Name: Przezroczyste odlewy stawonogów z żywicy do wykorzystania w edukacji, popularyzacji i badaniach (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-16T12:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 5 s
Description: Naucz się metody zatapiania stawonogów w żywicy do celów edukacyjnych i popularyzacji nauki. Technika zachowuje cechy morfologiczne delikatnych owadów, minimalizując pęcherzyki powietrza.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Doceniamy byłych i obecnych studentów studiów licencjackich, którzy przyczynili się do rozwoju produkcji żywicy, w tym Jake'a Hosta, Katelyn Humlicek, Erika Aguirre Cordero, Isaaca Lunę, Michaela Rileya, Elise Hoffman, Megan Nicholson, Allison Speed oraz Jesusa Rene Garcia Lunar. Wsparcie finansowe zapewniły Wydział Entomologii Uniwersytetu Texas A&M oraz program Texas EcoLab (GLH, RCR). Następujące stawonogi zamontowane w żywicy podczas tego badania zostały udostępnione przez Centers for Disease Control and Prevention do dystrybucji przez BEI Resources, NIAID, NIH: Adult Rhodnius prolixus, Strain CDC, NR-44077; NIAID, NIH: Dorosły Haemaphysalis longicornis, NR-51846; NIAID, NIH: Dorosły Rhipicephalus sanguineus, NR-42512; NIAID, NIH: Dorosły Dermacentor variabilis, NR-42513; NIAID, NIH: Dorosły Ixodes scapularis, NR-42510; oraz NIAID, NIH: Adult Amblyomma americanum, NR-42514. Lutzomyia longipalpis zostały dostarczone przez Walter Reed Army Institute of Research do dystrybucji przez BEI Resources, NIAID, NIH: Adult Lutzomyia longipalpis, Strain Jacobina, Brazylia (LLJB), NR-44015. Simulium vittatum użyte w tej pracy zostały wykonane przy wsparciu rozkazu zadaniowego NIH C-08, nr kontraktu. HHSN2722017000351, Rozkaz zadaniowy nr 75N93020F00002, uzyskany przez BEI Resources, NIAID, NIH: Simulium vittatum, Adult, NR-53893.

