Modele myszy zapalenia najądrza wywołanego przez wzorce molekularne związane z patogenem
12 grudnia 2025
Opisano tutaj dwa odrębne modele chirurgicznych zastrzyków służących do wywołania bodźców zapalnych w segmencie początkowym (zastrzyk śródmiąższowy) oraz w cauda gididymidis (zastrzyk dotaczny) myszy. Metody te umożliwiają badania reakcji specyficznych dla regionu w różnych obszarach najądrza.
Badamy wpływ stanu zapalnego na fizjologię najądrza w płodności mężczyzn. Precyzyjne, kompartmentalizowane wstrzykiwanie środków wywołujących stan zapalny bez uszkodzeń. Przewód najądrza w modelach myszy wymaga zaawansowanego połączenia umiejętności chirurgicznych i szkolenia.
Na początek umieść znieczulone zwierzę w pozycji leżącej na polu operacyjnym. Za pomocą elektrycznego podkaszaka wykonaj trychotomię odwłoka myszy, aby całkowicie usunąć futro. Następnie użyj bezpłodnej bawełny nasączonej roztworem 0,25% chlorheksydyny.
A potem z alkoholem do asepsy brzucha. Skalpelem w rozmiarze 15 wykonaj około czteromilimetrowego pionowego nacięcia po prawej stronie ściany brzucha. Teraz delikatnie rozdziel skórę za pomocą skośnych, tępych szczypiec chirurgicznych.
Następnie, używając tego samego skalpela, wykonuj kolejne około czteromilimetrowe pionowe nacięcie na otrzewnej po boku pierwszego nacięcia. Ostrożnie unieś najądrze w jądrze z jamy brzusznej, delikatnie naciskając prawą stronę moszny. Za pomocą zakrzywionych szczypiec chirurgicznych delikatnie pociągnij białą tkankę tłuszczową w najedrzu, aby zlokalizować początkowy segment najedrza.
Przy pomocy białej tkanki tłuszczowej najądrza odsłonić początkowy segment w miejscu nacięcia. Następnie ustawij strzykawkę Hamiltona z roztworem do wstrzykiwania pod kątem około 90 stopni równolegle do segmentu numer jeden segmentu początkowego. Ostrożnie włóż igłę w przestrzeń międzymiąższową, fazując ją w dół.
Następnie umieść zakrzywione szczypce chirurgiczne w miejscu wbicia igły i delikatnie uszczypnij torebkę najądrza oraz igłę. Powoli naciskaj tłok strzykawki, aż cały roztwór bodziecowy zostanie wstrzyknięty. Utrzymując zakrzywione szczypce chirurgiczne na miejscu, ostrożnie wyjmij igłę i zwolnij zakrzywione szczypce chirurgiczne po około 30 sekundach.
Następnie, używając białej tkanki tłuszczowej najądrza, delikatnie przeprowadź tkankę jądrową do jamy brzusznej. Zidentyfikuj otrzewną i zamknij ją, wykonując dwa szwy szwowe za pomocą uchwytu na igły i szwu chirurgicznego rozmiaru pięć-00, a nacięcie skórne zamknij dwoma szwami szwającymi. Po operacji obserwuj mysz, aby zapewnić odpowiednią rekonwalescencję po operacji.
Po podaniu znieczulenia ułóż mysz w pozycji leżącej na polu operacyjnym. Połóż palec wskazujący i kciuk poniżej moszny, aby obpalpować i potwierdzić pozycję jąder oraz najądrza. W razie potrzeby delikatnie masuj boki brzucha w kierunku moszny, aby ustawić jądra i najądrze na właściwe miejsce.
Za pomocą elektrycznego trymera wykonaj trichotomię moszny, aby całkowicie usunąć włosy i zdezynfekować miejsce sterylną watą nasączoną w roztworze chlorheksydyny 0,25%, a następnie alkoholem. Palcem wskazującym i kciukiem pod moszną delikatnie rozciągaj skórę moszny. Używając skalpela rozmiaru 15, wykonaj około dwumilimetrowego pionowego nacięcia na przyśrodkowej części moszny.
Teraz delikatnie przesuń lewe jądro i najądrze z powrotem do jamy brzusznej, pozostając jednocześnie prawym jądrem i najedrzem w mosznie. Z palcem wskazującym i kciukiem umieszczonym poniżej prawego jądra i najądrza, delikatnie rozciągaj skórę moszny. Następnie, używając skośnych, tępych szczypiec chirurgicznych, ostrożnie otwieraj i zamykaj końcówki na wewnętrznej powięzi plemniczej, aby przerwać wewnętrzną powięzi plemną i tunikę pochwową.
