Name: Modele myszy zapalenia najądrza wywołanego przez wzorce molekularne związane z patogenem (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-12T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: Poznaj modele chirurgiczne zapalenia najądrza u myszy, wykorzystujące iniekcję międzytkankową i wewnątrznaczyniową. Metody te umożliwiają badanie odpowiedzi zapalnych w różnych regionach najądrza.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują Marii Angélice Spadella i Rosie Marii dos Santos Sabatini z Marília Medical School oraz Katedrze Strukturalnej i Funkcjonalnej Biologii Komórki, Morfologii IBB/UNESP, za pomoc techniczną w ocenie histopatologicznej. Helio Kushima i Paulo Mioni z Wydziału Biofizyki i Farmakologii, IBB/UNESP, za ich wsparcie techniczne. Natália Calixto Miranda Santos i Beatriz Rezende Santos z Wydziału Biofizyki i Farmakologii, IBB/UNESP, za pomoc przy sesji. Finansowane przez São Paulo Research Foundation (FAPESP, #2021/04746-3 oraz #2021/06718-7); częściowo przez Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES, #88887.657630/2021-00); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPQ, #303616/2022-9; 311179/2016-9).

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach przeprowadzono zgodnie z Przewodnikiem dotyczącym opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych (National Institute of Health, USA) oraz National Council for the Control of Animal Experimentation (CONCEA, Brazylia). Zatwierdzenie proceduralne zostało przyznane przez Komitet Etyki ds. Wykorzystania Zwierząt Doświadczalnych (CEUA-IBB/UNESP, Brazylia; numer protokołu: 6272050320; 2269040625). W tych badaniach wykorzystano dorosłych samców myszy C57BL/6 (90-120 dni). Odczynniki i sprzęt użyty w tym badaniu są wymienione w Tabeli Materiałów.
1. Wstrzyknięcie śródmiąższowe w początkowym odcinku najądrza
<ol>
	<li>Przygotowanie przedoperacyjne u myszy<ol>
		<li>Indukować znieczulenie ogólne ketaminą/ksylazyną (60/20 mg/kg, dożylnie). (zgodnie z zatwierdzonymi przez instytucjonalnie protokołami). Po znieczuleniu ułóż mysz na plecach na polu operacyjnym. UWAGA: Przed nacięciem mocno ściśnij palec u nogi, aby upewnić się, że nie pojawia się odruch pedału. Znieczulenie wziewne (np. izofluran) może być stosowane jako zastępstwo ketaminy/ksylazyny.</li>
		<li>Wykonaj trychotomię odwłoka myszy za pomocą kształtu elektrycznego trymera (rysunek 2A).</li>
		<li>Wykonaj asepsę brzuszną z użyciem sterylnej bawełny zwilżonej chlorheksydyną 0,25% (v/v) i alkoholem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wstrzyknięcie do przedziału śródmiąższowego segmentu początkowego<ol>
		<li>Używając skalpela rozmiaru 15, delikatnie wykonaj pionowe nacięcie o średnicy ~4 mm po prawej stronie ściany brzucha (Rysunek 2A). UWAGA: Uważaj na gruczoł naszywkowy.</li>
		<li>Za pomocą skośnych, tępych szczypiec chirurgicznych delikatnie oddziel skórę. Używając skalpela wielkości 15, delikatnie wykonaj pionowe nacięcie o średnicy ~4 mm na otrzewnej w miejscu pierwszego nacięcia w ścianie brzucha.</li>
		<li>Ostrożnie unieś najądrze i jądro do przestrzeni brzusznej, naciskając na prawą stronę moszny. UWAGA: Aby ułatwić następujące procedury, użyj albo opaski na głowie, albo mikroskopu stereoskopowego.</li>
		<li>Za pomocą chirurgicznych kleszczy zakrzywionych ostrożnie pociągnij białą tkankę tłuszczową najądrza (eWAT), aby zlokalizować początkowy segment najądrza. Za pomocą eWAT delikatnie odsłonij początkowy segment w miejscu nacięcia (Rysunek 2A).</li>
		<li>Ustawij strzykawkę Hamiltona, wstępnie załadowaną roztworem do wtrysku, pod kątem około 90° równoległym do segmentu #1 segmentu początkowego. Ostrożnie włóż igłę w przestrzeń międzymiąższową, ustawiając igłę skośną w dół (Rysunek 2A i Ilustracja uzupełniająca 1). UWAGA: Uważaj, aby nie przebić przewodu najądrza; Nie przechylaj igły.</li>
		<li>Umieść zakrzywione szczypce chirurgiczne w miejscu wkładania igły i delikatnie ściśnij torebkę najądrza oraz igłę. Powoli opuszczaj tłok strzykawki, aż cały roztwór bodźca zostanie wypchnięty (Rysunek 2A). UWAGA: Maksymalna objętość wtrysku: 10 μL.</li>