UWAGA: Zagrożenia związane z protokołem produkcji żywicy obejmują narażenie na toksyczne opary z nieutwardzonej żywicy, kontakt z nieutwardzoną żywicą i katalizatorem, użycie elektronarzędzi oraz powstawanie kurzu podczas etapów cięcia/szlifowania/polerowania. Przy pracy z nieutwardzoną żywicą potrzebny jest okap wyparowy lub dobrze wentylowane miejsce oraz rękawice nitrylowe. Jeśli żywica lub katalizator zetkną się ze skórą, natychmiast umyj to miejsce mydłem i wodą. Podczas cięcia/szlifowania/polerowania utwardzonych bloków żywicy należy nosić odpowiednio dopasowany pół-face respirator.
1. Przygotowanie okazu i etykiety
UWAGA: Przygotowanie okazów zależy od używanego stawonoga. Próbki i etykiety powinny być przygotowane i odłożone do użytku przed przygotowaniem warstwy żywicy 1.
<ol>
	<li>Wybierz próbkę do umieszczenia w żywicy.<ol>
		<li>Kleszcze: Usuń kleszcze przechowywane w zamrażarce lub w 70% etanolu. Umieść dorosłe i nimfalne kleszcze usunięte z 70% etanolu między dwoma szkiełkami mikroskopu, jednocześnie delikatnie naciskając po obu stronach kleszcza, aby usunąć nadmiar etanolu, który może znajdować się wewnątrz kleszcza. Następnie umieść kleszcza na płaskiej powierzchni i pozwól mu wyschnąć przez co najmniej 5 minut przed dodaniem go do żywicy. UWAGA: Kleszcze przechowywane w zamrażarce nie muszą być dociskane między szkiełkami mikroskopowymi, ale powinny stać w temperaturze pokojowej, jak wspomniano powyżej.</li>
		<li>Komary: Nowo wyklute dorosłe komary najlepiej osadzają się w żywicy, ponieważ najczęściej mają wszystkie cechy diagnostyczne (łuski itp.). Aby pozyskać świeżo wyklute dorosłe komary, gdy istnieje kolonia lub naturalne populacje z pola, umieść larwy lub poczwarki w wodzie w komorze wylęgnowej, a po eklatacji dorosłe osobniki wejdą do górnej komory kubka wyklęsków. Włóż świeżo wyklute dorosłe komary do zamrażarki, aby je zabiły, następnie usuń i pozwól je odstać w temperaturze pokojowej przez co najmniej 5 minut przed dodaniem do żywicy. UWAGA: Czas zabijania komarów w zamrażarce zależy od temperatury zamrażarki (np. komary są zabijane w ~10 minut po umieszczeniu w zamrażarce o temperaturze -80 °C). Dorosłe komary powinny być używane w ciągu kilku godzin od zabicia, ponieważ komary wysychają po dłuższym przechowywaniu w zamrażarce.</li>
		<li>Komary i inne larwy/larwy Diptera: Usuń larwy z etanolu i namocz w katalizatorze żywicy przez co najmniej 20 minut przed dodaniem do żywicy. UWAGA: Umieszczenie tych próbek w katalizatorze zastępuje etanol w ich organizmie, nie wysuszając próbki i nie powodując jej kurczenia się.</li>
		<li>Inne stawonogi: Dla wielu stawonogów należy stosować się do powyższych wskazówek dotyczących innych kleszczy lub komarów, w zależności od delikatności cech zewnętrznych.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Twórz etykiety z pożądanymi informacjami (np. nazwy naukowe i etapy cyklu życia). Drukuj etykiety na arkuszach przezroczystych za pomocą drukarki laserowej (nie atramentowej). Przyciąć etykiety na odpowiedni rozmiar.<ol>
		<li>Użyj czcionki w rozmiarze 8 Times New Roman kursywą. Używaj czcionki w rozmiarze 12, Times New Roman kursywą dla cykli życia lub większych okazów.</li>
		<li>W przypadku kolekcji dydaktycznych zawierających praktyczne egzaminy laboratoryjne upewnij się, że stawonogi w żywicy są oznaczone w taki sposób, by instruktorzy mogli powiedzieć, jakiego gatunku są, ale nie uczniowie testowani pod kątem umiejętności rozpoznawania. W tym kontekście używaj małych kodów QR o rozmiarze około 1 cm2, które pozwalają smartfonowi podłączyć się do strony internetowej zawierającej informacje o danym gatunku. UWAGA: Należy dbać o to, aby etykiety były cięte równomiernie i równomiernie, aby poprawić jakość.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Warstwa żywicy 1
UWAGA: Wszystkie etapy związane z nieutwardzoną żywicą wykonuje się wewnątrz okapu wypuszczającego na zewnątrz, ponieważ powstają szkodliwe opary. Wykonywanie tych kroków w dobrze wentylowanym miejscu, na przykład na zewnątrz, to kolejna opcja.
<ol>
	<li>Załóż rękawice nitrylowe przed pracą z nieutwardzoną żywicą lub katalizatorem. UWAGA: Jeśli podczas przygotowywania warstw żywicy na rękawiczkach dostanie się zbyt dużo żywicy, należy je zdejmować, uważając, aby uniknąć kontaktu żywicy ze skórą. Jeśli rękawice zawierają nieutwardzoną żywicę, zostaw je w okapie na 24 godziny, aby całkowicie utwardziły, zanim wyrzucisz je do śmieci. Jeśli żywica ma kontakt ze skórą, natychmiast umyj dotknięte miejsce mydłem i wodą, zgodnie z instrukcjami na etykiecie.</li>
	<li>Odmierz około 60 ml (~2 oz) żywicy w plastikowym kubku. Wlej żywicę z plastikowego kubka do plastikowej miski. Umieść plastikową miskę z żywicą w kąpieli wodnej o temperaturze 32 °C. UWAGA: Żywicy nie powinno się podgrzewać w kąpieli wodnej dłużej niż 15 minut.</li>
	<li>Dodaj 12 kropli katalizatora (~540 μL) do plastikowej miski zawierającej żywicę. Powoli i ostrożnie mieszaj żywicę i katalizator plastikową łyżką przez ~1 minutę. UWAGA: Stosunek żywicy do katalizatora może się różnić w zależności od marki żywicy. Jeśli stosunek różni się od powyższego, należy stosować się do zaleceń producenta.</li>
	<li>Wlej mieszankę żywicy i katalizatora z plastikowej miski do silikonowej formy umieszczonej na drewnianym bloku w garnku ciśnieniowym (patrz krok 5.1). UWAGA: Lepkość mieszanki powinna być podobna do syropu kukurydzianego (lub podgrzanego miodu).</li>
	<li>Poczekaj około 5-20 minut, aż żywica zacznie twardnieć i będzie wystarczająco lepka, zanim dodasz próbkę. UWAGA: Czas utwardzania żywicy zależy od wielu czynników, takich jak temperatura, wilgotność i wysokość wysokości.</li>
</ol>
3. Próbki w żywicy
<ol>
	<li>Umieść okaz w centrum pierwszej warstwy żywicy, aby upewnić się, że cechy diagnostyczne (np. przetchlonce larw much) są tak ułożone, by łatwo je oglądać.</li>
	<li>Umieść etykietę na pierwszej warstwie żywicy w pożądanej odległości od próbki.</li>
</ol>
4. Warstwa żywicy 2
<ol>
	<li>Odmierz około 60 ml (~2 oz) żywicy w plastikowym kubku. Wlej żywicę z plastikowego kubka do plastikowej miski. Umieść plastikową miskę z żywicą w kąpieli wodnej o temperaturze 32 °C. UWAGA: Żywicy nie powinno się podgrzewać w kąpieli wodnej dłużej niż 15 minut.</li>
	<li>Dodaj 12 kropli katalizatora (~540 μL) do plastikowej miski zawierającej żywicę. Powoli i ostrożnie mieszaj żywicę i katalizator plastikową łyżką przez ~1 minutę. UWAGA: Intensywne mieszanie powoduje powstawanie nadmiernych bąbelków, które mogą pozostać w finalnym produkcie i zmniejszyć przejrzystość okazu (Rysunek 1). Mieszanka może również wydawać się lekko zielona po zakończeniu mieszania.</li>
	<li>Powoli wylewaj drugą mieszankę żywicy i katalizatora z plastikowej miski bezpośrednio na próbki i wzdłuż krawędzi wnętrza formy, wypełniając pozostałą przestrzeń w formie (rysunek 2C). UWAGA: Lepkość mieszanki powinna być podobna do syropu kukurydzianego (lub podgrzanego miodu).</li>
	<li>Wykonaj ostateczne poprawki okazu, takie jak przesunięcie kończyn (nóg, skrzydeł, anteny) w razie potrzeby (rysunek 2D).</li>
	<li>Zdejmuj i wyrzucaj rękawiczki zgodnie z protokołem utylizacji.</li>
</ol>
5. Garnek ciśnieniowy
<ol>
	<li>Włóż do doniczki kawałek drewna, aby podnieść powierzchnię, na której mają być umieszczone i zarządzane formy. UWAGA: Formy można umieścić w doniczce na bloku drewna przed wylaniem pierwszej warstwy, aby uniknąć przypadkowego rozlania lub przesuwania próbki, które mogłoby nastąpić, gdyby formy były przenoszone po wylaniu żywicy przed zatwardzaniem warstw.</li>
	<li>Bezpiecznie zamknij garnek i przystosuj ciśnienie do 60 psi (Rysunek 3). Zostawiaj formy w garnku ciśnieniowym przez około 24 godziny. UWAGA: Formy można pozostawić w garnku ciśnieniowym do 72 godzin bez widocznych różnic w końcowym produkcie.</li>
	<li>Zwolnij ciśnienie i wyjmij formy z garnka ciśnieniowego.</li>
	<li>Usuń bloki żywiczne z form i pozostaw je w temperaturze pokojowej, aż pozostałe kroki będą gotowe do wykonania. UWAGA: Powierzchnie żywicy mogą być lekko lepkie w dotyku (np. dotknięcie żywicy zostawi ślad odcisków palców), a boki, które dotknęły formy, mogą mieć pewne wybielanie powierzchni. Te niedoskonałości powierzchni zostaną usunięte podczas następujących procedur.</li>
</ol>
6. Przygotowanie produktu końcowego
UWAGA: Cięcie, szlifowanie i polerowanie odbywa się w osobnym budynku z odkurzaczem warsztatowym, ze względu na powstawanie kurzu i potrzebę ochrony respiratora. Maska powinna być założona i odpowiednio wyregulowana, aby dobrze przylegała do twarzy osoby ciącej, szlifowej lub polerującej utwardzone bloki żywicy przed wykonaniem kolejnych kroków. Na Uniwersytecie Texas A&M nasz program Ochrony Środowiska i Bezpieczeństwa wymaga od każdego pracownika przejścia testu dopasowania respiratora z użyciem półmaski z filtrem cząstek P100 National Institute for Occupational Safety and Health.
<ol>
	<li>Przytnij bloki żywicy na odpowiedni rozmiar piłą taśmową. UWAGA: Należy zachować ostrożność w równomiernych/zrównoważonych blokach z okazami wyśrodkowanymi (Rysunek 4A).</li>
	<li>Przeszlifuj wszystkie sześć boków bloku żywicy za pomocą szlifierki tarczowej (rysunek 4B). Powtórz kroki dla wszystkich stron, używając szlifierki taśmowej 4 x 30 cali o ziarnistości 600 (Rysunek 5A), a następnie szlifuj wszystkie strony szlifierką taśmową 1 x 30 cali o ziarnistości 2000 (Rysunek 5B). UWAGA: Aby uzyskać jak największą przejrzystość w finalnym produkcie, trzymaj każdą stronę bloku żywicy w tej samej orientacji dla każdego typu taśmy. </li>
	<li>Delikatnie przytrzymaj czerwony krem z tlenku glinu i polerowanie kół na koło polerujące przez kilka sekund, a następnie delikatnie przytrzymaj blok żywicy przy kółku polerującym pod kątem 45° (Rysunek 5C).</li>
	<li>Użyj materiału, aby usunąć nadmiar lakieru ze wszystkich stron bloku żywicy. Powtarzaj tyle razy, ile trzeba, aż osiągniesz pożądaną klarowność.</li>
	<li>Powtórz te same kroki, używając drugiego koła polerującego z białą, diamentową polerką. Powtarzaj tyle razy, ile trzeba, aż osiągniesz pożądaną klarowność i zniknie kolorowa nawierzchnia z czerwonego lakieru.</li>
</ol>