Następnie odciąż nacisk palca wskazującego i kciuka oraz wprowadź skośne szczypce chirurgiczne przez otwór tuniki pochwy w kierunku podstawy moszny. Za pomocą kleszczy ostrożnie wyciągnij dalszy tłuszcz najądrza, aby zlokalizować najądrze ogonowe. Teraz zlokalizuj nasienie i umieść proste kleszcze chirurgiczne pod nim.
Załóż pęsetę buldoga na nasienie nasieniodawców, zapewniając wystarczającą przestrzeń między najedrzem ogonowu a zaciskiem. Następnie ustaw strzykawkę Hamiltona z wcześniej załadowanym roztworem do wstrzykiwania pod kątem około 10 do 15 stopni równolegle do nasieniowodosie, a igłę włóż w naczyniowodzie tak, że faza jest skierowana do góry. Delikatnie ściśnij proste szczypce chirurgiczne, aby uwolnić nasiewosie, i powoli wciśnij tłok strzykawki, aby wstrzyknąć cały roztwór bodziec.
Teraz usuń proste szczypce chirurgiczne. Używając zakrzywionych szczypiec chirurgicznych, delikatnie ściśnij okolice miejsca wbicia igły, a następnie ostrożnie wyjmij igłę strzykawki. Po około 30 sekundach usuń zakrzywione szczypce chirurgiczne i pęsetę bulldoga i delikatnie odłóż naczyniowód do moszny.
Następnie zidentyfikuj tunikę pochwową i zamykaj ją jednym ściegiem, używając uchwytu na igły i chirurgicznego szwu w rozmiarze 500. Palcem wskazującym delikatnie wpchnij prawe jądro i najedrze z powrotem do jamy brzusznej oraz przesuń lewe jądro i najedrze do moszny. Na koniec zamknij nacięcie skóry moszny dwoma szwami szwowymi za pomocą uchwytu na igły i szwów chirurgicznych rozmiaru 50 i obserwuj mysz, aby zapewnić prawidłową rekonwalescencję po operacji.
Wstrzyknięcie śródmiąższowe w początkowym segmencie spowodowało, że wstrzyknięty niebieski barwnik Evansa był ograniczony głównie do pierwszego segmentu przez maksymalnie 30 minut po wstrzyknięciu, a następnie dyfundował do sąsiednich segmentów początkowego segmentu i najądrza caput. Iniekcja wewnątrznaczyniowa do naczyniowodosiewowego nasiewia uwięziła niebieski barwnik Evansa w lumencie segmentu 10 na maksymalnie 30 minut po wstrzyknięciu. Histologiczne mikrografie fotograficzne potwierdziły, że zastrzyki kontrolowane solą fizjologiczną nie zmieniły morfologii najądrza najądrza 72 godziny po leczeniu.
Iniekcja z LPS śródmiąższowego w początkowym segmencie wywołała obrzęk śródmiąższowy, a intensywne infiltracje komórek odpornościowych śródmiąższowych, śródbłonkowych i śródświatłowych 72 godziny po leczeniu. Wstrzyknięcie LPS lub LTA do śródbłonka w ogono wywołało obrzęk śródmiąższowy oraz infiltracje komórek odpornościowych w przedziałach śródmiąższowych i śródświatłowych 72 godziny po leczeniu. Brak powtarzalnych modeli zwierzęcych badających lokalizowane zapalenie najądrza i jego wpływ na płodność mężczyzn.
Bezpośrednie regionalne wstrzyknięcie substancji zapalnych wywołujących stan zapalny umożliwia precyzyjną analizę regionalnych odpowiedzi immunologicznych w wyniku najądrza.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
W tym artykule opisano dwa odrębne chirurgiczne modele iniekcji służące do wywoływania bodźców zapalnych w określonych regionach przysadki nasiennej myszy. Iniekcja śródmiąższowa ma na celu początkowy odcinek, natomiast iniekcja śródnaczyniowa skupia się na ogonie przysadki nasiennej. Metody te ułatwiają badanie regionalnie specyficznych reakcji w przysadce nasiennej.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neurobiologia
- Biologia
- Odpowiedź zapalna
Wprowadzenie
- Zrozumienie reakcji zapalnych w przysadce nasiennej ma kluczowe znaczenie dla zdrowia reprodukcyjnego.