		<li>Utrzymując zakrzywione kleszcze chirurgiczne na miejscu, ostrożnie wyjmij igłę. Po ~30 sekundach usuń kleszcze do krzywizny chirurgicznej.</li>
		<li>Za pomocą eWAT delikatnie przywróć tkankę do jamy brzusznej. UWAGA: Nie ściskaj początkowego segmentu, tylko eWAT.</li>
		<li>Zlokalizuj otrzewną i wykonaj dwa ściegi szwowe za pomocą uchwytu na igły oraz chirurgicznego szwu w rozmiarze 5/0 (Rysunek Uzupełniający 1). UWAGA: Sprawdź, czy nacięcie w otrzewnej jest zamknięte; Jeśli trzeba, zrób kolejny ścieg.</li>
		<li>Zamknij nacięcie skóry dwoma szwami szwowymi za pomocą uchwytu na igły i szwów chirurgicznych w rozmiarze 5/0 (Rysunek 2A).</li>
		<li>Powtórz kroki 1.2.1-1.2.10, aby wykonać zastrzyk śródmiąższowy po lewej stronie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Opieka pooperacyjna<ol>
		<li>Obserwuj mysz po operacji, aby zapewnić odpowiednią rekonwalescencję (sprawdź zachowanie zwierząt, drżenie, lokomocję i inne oznaki toksyczności). Utrzymuj zwierzęta w cieple, dopóki nie wrócą do zdrowia po operacji. Oczekuje się, że mysz będzie poruszać się wolniej w klatce po operacji, wracając do normalnego zachowania po ~12-24 godzinach.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Iniekcja dożylna w ogonie najądrza
<ol>
	<li>Przygotowanie przedoperacyjne u myszy<ol>
		<li>Indukować znieczulenie ogólne ketaminą/ksylazyną (60/20 mg/kg, dosko). Po znieczuleniu ułóż mysz na plecach na polu operacyjnym. UWAGA: Przed nacięciem mocno ściśnij palec u nogi, aby upewnić się, że nie pojawia się odruch pedału. Znieczulenie wziewne (np. izofluran) może być stosowane jako zastępstwo ketaminy/ksylazyny.</li>
		<li>Połóż palec wskazujący i kciuk poniżej moszny, aby sprawdzić pozycję jąder i najądrza. W razie potrzeby delikatnie masuj boki brzucha w kierunku moszny, aby ustawić jądra i najądrze w mosznie.</li>
		<li>Wykonaj trichotomię moszny myszy, używając kształtu elektrycznego podcinaka (rysunek 3A).</li>
		<li>Wykonaj asepsę moszny z bawełną sterylną, natłuszczoną chlorheksydyną 0,25% (v/v) i alkoholem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wstrzyknięcie w przedziale luminalnym nasieni w kierunku najądrza ogonowodziowego UWAGA: Aby ułatwić następujące procedury, użyj albo opaski na głowie, albo mikroskopu stereoskopowego.<ol>
		<li>Palcem wskazującym i kciukiem poniżej moszny, utrzymując skórę moszny delikatnie rozciągniętą, delikatnie wykonaj pionowe nacięcie ~2 mm na przyśrodkowej części moszny skalpelem wielkości 15, przecinając skórę, tunica dartos i zewnętrzną powięzi nasienną (Rysunek 3A).</li>
		<li>Palcem wskazującym delikatnie przesuwaj lewe jądro i najądrze z powrotem do brzucha, utrzymując prawe jądro i najedrze w mosznie.</li>
		<li>Palcem wskazującym i kciukiem poniżej prawego jądra i najądrza, utrzymując skórę moszny delikatnie rozciągniętą, ostrożnie otwieraj i zamykaj skośne, tępe szczypce chirurgiczne na wewnętrznej powięzi plemnikowej, aż do przerwania wewnętrznej powięzi nasiennej i tuniki pochwy.</li>
		<li>Ulż w nacisku palca wskazującego i kciuka. Przez otwór w tunice pochwowej włóż skośne szczypce chirurgiczne w kierunku podstawy moszny. Ostrożnie wyciągnij tłuszcz z dalszego najądrza, aby zlokalizować najądrze ogonia.</li>
		<li>Zlokalizuj nasienie i umieść proste kleszcze chirurgiczne poniżej nasieniowódu. W nasieniu ustaw zacisk bulldoga w kształcie pęsety, zachowując wystarczająco dużo miejsca na otwarcie prostych szczypiec chirurgicznych, które muszą znajdować się między najądrzem ogonowym a klamrą bulldoga (jeśli to konieczne, ogranicz otwarcie prostych szczypiec chirurgicznych, aby nie uszkodzić nasieniodawów) (Rysunek 3A).</li>
		<li>Ustaw strzykawkę Hamiltona, załadowaną wcześniej roztworem do wtrysku, pod kątem około 10-15° równolegle do nasiewia i włóż igłę skośnie skierowaną w górę (Rysunek 3A oraz Ilustracja uzupełniająca 1).</li>
		<li>Ściśnij proste szczypce chirurgiczne, aby poluzować naczyniowosie, a następnie powoli opuszczaj tłok strzykawki, aż cały roztwór bodziecowy zostanie wypchnięty (Rysunek 3A). UWAGA: Maksymalna objętość wtrysku: 10 μL.</li>
		<li>Usuń proste szczypce chirurgiczne. Umieść zakrzywione szczypce chirurgiczne w miejscu wkładania igły, delikatnie ściśnij i ostrożnie wyjmij igłę.</li>