<ol><li>Schauff, M. E. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSchauff%2C+MEE+%22National+Museum+of+Natural+History%22">National Museum of Natural History</a>. , (2001).</li>
<li>Wiedenmann, R. N., Dowling, A. P. G., Barnes, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+value+of+your+insect+collection%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Entomol%22%5BJournal%5D)">What is the value of your insect collection.</a> Am Entomol. 60 (2), 4(2014).</li>
<li>Moghaddam, M. H. G., Moghaddam, M. G., Rakhshani, E., Mokhtari, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+upgrade+pinning+block%3A+a+mechanical+practical+aid+for+fast+labelling+of+the+insect+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Biodivers+Data+J%22%5BJournal%5D)">An upgrade pinning block: a mechanical practical aid for fast labelling of the insect specimens.</a> Biodivers Data J. 5, e20648(2017).</li>
<li>Poh, K. C., Machtinger, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+extension+of+their+work%3A+extension%27s+role+in+vector-borne+disease+education%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Entomol%22%5BJournal%5D)">An extension of their work: extension's role in vector-borne disease education.</a> Am Entomol. 67 (1), 4(2021).</li>
<li>Whiffin, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carri-on+communicating%3A+creating+portable+insect+displays+for+entomological+outreach%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Hist+Collect+Museomics%22%5BJournal%5D)">Carri-on communicating: creating portable insect displays for entomological outreach.</a> Nat Hist Collect Museomics. 2, 1-8 (2025).</li>
<li>Callohuari, Y. T., Seiter, N. J., Gibson, J. C., Becker, T. M., Kaufmann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+3D+models+in+teaching+insect+morphology+and+identification%3A+a+case+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Integr+Pest+Manag%22%5BJournal%5D)">The use of 3D models in teaching insect morphology and identification: a case study.</a> J Integr Pest Manag. 16 (1), 32(2025).</li>
<li>Bron, G. M., Fenelon, H., Paskewitz, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+recognition+of+the+vector+of+Lyme+disease+using+resin-embedded+specimens+in+a+Lyme+endemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Assessing recognition of the vector of Lyme disease using resin-embedded specimens in a Lyme endemic area.</a> J Med Entomol. 58 (2), 866-872 (2021).</li>
<li>Smith, J. H., Coyle, D., Thomason, J., Matthews, T., Riggins, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Geocaching%3A+a+new+instructional+tool+for+natural+resources+extension+and+outreach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ext%22%5BJournal%5D)">Geocaching: a new instructional tool for natural resources extension and outreach.</a> J Ext. 59 (3), 16(2021).</li>
<li>Burgmans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embedding+entomological+specimens+in+an+improved+polyester+resin%5BTitle%5D)+AND+%22N+Z+Entomol%22%5BJournal%5D)">Embedding entomological specimens in an improved polyester resin.</a> N Z Entomol. 4 (1), 61-66 (1968).</li>
<li>Miles, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preservation+of+insect+and+plant+specimens+in+transparent+plastics%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Preservation of insect and plant specimens in transparent plastics.</a> Plant Pathol. 1, 65-68 (1952).</li>
<li>Bejcek, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clear+resin+casting+of+arthropods+of+medical+importance+for+use+in+educational+and+outreach+activities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Clear resin casting of arthropods of medical importance for use in educational and outreach activities.</a> J Insect Sci. 18 (2), 34(2018).</li>
<li>Maulana, A. A., Damayanti, D. R., Zanuba, A. F., Gumilang, F. K., Megasari, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioplastic+resin+as+a+preservation+medium+for+insect+comparative+effectiveness+of+polyester+resin+and+catalysts%5BTitle%5D)+AND+%229th+Int+Semin+Res+Month+2024.+NST+Proc%22%5BJournal%5D)">Bioplastic resin as a preservation medium for insect comparative effectiveness of polyester resin and catalysts.</a> 9th Int Semin Res Month 2024. NST Proc. , 208-213 (2025).</li>
<li>Gourichon, B., Binetruy, C., Krawczak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+numerical+procedure+to+predict+dynamic+void+content+in+liquid+composite+molding%5BTitle%5D)+AND+%22Compos+Part+A+Appl+Sci+Manuf%22%5BJournal%5D)">A new numerical procedure to predict dynamic void content in liquid composite molding.</a> Compos Part A Appl Sci Manuf. 37 (11), 1961-1969 (2006).</li>
<li>Upton, M. S., Mantle, B. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aUpton%2C+MS+%22Methods+for+Collecting%2C+Preserving+and+Studying+Insects+and+Other+Terrestrial+Arthropods%22">Methods for Collecting, Preserving and Studying Insects and Other Terrestrial Arthropods</a>. , 5th ed, Paragon Printers Australasia; The Australian Entomological Society. (2010).</li>
<li>Gullan, P. J., Cranston, P. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGullan%2C+PJ+%22The+Insects%3A+An+Outline+of+Entomology%22">The Insects: An Outline of Entomology</a>. , Blackwell Science Ltd. 405-421 (2000).</li>
</ol>

