18 lipca 2025
Protokół ten opisuje krok po kroku procedurę pobierania unaczynionego i unerwionego alloprzeszczepu ściany jamy brzusznej, szczegółowo opisując jego anatomiczne punkty orientacyjne, wymagania techniczne i przyszłe potencjalne zastosowania kliniczne.
Nasze francuskie laboratorium koncentruje się na ulepszaniu VCA w celu ulepszenia protokołów zbioru, optymalizacji konserwacji przeszczepów, strategii zmniejszania uszkodzenia reperfuzyjnego niedokrwiennego i wywoływania tolerancji u ludzi.
Główne obecne wyzwania w VCA obejmują standaryzację metod pobierania i opracowanie solidnych protokołowanych technik konserwacji tkanek w celu zapewnienia żywotności przeszczepu i poprawy długoterminowych wyników funkcjonalnych i immunologicznych. Protokół ten jest przeznaczony dla zespołów specjalizujących się w VCA, aby pomóc im w wykonywaniu zoptymalizowanych allotransplantacji jamy brzusznej w niezawodny i powtarzalny sposób. W przeciwieństwie do innych technik, protokół ten zawiera przewodnik krok po kroku, jak uzyskać przeszczep unerwionej ściany brzucha, który jest kluczem do optymalnego powrotu do sprawności.
Nasz francuski dział rekonstrukcji koncentruje się na poprawie regeneracji nerwów, rozwijającej się dziedzinie wykorzystującej techniki takie jak TMR, APNI i przewody nerwowe. Jest to szczególnie istotne na etapie przeszczepu tego przeszczepu.
Nasz protokół rodzi kluczowe pytania o to, ile napraw nerwów jest potrzebnych i jakie techniki zastosować, aby osiągnąć znaczące unerwienie motoryczne i powrót do sprawności.
Nasze laboratorium skupi się na konserwacji przeszczepów, które są kluczem do udanego przeszczepu, a ten protokół może być bardzo przydatnym modelem, jeśli zostanie pobrany na martwym dawcy, ale musi to być wykonane pod ścisłą autoryzacją badawczą.
[Instruktor] Aby rozpocząć, ułóż pacjenta na wznak na stole operacyjnym z rękami wzdłuż ciała. Użyj ołówka dermograficznego, aby narysować górną linię graniczną, zaczynając od wyrostka mieczykowatego mostka. Rozciągnij tę linię na boki, śledząc dolny brzeg klatki piersiowej po obu stronach, aż osiągnie pionową linię położoną od dwóch do trzech centymetrów bocznie od przedniego górnego odcinka kręgosłupa. Zdefiniuj granicę boczną za pomocą pionowej linii umieszczonej od dwóch do trzech centymetrów bocznie w stosunku do przedniego górnego odcinka kręgosłupa. Od tego miejsca narysuj linię skierowaną w dół, aby dotrzeć do tętna tętnicy udowej znajdującej się około siedmiu do 10 centymetrów poniżej więzadła pachwinowego. Następnie narysuj dolną granicę, przedłużając linię od impulsu tętnicy udowej w kierunku kręgosłupa łonowego po każdej stronie. Połącz obie strony rysunku wzdłuż linii środkowej, kończąc na syntezie łonowej, aby uzupełnić trójkątny kontur. Wykonaj obustronne podżebrowe nacięcie skóry wzdłuż wcześniej zaznaczonej linii za pomocą zimnego ostrza skalpela. Następnie, za pomocą urządzenia do elektrokoagulacji, naciąć tkankę podskórną, aż do dotarcia do powięzi mięśniowej. Naciąć powięź leżącą nad mięśniami prostymi brzucha, aby odsłonić leżące poniżej ciała mięśniowe i przeciąć przyczepy żebrowe mięśni prostych brzucha za pomocą urządzenia do elektrokoagulacji. Teraz zidentyfikuj górne naczynia nadbrzusza za mięśniami prostymi, ostrożnie je podnieś i przekrój za pomocą elektrokoagulacji za każdym zmobilizowanym mięśniem prostym, naciąć głębokie rozcięgno mięśniowe, następnie powięź poprzeczną, a na końcu powięź ciemieniowo-otrzewnową. Z boku wypreparuj zewnętrzne mięśnie skośne, aby odsłonić i zidentyfikować linię półksiężycowatą. Wykonaj nacięcie skóry zimnym ostrzem skalpela zgodnie z wcześniej zaznaczoną granicą boczną. Użyj urządzenia do elektrokoagulacji, aby kontynuować nacięcie przez tkankę podskórną, aż do osiągnięcia warstwy rozcięgnowej zewnętrznych mięśni skośnych. Następnie naciąć zewnętrzny mięsień skośny, a następnie mięsień skośny wewnętrzny, zachowując boczny margines od dwóch do trzech centymetrów od linii półksiężycowatej. Następnie zlokalizuj nerwy piersiowo-lędźwiowe między wewnętrznymi skośnymi i poprzecznymi mięśniami brzucha i ostrożnie wypreparuj te nerwy bocznie tak daleko, jak to możliwe, aby je zachować. Po zabezpieczeniu nerwów piersiowo-lędźwiowych należy naciąć mięsień poprzeczny brzucha, następnie powięź poprzeczną, a następnie powięź ciemieniową otrzewnową. Podczas uwalniania przeszczepu allogenicznego