		<li>Po ~30 sekundach usuń kleszcze chirurgiczne i zacisk typu bulldog w kształcie pęsety. Delikatnie przywróć nasienie do moszny.</li>
		<li>Lokalizuj tunikę pochwową i wykonaj jeden ścieg szwowy za pomocą uchwytu na igły i chirurgicznego szwu w rozmiarze 5/0 (Ilustracja uzupełniająca 1). UWAGA: Sprawdź, czy nacięcie w tunice pochwy jest zamknięte; Jeśli trzeba, zrób kolejny ścieg.</li>
		<li>Palcem wskazującym delikatnie przesuwaj prawe jądro i najądrze z powrotem do brzucha, a lewe jądro i najądrze umieść w mosznie.</li>
		<li>Powtórz kroki 2.2.3-2.2.10, aby wykonać zastrzyk dożylny po lewej stronie.</li>
		<li>Nacięcie skórne zamykaj dwoma szwami szwowymi za pomocą uchwytu na igły i szwów chirurgicznych w rozmiarze 5/0 (Rysunek 3A).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Opieka pooperacyjna<ol>
		<li>Obserwuj mysz po operacji, aby zapewnić odpowiednią rekonwalescencję (sprawdź zachowanie zwierząt, drżenie, lokomocję i inne oznaki toksyczności). Utrzymuj zwierzęta w cieple, dopóki nie wrócą do zdrowia po operacji. Oczekuje się, że mysz będzie poruszać się wolniej w klatce po operacji, wracając do normalnego zachowania po ~12-24 godzinach.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Hinton, B., Robaire, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Knobil+and+Neill%27s+Physiology+of+Reproduction+Volume+1%22%5BJournal%5D)">The Epididymis.</a> Knobil and Neill's Physiology of Reproduction Volume 1. 1, 691-771 (2015).</li>
<li>Avellar, M. C. W., Hinton, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Encyclopedia+of+Endocrine+Diseases%22%5BJournal%5D)">Epididymis.</a> Encyclopedia of Endocrine Diseases. , 807-813 (2019).</li>
<li>Johnston, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+epididymal+transcriptome%3A+Transcriptional+profiling+of+segmental+gene+expression+in+the+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">The mouse epididymal transcriptome: Transcriptional profiling of segmental gene expression in the epididymis.</a> Biol Reprod. 73 (3), 404-413 (2005).</li>
<li>Fijak, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infectious%2C+inflammatory+and+%27Autoimmune%27+male+factor+infertility%3A+How+do+rodent+models+inform+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Update%22%5BJournal%5D)">Infectious, inflammatory and 'Autoimmune' male factor infertility: How do rodent models inform clinical practice.</a> Hum Reprod Update. 24 (4), 416-441 (2018).</li>
<li>Rodrigues, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+toll-like+receptor+4+%28TLR4%29+by+in+vivo+and+in+vitro+exposure+of+rat+epididymis+to+lipopolysaccharide+from+Escherichia+coli%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Activation of toll-like receptor 4 (TLR4) by in vivo and in vitro exposure of rat epididymis to lipopolysaccharide from Escherichia coli.</a> Biol Reprod. 79 (6), 1135-1147 (2008).</li>
<li>Palladino, M. A., Johnson, T. A., Gupta, R., Chapman, J. L., Ojha, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Members+of+the+toll-like+receptor+family+of+innate+immunity+pattern-recognition+receptors+are+abundant+in+the+male+rat+reproductive+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Members of the toll-like receptor family of innate immunity pattern-recognition receptors are abundant in the male rat reproductive tract.</a> Biol Reprod. 76 (6), 958-964 (2007).</li>
<li>Pleuger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regional+distribution+of+resident+immune+cells+shapes+distinct+immunological+environments+along+the+murine+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">The regional distribution of resident immune cells shapes distinct immunological environments along the murine epididymis.</a> eLife. 11, e82193(2022).</li>
<li>Battistone, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Region-specific+transcriptomic+and+functional+signatures+of+mononuclear+phagocytes+in+the+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Region-specific transcriptomic and functional signatures of mononuclear phagocytes in the epididymis.</a> Mol Hum Reprod. 26 (1), 14-29 (2020).</li>
