aorty wywołanego β-aminopropionitrylem

Opisujemy protokół chirurgiczny mający na celu konsekwentne wywoływanie silnych tętniaków aorty piersiowej u myszy. Zabieg polega na tym, że torakotomia lewa strona, odsłonięcie aorty piersiowej i umieszczenie gąbki nasączonej elastazą trzustkową świni na ścianie aorty.

Mysi model chirurgiczny miejscowego tętniaka aorty piersiowej wywołanego elastazą

Ten nowatorski model tworzy silne tętniaki aorty podnerkowej u świń za pomocą kombinacji angioplastyki balonowej, perfuzji elastazy/kolagenazy, miejscowego stosowania elastazy i doustnego podawania związków β-aminopropionitrylu, które zakłócają sieciowanie kolagenu.

Świński model tętniaka aorty brzusznej

Ten protokół opisuje kolejne wszczepianie pompy osmotycznej w celu wywołania tętniaka aorty brzusznej poprzez uwalnianie angiotensyny II u myszy z niedoborem apolipoproteiny E (ApoE) oraz portu dostępu naczyniowego z cewnikiem do żyły szyjnej w celu wielokrotnego leczenia farmakologicznego. Monitorowanie rozwoju tętniaka za pomocą ultrasonografii 3D jest skutecznie prowadzone pomimo implantów grzbietowych.

Leczenie farmakologiczne za pomocą cewnika do żyły centralnej w mysim modelu tętniaka aorty brzusznej indukowanego angiotensyną II i monitorowanie za pomocą ultradźwięków 3D

Ten protokół opisuje metodyczne podejście chirurgiczne do modelowania zaawansowanych tętniaków aorty brzusznej u myszy poprzez kombinację bezpośredniego stosowania elastazy do aorty podnerkowej i podawania ß-aminopropionitrylu przez wodę pitną.

Zaawansowane modelowanie tętniaka aorty brzusznej u myszy poprzez połączenie miejscowej elastazy i doustnego ß-aminopropionitrylu

Poznaj metodę indukcji rozwarstwienia aorty piersiowej u myszy za pomocą β-aminopropionitrylu i angiotensyny II. Ten protokół umożliwia precyzyjne badanie mechanizmów choroby i testowanie terapii.

Mysi model rozwarstwienia aorty piersiowej wywołanego doustną infuzją β-aminopropionitrylu i podskórnej angiotensyny II

Przeglądaj więcej filmów