zidentyfikuj głębokie dolne szypułki nadbrzusza znajdujące się na głębokiej powierzchni mięśni prostych brzucha. Wykonaj nacięcie skóry wzdłuż dolnej części za pomocą zimnego ostrza skalpela. Za pomocą skalpela elektrycznego kontynuuj preparację przez tkankę podskórną, aż do osiągnięcia płaszczyzny rozcięgna mięśniowego podudzia uda. Teraz zidentyfikuj żyłę odpiszczelową wielką, podwiąż ją i przetransektuj. Następnie zlokalizuj boczny nerw skórny kości udowej i przeciąć go. Naciąć powięź podudzi, upewniając się, że jest ona zawarta w próbce przeszczepu. Następnie podnieś dwie trójkątne płaty skórne powięzi znajdujące się pod więzadłami pachwinowymi, aż do odsłonięcia naczyń udowych. Po obu stronach dokładnie wypreparuj tętnicę i żyłę udową wraz z ich odgałęzieniami pobocznymi, w tym powierzchownym dolnym nadbrzuszem i powierzchownymi obwodowymi naczyniami biodrowymi. Kontynuuj sekcję w kierunku zewnętrznej tętnicy biodrowej i żyły, identyfikując i zachowując głębokie dolne naczynie biodrowe i głębokie obwodowe naczynia biodrowe. Następnie zapętl głębokie dolne naczynia nadbrzusza silikonową pętlą dla ochrony. Aby kontynuować sekcję powyżej więzadła pachwinowego, usuń powięź mięśniową nad mięśniem biodrowym, aby uniknąć uszkodzenia głębokich naczyń biodrowych obwodowych. Za pomocą skalpela elektrycznego odłącz mięśnie proste brzucha od ich przyczepów łonowych, upewniając się, że głębokie dolne naczynia nadbrzusza pozostają nienaruszone. Następnie podwiąż i przetransektuj zawartość kanału pachwinowego, w tym więzadło okrągłe macicy i nerw biodrowo-pachwinowy u kobiet. Aby zakończyć sekcję, podwiąż i przetnij głębokie naczynia biodrowe obwodowe, powierzchowne biodrowe obwodowe i powierzchowne dolne naczynia nadbrzusza u ich źródeł na zewnętrznych naczyniach biodrowych i udowych. Upewnij się, że dwie głębokie dolne szypułki naczyń krwionośnych nadbrzusza pozostają przyczepione zarówno do alloprzeszczepu ściany jamy brzusznej, jak i do ciała dawcy. Po usunięciu wnętrzności brzusznych zidentyfikuj i zaznacz głębokie dolne naczynia nadbrzusza po obu stronach, zwykle jedną tętnicę i dwie żyły po każdej stronie. Ostrożnie wypreparuj i podwiąż te naczynia u ich początku od zewnętrznych naczyń biodrowych, a następnie przeciąć naczynia, aby uwolnić przeszczep. Teraz cewnikować każdą głęboką dolną tętnicę nadbrzusza za pomocą kaniuli naczyniowej wyposażonej w kran i przymocować ją do światła tętnicy za pomocą podwiązki. Na koniec podłącz zestaw do irygacji do kaniul i przepłucz przeszczep jednym do trzech litrów roztworu konserwującego University of Wisconsin o temperaturze czterech stopni Celsjusza. Utrzymuj natężenie przepływu około 100 mililitrów na minutę pod niskim ciśnieniem, nie przekraczając 100 milimetrów rtęci, aż ścieki będą czyste. Średnia długość użytkowa nerwów piersiowo-lędźwiowych wypreparowanych zarówno z prawej, jak i lewej strony wynosiła 68 milimetrów, przy czym długość poszczególnych nerwów wahała się od 60 do 85 milimetrów. Głęboka dolna tętnica nadbrzusza mierzyła 85 milimetrów po lewej stronie i 71 milimetrów po prawej stronie przed wejściem do przeszczepu.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejszy protokół opisuje szczegółową procedurę pobierania unaczynionego i zreinnerwowanego allograftu ściany brzucha, określając jego punkty orientacyjne oraz wymagania techniczne. Celem opracowania jest udoskonalenie protokołów unaczynionego przeszczepiania złożonych tkanek (VCA) w celu poprawy wyników klinicznych.
Znormalizowane pozyskiwanie i konserwacja unaczynionych i zreinnerwowanych allograftów ściany brzucha rozwiązują kluczowy problem w transplantologii rekonstrukcyjnej w przypadku złożonych ubytków brzusznych. Niniejszy protokół wspiera badania translacyjne, umożliwiając powtarzalną żywotność przeszczepów oraz regenerację funkcjonalną, co bezpośrednio wpływa na wczesne odkrycia i rozwój modeli przedklinicznych w inżynierii tkankowej. Jego zastosowanie pozwala zredukować niepewność w zakresie mechanizmów działania oraz dostarczyć informacji pomocnych przy podejmowaniu decyzji dotyczących portfolio w badaniach i rozwoju (B+R) w obszarze medycyny regeneracyjnej i transplantologii.
Niniejszy protokół integruje się z kontinuum od odkrycia do badań przedklinicznych w zakresie transplantacji rekonstrukcyjnej, wspierając zarówno wczesne badania mechanistyczne, jak i rozwój modeli translacyjnych.