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do ujawnienia.

Przygotowanie okazów
Metody konserwacji mogą zależeć od badanego okazu. Typowe metody konserwacji próbek obejmują stosowanie 70% etanolu lub zamrażanie, które są kompatybilne z osadzeniem żywicy. Metody te są przydatne w zachowaniu kluczowych cech okazu, takich jak ubarwienie, łuski, włoski i inne cechy fizyczne.
Przygotowanie warstw żywicy i umiejscowienie próbki 
Przy użyciu żywicy optymalne są formy si...

Nieuszkodzone, wysokiej jakości okazy są kluczowym źródłem do nauki umiejętności rozpoznawania stawonogów przez uczestników 1,2. Często kolekcje dydaktyczne zawierają delikatne okazy przypięte lub spiczaste, które mogą brakować kluczowych cech podczas częstego kontaktu lub mogą być trudne do obserwacji z różnych kątów, aby zrozumieć przestrzenne relacje kluczowych cech identyfikujących3. Mogą one być frustrujące zarówno dla uczniów, jak i nauczycieli, a rzadkie, trudne do zebrania i nielokalne gatunki mogą być ograniczone lub całkowicie nieobecne w kolekcjach dydaktycznych z obawy przed zniszczeniem próbek.
Oprócz formalnego, instytucjonalnego nauczania, edukacja społeczeństwa jest częścią misji wielu programów akademickich i rozszerzonych, praktyk medycznych i weterynaryjnych, parków i centrów przyrodniczych, muzeów oraz okręgów kontroli komarów i wektorów 4,5. W takich sytuacjach kluczowe są trwałe zachowane okazy, dlatego optymalnie jest pokazywać takie, które przetrwają bezpośrednie badania przez dzieci, przypadkowe uszkodzenia lub upadki. Okazy owadów przypięte lub spiczaste nie oferują trwałości potrzebnej w tych kontekstach edukacyjnych, a okazy w płynnym konserwantze, takim jak etanol, są trudne do oglądania przez pojemniki oraz trudne do wyjmowania i manipulacji. Biorąc pod uwagę, że modele 3D owadów wykazują efekt poprawy edukacji uczniów6, zapewnienie uczniom wysokiej jakości stawonogów konserwowanych w żywicy również powinno przynieść korzyści. Niedawne badanie Bron i in. wykorzystało kleszcze i inne stawonogi osadzone w żywicy do oceny zdolności społeczeństwa do rozpoznawania wektorów kleszczytypu 7. Inny projekt wykorzystał owady z żywicy osadzone w obcych lasach (tzw. 'wędrówki') umieszczone w geocache, aby zwiększyć świadomość na temat obcych szkodników leśnych8. Prace te opierają się na wcześniejszych entomologach, którzy od dekad opracowywali protokoły osadzania owadów w żywicy,czyli 9,10. Podczas pracy z różnymi stawonogami przy opracowywaniu naszego protokołu odkryliśmy, że delikatne owady z łuskami (np. komary) są trudniejsze do osadzenia w żywicy, ponieważ łuski i kończyny często tracą podczas fazy wylewania żywicy. Ponadto okazy przechowywane w etanolu przez dłuższy czas są mniej idealne do użycia w osadzaniu żywicy, ponieważ etanol zaciera ubarwienie ważne do identyfikacji (np. ozdobne wzory na scuta kleszczy).
Aby rozszerzyć nasze kolekcje dydaktyczne stawonogów zarówno do formalnej nauki w klasach (np. entomologia medyczna i weterynaryjna), jak i programów edukacyjnych i edukacyjnych dla społeczeństwa, opracowaliśmy protokół dla wyraźnego odlewania stawonogów11. Opublikowaliśmy te metody, ponieważ większość firm komercyjnych produkujących owady w żywicy zachowuje swoje protokoły w tajemnicy. Od czasu naszej publikacji w 2018 roku zakupiliśmy dodatkowy sprzęt i dodatkowo zoptymalizowaliśmy protokół, który jest obecnie prezentowany tutaj. W Tabeli Materiałów przedstawiamy cały sprzęt i materiały eksploatacyjne używane w tym protokole.