- Różne regiony przysadki nasiennej mogą różnie reagować na bodźce zapalne.
- Istniejące modele mogą nie w pełni uwzględniać regionalnie specyficznych reakcji.
- Nowatorskie techniki chirurgiczne mogą wzmacniać badanie tych reakcji.
Cel badania
- Opracowanie chirurgicznych modeli do badania zapalenia w przysadce nasiennej.
- Porównanie reakcji między różnymi regionami przysadki nasiennej.
- Dostarczenie informacji na temat mechanizmów zapalenia w tkankach rozrodczych.
Wykorzystane metody
- Iniekcja śródmiąższowa w celu wywołania zapalenia w początkowym odcinku przysadki nasiennej.
- Iniekcja śródnaczyniowa w celu ukierunkowania na ogon przysadki nasiennej.
- Ocena reakcji zapalnych w obu modelach.
- Analiza regionalnie specyficznych efektów na funkcję przysadki nasiennej.
Główne wyniki
- Oba modele iniekcji skutecznie wywołały zapalenie.
- Zaobserwowano odmienne reakcje zapalne w początkowym odcinku w porównaniu z ogonem przysadki nasiennej.
- Wyniki sugerują, że przysadka nasienna ma regionalnie specyficzne mechanizmy radzenia sobie z zapaleniem.
- Modele te można wykorzystać do dalszych badań nad zdrowiem reprodukcyjnym.
Wnioski
- Opracowane modele chirurgiczne są skuteczne do badania zapalenia w przysadce nasiennej.
- Reakcje regionalnie specyficzne podkreślają złożoność procesów zapalnych w tkankach rozrodczych.
- Przyszłe badania mogą bazować na tych wynikach, aby zbadać interwencje terapeutyczne.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Region-specific mouse models of epididymitis induced by pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) provide a controlled platform for dissecting inflammatory mechanisms relevant to male infertility. These models enable mechanistic de-risking and target validation for interventions aimed at mitigating infection-driven reproductive dysfunction. Their strategic value lies in supporting predictive confidence for translational research and early-stage therapeutic hypothesis testing.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of inflammatory pathways implicated in male reproductive health.
- Supports functional target validation by isolating region-specific immune responses.
- Facilitates mechanistic de-risking for candidate targets linked to infertility.
- Provides a platform for hypothesis-driven exploration of pathogen-epididymis interactions.
Screening & Assay Development
- Establishes validated in vivo systems for quantifying inflammatory and functional endpoints.
- Supports assay standardization by enabling reproducible induction of region-specific inflammation.
- Enables quantitative assessment of sperm parameters and tissue responses.
- Prepares models for downstream compound screening targeting inflammatory mediators.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant mechanisms underlying infection-induced male infertility.
- Provides continuity from mechanistic discovery to preclinical evaluation of anti-inflammatory interventions.
- Supports risk-adjusted advancement of therapeutic candidates targeting reproductive tract inflammation.
- Enables biomarker identification for translational studies in male reproductive health.
Pipeline & Workflow Integration
These mouse models position within the early discovery to preclinical continuum, enabling hypothesis testing, target validation, and translational continuity for reproductive inflammation research.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis-driven testing of PAMP-induced inflammatory pathways in distinct epididymal regions.
- Screening: Provides reproducible, quantitative readouts for evaluating anti-inflammatory compounds.
- Analytics: Enables measurement of region-specific inflammatory markers and sperm quality metrics.
- Translational Research: Bridges mechanistic findings to preclinical validation of therapeutic strategies for male infertility.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable in vivo platform for diverse studies on infection-driven reproductive dysfunction.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in reproductive inflammation research.
- Operational Value: Standardizes induction and measurement of region-specific inflammatory responses.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions for anti-inflammatory and fertility-preserving interventions.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of reproductive health targets and candidates.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical techniques and rodent reproductive biology.
- Demands access to animal facilities and quantitative analytical infrastructure for inflammatory and sperm metrics.
- Necessitates cross-team standardization of injection protocols and endpoint analyses.
- Adaptation to other rodent models may require protocol optimization for anatomical differences.
- Limitations include species-specific responses and the need for careful interpretation of translational relevance.