<table><tbody><tr><td>Sprężarka powietrza</td><td>California Air Tools CAT-1P1060S Light & Cicha przenośna sprężarka powietrza, srebrna</td><td>California Air Tools</td><td><a href="https://a.co/d/07y4iGha">https://a.co/d/07y4iGha</a></td></tr><tr><td>Wąż sprężarki powietrza</td><td>California Air Tools HFH25.25 Hybrider Flex 1/4 cala 25 stóp hybrydowy wąż powietrzny z szybkozłączkami powietrznymi, niebieski</td><td>California Air Tools</td><td><a href="https://a.co/d/0cboxu7J">https://a.co/d/0cboxu7J</a></td></tr><tr><td>Piła taśmowa</td><td>G0803 9" Piła taśmowa stołowa</td><td></td><td><a href="https://www.grizzly.com/products/grizzly-9-benchtop-bandsaw-w-laser-guide-quick-release/g0803z">https://www.grizzly.com/products/grizzly-9-benchtop-bandsaw-w-laser-guide-quick-release/g0803z (Analog Machine)</a></td></tr><tr><td>Szlifierka taśmowa</td><td>Bucktool 1 x 30 cali szlifierka taśmowa z tarczą 5 cali z kluczem do przechowywania i łatwym zdejmowaniem pokrywy na pasek</td><td>Bucktool</td><td><a href="https://a.co/d/017GmVQI">https://a.co/d/017GmVQI</a></td></tr><tr><td>Koło polerujące</td><td>6-calowy benchtop buffer Heavy Duty 1/2 HP; Zawiera dwa koła polerujące</td><td>Centralna Maszyna</td><td><a href="https://a.co/d/0iGsbSCu">https://a.co/d/0iGsbSCu</a></td></tr><tr><td>Szlifierka tarczowa</td><td>Szlifierka tarczowa BUCKTOOL 5.0A o wymiarach 4 cale x 36 cali i 6 cali z silnikiem bezpośrednim napędem 3/4HP i przenośną bazą AL</td><td>Bucktool</td><td><a href="https://a.co/d/08AsKXva">https://a.co/d/08AsKXva</a></td></tr><tr><td>Polerowanie kółka x2</td><td>Wymiana klocków do koła polerującego</td><td>Enkay</td><td><a href="https://a.co/d/07WajxZ5">https://a.co/d/07WajxZ5</a></td></tr><tr><td>Garnek ciśnieniowy</td><td>CALIFORNIA AIR TOOLS 255C, 2,5 galona garnka ciśnieniowa do odlewów, niebieska</td><td>California Air Tools</td><td><a href="https://a.co/d/0j3vGi3P">https://a.co/d/0j3vGi3P</a></td></tr><tr><td>Odkurzanie w sklepie, żeby zbierać kurz</td><td>BUCKTOOL 1.2 HP Auto Start 750CFM Zbieracz kurzu z 3 workami do odprowadzania kurzu, o pojemności 5.4 sześciennej i reduktorem 5 PCS do stolarstwa DC50</td><td>Bucktool</td><td><a href="https://a.co/d/0cEA39ii">https://a.co/d/0cEA39ii</a></td></tr><tr><td>Kąpiel wodna</td><td>JOANLAB cyfrowa termostatyczna kąpiel wodna</td><td>JoanLab</td><td><a href="https://a.co/d/0gJLNyWG">https://a.co/d/0gJLNyWG</a></td></tr><tr><td><silne>Przedmioty jednorazowe</silne></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Polerowanie kół do polerowania, czerwony</td><td>SCOTTCHEN Red Buffing Polerowanie Pasta tnąca gruba, Jewelry Rouge</td><td>Scottchen</td><td><a href="https://a.co/d/caLtcNL">https://a.co/d/caLtcNL</a></td></tr><tr><td>Polerowanie kół do polerowania, białe</td><td>D2903 Pasta polerująca 1-funtowa</td><td>Woodstock</td><td><a href="https://a.co/d/061T4kWU">https://a.co/d/061T4kWU</a></td></tr><tr><td>Półmaska respiratora</td><td>3M Rugged Comfort Quick Latch Half-faceset Respirator wielokrotnego użytku 6502QL, NIOSH</td><td>3M</td><td><a href="https://a.co/d/0g3wMldi">https://a.co/d/0g3wMldi</a></td></tr><tr><td>Filtry półmaski</td><td>Filtr cząstek 3M P100 Ochrona Układu Oddechowego, 2097/071184 (AAD)</td><td>3M</td><td><a href="https://a.co/d/05a6ydbM">https://a.co/d/05a6ydbM</a></td></tr><tr><td>Żywica</td><td>Przezroczysta żywica odlewnicza, plastik z tapu</td><td>Tap Plastic</td><td><a href="https://www.tapplastics.com/product/mold_making_materials/casting_products/tap_clear_lite_casting_resin/75">https://www.tapplastics.com/product/mold_making_materials/casting_products/tap_clear_lite_casting_resin/75</a></td></tr><tr><td>Katalizator żywiczny</td><td>Płynny katalizator MEKP, plastik z kranu</td><td>Tap Plastic</td><td><a href="https://www.tapplastics.com/product/fiberglass/polyester_resins/tap_mekp_liquid_catalyst/40">https://www.tapplastics.com/product/fiberglass/polyester_resins/tap_mekp_liquid_catalyst/40</a></td></tr><tr><td>Żywica i Katalizator żywiczny (alternatywa)</td><td>Przezroczysta żywica UV do odlewania, Solarez (w zestawie MEKP Catalyst)</td><td>Solarez</td><td><a href="https://solarez.com/solarez-clear-casting-uv-resin.html">https://solarez.com/solarez-clear-casting-uv-resin.html</a></td></tr><tr><td>Taśmy szlifierskie</td><td>Ścierniki Red Label 4 x 36 w 600 grit węglik krzemu</td><td>Ścierniki Red Label</td><td><a href="https://a.co/d/0hkYmjI7">https://a.co/d/0hkYmjI7</a></td></tr><tr><td>Tarcze szlifierskie</td><td>1 x 30 o ziarnistości 2000 o ziarnistości 9 mikronów niebieski pas polerski z amortyzowanym ultraelastycznym podkładem z mylaru</td><td>Zapas do ostrzenia Pro</td><td><a href="https://a.co/d/01pCnNnN">https://a.co/d/01pCnNnN</a></td></tr><tr><td>Tarcze szlifierskie</td><td>Norton Metalite R228 PSA Disk, klej czuły na ciśnienie, tlenek glinu, 5' &rsquo; Średnica, ziarnistość 80</td><td>Norton</td><td><a href="https://a.co/d/0cqqdpMq">https://a.co/d/0cqqdpMq</a></td></tr><tr><td>Formy silikonowe</td><td>Formy silikonowe kwadratowe do żywicy, duże formy żywicowe, błyszczące formy głębokie kwadratowe 6,6''x 2'' w (z 2 małymi formami kwadratowymi lub prostokątnymi)</td><td></td><td><a href="https://a.co/d/06Qasc1G">https://a.co/d/06Qasc1G</a></td></tr><tr><td>Arkusze przezroczystości</td><td>Przezroczysta folia przezroczysta do druku OHP 8,5 x 11 cali dla projektorów nagłownych, dla drukarek laserowych</td><td>Craftiff</td><td><a href="https://a.co/d/07L2g0AT">https://a.co/d/07L2g0AT</a></td></tr></tbody></table>

przezroczyste odlewy stawonogów z żywicy do wykorzystania w edukacji, popularyzacji i badaniach

Clear Resin Casting of Arthropods for Use in Education, Outreach, and Research

W naszych wcześniejszych pracach opublikowano protokół tworzenia stawonogów osadzonych w żywicy o znaczeniu medycznym, przeznaczonych do działań edukacyjnych i edukacyjnych. Protokół ten został przyjęty przez różne inicjatywy mające na celu stworzenie techniki montażu, która minimalizuje uszkodzenia stawonogów, tworzy bezpieczny produkt do obsługi oraz zachowuje możliwość rozpoznania cech morfologicznych do identyfikacji. Nasz protokół ewoluował i obecnie tworzy stawonogi osadzone w żywicy, o lepszej jakości dzięki zakupowi dodatkowego sprzętu i modyfikacjom procesów. Przedstawiamy ten ulepszony protokół wraz z krokami minimalizującymi ilość bąbelków, dostosowaniem do różnych typów stawonogów oraz tworzeniem końcowych, wypolerowanych bloków z widocznością z sześciu stron. Przedstawiamy również zagrożenia dotyczące bezpieczeństwa biologicznego, takie jak opary podczas utwardzania żywicy, używanie elektronarzędzi oraz kurz powstający podczas szlifowania i polerowania bloków żywicy. Ten wizualizowany protokół ułatwi przyjęcie przezroczystego odlewu stawonogów do szerszej społeczności. Lista sprzętu i materiałów eksploatacyjnych, które przyjęliśmy przez kilka lat prób i błędów, pozwoli innym programom ocenić, czy protokół ten jest realną opcją do wdrożenia.

Próbki z powodzeniem osadzone są otoczone przezroczystą i bezbarwną żywicą, a wszystkie boki są gładkie. Próbka będzie wyraźnie widoczna z każdej strony bloku żywicy. Cechy okazów ważne do identyfikacji, takie jak wzory kolorystyczne, kształt i rozmiar łusek oraz inne cechy anatomiczne, będą widoczne za pomocą mikroskopu rozcinającego. Mniej pożądane cechy powstałych stawonogów w żywicy czasem pojawiają się, gdy na okaz pojawia się warstwa pęcherzyków powietrza, brakuje łusek, brakuje czę...

Tutaj przedstawiamy kluczowe kroki w procesie tworzenia wysokiej jakości stawonogów osadzonych w żywicy, przeznaczonych do nauczania i popularyzacji.

Przezroczyste odlewy stawonogów z żywicy do wykorzystania w edukacji, popularyzacji i badaniach

Our prior work published a protocol for creating resin-embedded arthropods of medical importance for use in educational and outreach activities. This ...

Celem tego protokołu jest osadzenie owadów i innych stawonogów w żywicy, tworząc optycznie przezroczystą ilość widoczną ze wszystkich sześciu stron. A to ma na celu edukację zarówno studentów, jak i społeczeństwa. Owady o miękkim ciele lub delikatne trudniej zachowują cechy morfologiczne i minimalizują pęcherzyki powietrza podczas osadzania się w żywicy.Na początek usuń kleszcze z 70% etanolu. Umieść dorosłe i nimfowe kleszcze usunięte z etanolu między dwoma szkiełkami mikroskopu i delikatnie naciskaj po obu stronach, aby usunąć nadmiar etanolu z organizmu. Przełóż kleszcza na płaską powierzchnię i pozwól mu wyschnąć przez co najmniej pięć minut, zanim włożysz go do żywicy.Umieść larwy lub poczwarki z kolonii komarów lub próbek zebranych w terenie do wody wewnątrz komory wylężowej. Po elokcji włóż komary do zamrażarki, aby je zabić. Następnie wyjmij komary z zamrażarki i pozostawij je w temperaturze pokojowej na co najmniej pięć minut, zanim zanurzą je w żywicy.Gdy będą gotowe do zanurzenia w żywicy, zbierz świeżo wyklute dorosłe komary z górnej komory kubka wynurzającego. Następnie usuń z etanolu larwy komarów lub innych Diptera i namocz je w katalizatorze żywicy przez co najmniej 20 minut, zanim zanurzę w żywicy. W przypadku innych stawonogów zdecyduj, czy postępować zgodnie z krokami przygotowawczymi dla kleszcza lub komarów, biorąc pod uwagę kruchość cech zewnętrznych.Twórz etykiety z wymaganymi informacjami, takimi jak nazwy naukowe i etapy cyklu życia. Drukuj etykiety na arkuszach przezroczystych za pomocą drukarki laserowej, a nie atramentowej, i tnij etykiety na odpowiedni rozmiar. Dla ogólnych okazów używaj czcionki wielkości osiem w Times New Roman kursywą, a dla cykli życia lub większych korpusów zastosuj czcionkę o rozmiarze 12 w Times New Roman kursywą.W przypadku kolekcji edukacyjnych umieść kody QR o jednym centymetrze kwadratowym na etykietach, które po zeskanowaniu za pomocą smartfona prowadzą do strony internetowej z informacjami o gatunku. Załóż rękawice nitro przed dotykiem nieutwardzonej żywicy lub katalizatora. Włóż drewniany blok do garnka ciśnieniowego, aby podnieść powierzchnię i ustawić silikonowe formy.Odmierz około 60 mililitrów żywicy do plastikowego kubka i wlej żywicę do plastikowej miski. Wstaw miskę do kąpieli wodnej ustawionej na 32 stopnie Celsjusza na 5 do 10 minut. Dodaj 12 kropel katalizatora równoważnego około 540 mikrolitrów do podgrzanej żywicy w plastikowej misce.Następnie użyj plastikowej łyżki, aby powoli i ostrożnie mieszać żywicę i katalizator przez około minutę. Teraz wlej żywicę i mieszankę katalizatora do silikonowej formy, która jest umieszczana na drewnianym bloku wewnątrz garnka ciśnieniowego. Poczekaj około 5 do 20 minut, aż żywica stanie się lepka i zacznie twardnieć, zanim włożę próbkę.Następnie umieść próbkę w centrum pierwszej warstwy żywicy, dbając o to, aby cechy diagnostyczne, takie jak kulistości czy kończyny, były odpowiednio ukierunkowane dla wyraźnej widoczności. Następnie umieść wydrukowaną etykietę na pierwszej warstwie żywicy blisko próbki, zgodnie z pożądaniem. Przygotuj drugą mieszankę katalizatora żywicy, jak pokazano wcześniej, i powoli wylewaj na próbkę wzdłuż wewnętrznych krawędzi formy, wypełniając pozostałą przestrzeń.Dostosuj pozycję kończyn okazu, takich jak nogi, skrzydła czy czułki, w zależności od potrzeby, zanim żywica całkowicie wytwardzi się. Dobrze zamknij pokrywkę garnka ciśnieniowego. Naciskaj, aż manometr pokaże 60 funtów na cal kwadratowy i utwardzaj przez około 24 godziny.Po utwardzeniu odciśnij garnek i ostrożnie wyjmij formy. Wyjmij utwardzone bloki żywicy z silikonowych form i pozwól im odpocząć w temperaturze pokojowej do czasu dalszego przetwarzania. Używając piły taśmowej, przytnij bloki żywicy na pożądane wymiary i zeszlifuj wszystkie sześć boków każdego bloku żywicy szlifierką tarczową.Powtarzaj szlifowanie ze wszystkich stron szlifierką taśmową o wymiarach 4 na 30 cali i 600 grubości, a następnie szlifierką taśmową 1 na 30 cali o ziarnistości 2 000 cali. Następnie delikatnie przyłóż czerwony patyczek do polerowania tlenkiem glinu na obracającym się kole polerskim przez kilka sekund. Następnie przytrzymaj blok żywicy przy kółku polerującym pod kątem 45 stopni, aby zacząć polerowanie.Użyj szmatki lub materiału, aby zetrzeć nadmiar lakieru ze wszystkich stron bloku żywicy. Powtórz etapy polerowania za pomocą drugiego koła polerowania i białego diamentowego poleszczka, i kontynuuj polerowanie, aż kolorowa warstwa z czerwonego lakieru zostanie całkowicie usunięta. Próbki z powodzeniem osadzone były otoczone przezroczystą i bezbarwną żywicą, ze wszystkimi bokami gładkimi, a próbka wyraźnie widoczna z dowolnego kąta bloku żywicy.Widoczne były cechy ważne do identyfikacji, takie jak wzory kolorystyczne, skala, kształt i rozmiar oraz inne szczegóły anatomiczne. Tak wiele programów edukacyjnych i rozszerzonych wymaga, by te owady mogły edukować uczniów i społeczeństwo. Problem polega na tym, że nie da się ich kupić. Nie ma żadnych źródeł komercyjnych.Przestrzeganie tego protokołu pozwala ludziom korzystać ze sprzętu i zasobów, aby uzyskać te wysokiej jakości okazy. Dlatego umieszczenie tych owadów w stawonogach ma dużą wartość dzięki szkoleniu profesjonalistów w różnych dziedzinach, aby mogli morfologicznie rozpoznawać te owady. Ale także gdy członkowie społeczeństwa mogą je zidentyfikować, to dodaje wiele wartości dzięki różnym programom społecznym.Protokół osadzania owadów w żywicy bardzo się rozwinął w ostatnich latach tutaj, na Uniwersytecie Texas A&M. Uważamy to za żywy protokół i przewidujemy, że będzie się on dalej rozwijał i zmieniał dzięki nowym narzędziom i technologiom.

clear-resin-casting-arthropods-for-use-education-outreach

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Opracowaliśmy dwie metody badania wpływu bodźców wzrokowych na zachowanie w warunkach braku bodźców dotykowych i chemicznych. Pierwsza metoda polega na filmowaniu reakcji raków na odbijające światło ścianki akwarium; druga bada wpływ bodźców wzrokowych dostarczanych przez żywego raka znajdującego się za przezroczystą przegrodą.

Rejestracja reakcji behawioralnych na odbicie u raków

Udostępniamy technikę zachowania nienaruszonego łyka drzewnego i przygotowania go do obserwacji.  Tworzymy aparat zwany kanapką łyka, który pozwala na wprowadzenie i obserwację stawonogów, drobnoustrojów i innych organizmów zasiedlających tkanki łyka.

Technika badania zbiorowisk stawonogów i mikroorganizmów w tkankach drzew

Protokoły szybkiej oceny biologicznej wykorzystujące makrobezkręgowce bentosowe są często używane do monitorowania i oceny jakości wody. Skuteczny protokół obejmuje kolekcje wysięków poczwarkowych Chironomidae unoszących się na powierzchni (SFPE). Opisano tu techniki zbierania w terenie, obróbki laboratoryjnej, montażu szkiełek i identyfikacji Chironomidae SFPE.

Wykorzystanie pływających powierzchniowo wysięków poczwarkowych Chironomidae (Dipterae) jako protokołu szybkiej oceny biologicznej zbiorników wodnych

Białka są często używane do oznaczania stawonogów do badań nad rozprzestrzenianiem się. Przedstawiono metody podawania wewnętrznych i zewnętrznych znaczników białkowych na stawonogach. Przedstawiono również techniki wykrywania znaczników białkowych, zarówno za pomocą pośrednich lub kanapkowych testów immunoenzymatycznych (ELISA).

Podawanie i wykrywanie śladów białkowych na stawonogach w celu badań nad dyspersją

Udostępniamy proste i solidne protokoły przetwarzania materiału biopsyjnego różnych gatunków, zarodków organizmów modelowych biomedycznych i próbek innych tkanek organicznych, aby umożliwić cyfrowe generowanie danych objętościowych za pomocą metody mikroskopii episkopowej o wysokiej rozdzielczości.

Mikroskopia episkopowa o wysokiej rozdzielczości (HREM) - proste i niezawodne protokoły przetwarzania i wizualizacji materiałów organicznych

Ten manuskrypt opisuje zWEDGI (Urządzenie do Zranienia i Uwięzienia Danio Zebra dla Wzrostu i Obrazowania), które jest urządzeniem przeznaczonym do orientacji i krępowania larw danio pręgowanego. Konstrukcja pozwala na przecięcie ogona i długoterminowe zbieranie obrazów z mikroskopii fluorescencyjnej o wysokiej rozdzielczości, przedstawiających gojenie się i regenerację ran.

Długoterminowe urządzenie do obrazowania na żywo do lepszej eksperymentalnej manipulacji larwami danio pręgowanego

Opracowaliśmy protokoły i zaprojektowaliśmy niestandardowe urządzenie, aby umożliwić osadzanie próbek w skali milimetrowej. Przedstawiamy procedury przygotowania próbek z naciskiem na zatapianie w rurkach z żywicy akrylowej i poliimidu w celu uzyskania sztywnego unieruchomienia i długotrwałego przechowywania próbek w celu zbadania architektury tkanek i morfologii komórek za pomocą mikro-CT.

Sztywne osadzanie utrwalonych i barwionych, całych próbek w skali milimetrowej do bezsekcyjnej histologii 3D za pomocą mikrotomografii komputerowej

Celem tego protokołu jest manipulowanie wzorami kolorów skaczących pająków i innych bardzo małych stawonogów za pomocą farby, w celu zbadania zagadnień związanych z doborem płciowym, kanibalizmem seksualnym, drapieżnictwem, aposematyzmem lub jakąkolwiek inną dziedziną ubarwienia zwierząt.

Manipulacja wzorami kolorystycznymi u skaczących pająków do wykorzystania w eksperymentach behawioralnych

Ten artykuł przedstawia zestaw technik rekonstrukcji okazów kopalnych przy użyciu kompozytów z żywicy papierowej. Kompozyty te powstają poprzez połączenie papieru archiwalnego z żywicami termoplasticznymi powszechnie używanymi w laboratoriach przygotowawczych kopalień. Uzyskane lekkie kompozyty zapewniają długoterminową stabilność próbek, jednocześnie zachowując przydatność do analiz radiologicznych.

Wykorzystanie archiwalnego papieru japońskiego i żywic termoplastycznych do przygotowania skamieniałości do przechowywania, ekspozycji, transportu i radiografii

W niniejszym raporcie proponujemy nowe zastosowanie światłoutwardzalnych żywic stomatologicznych do mocowania podstawy elektrod lub sond do mikrodializy w eksperymentach chronicznych. Materiał ten umożliwia bezpośrednie wiązanie z czaszką.

Zastosowanie światlutowalnej żywicy do wiązania stomatologicznego do mocowania elektrod lub sond mikrodializacyjnych w eksperymentach przewlekłych

Naucz się metody zatapiania stawonogów w żywicy do celów edukacyjnych i popularyzacji nauki. Technika zachowuje cechy morfologiczne delikatnych owadów, minimalizując pęcherzyki powietrza.

Przezroczyste odlewy stawonogów z żywicy do wykorzystania w edukacji, popularyzacji i badaniach

Przeglądaj więcej filmów