<li>Mendelsohn, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+initial+segment+to+cauda%3A+A+regional+characterization+of+mouse+epididymal+CD11c%2B+mononuclear+phagocytes+based+on+immune+phenotype+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">From initial segment to cauda: A regional characterization of mouse epididymal CD11c+ mononuclear phagocytes based on immune phenotype and function.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 319 (6), C997-C1010 (2020).</li>
<li>Pleuger, C., Silva, E. J. R., Pilatz, A., Bhushan, S., Meinhardt, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+immune+response+to+infection+and+acute+inflammation+along+the+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Differential immune response to infection and acute inflammation along the epididymis.</a> Front Immunol. 11, 3125(2020).</li>
<li>Avellar, M. C. W., Ribeiro, C. M., Dias-da-Silva, M. R., Silva, E. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+search+of+new+paradigms+for+epididymal+health+and+disease%3A+Innate+immunity%2C+inflammatory+mediators%2C+and+steroid+hormones%5BTitle%5D)+AND+%22Andrology%22%5BJournal%5D)">In search of new paradigms for epididymal health and disease: Innate immunity, inflammatory mediators, and steroid hormones.</a> Andrology. 7 (5), 690-702 (2019).</li>
<li>Michel, V., Pilatz, A., Hedger, M. P., Meinhardt, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epididymitis%3A+Revelations+at+the+convergence+of+clinical+and+basic+sciences%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+J+Androl%22%5BJournal%5D)">Epididymitis: Revelations at the convergence of clinical and basic sciences.</a> Asian J Androl. 17 (5), 756-763 (2015).</li>
<li>Nicholson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+epididymo-orchitis+in+primary+care%3A+Results+from+a+large+UK+primary+care+database%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Gen+Pract%22%5BJournal%5D)">Management of epididymo-orchitis in primary care: Results from a large UK primary care database.</a> Br J Gen Pract. 60 (579), e407-e422 (2010).</li>
<li>Pilatz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+epididymitis+revisited%3A+Impact+of+molecular+diagnostics+on+etiology+and+contemporary+guideline+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Urol%22%5BJournal%5D)">Acute epididymitis revisited: Impact of molecular diagnostics on etiology and contemporary guideline recommendations.</a> Eur Urol. 68 (3), 428-435 (2015).</li>
<li>Lang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+integrity+of+spermatozoa+is+compromised+as+a+consequence+of+acute+uropathogenic+E.+coli-associated+epididymitis%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Structural and functional integrity of spermatozoa is compromised as a consequence of acute uropathogenic E. coli-associated epididymitis.</a> Biol Reprod. 89 (59), 1-10 (2013).</li>
<li>Rusz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+urogenital+infections+and+inflammation+on+semen+quality+and+male+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Influence of urogenital infections and inflammation on semen quality and male fertility.</a> World J Urol. 30 (1), 23-30 (2012).</li>
<li>Schuppe, H. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urogenital+infection+as+a+risk+factor+for+male+infertility%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch+Arztebl+Int%22%5BJournal%5D)">Urogenital infection as a risk factor for male infertility.</a> Dtsch Arztebl Int. 114 (19), 339-346 (2017).</li>
<li>Andrade, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide-induced+epididymitis+modifies+the+transcriptional+profile+of+Wfdc+genes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide-induced epididymitis modifies the transcriptional profile of Wfdc genes in mice.</a> Biol Reprod. 104 (1), 144-158 (2021).</li>
<li>Andrade, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+modulation+of+toll-like+receptor+signaling+pathway+genes+in+acute+epididymitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Andrology%22%5BJournal%5D)">Regional modulation of toll-like receptor signaling pathway genes in acute epididymitis in mice.</a> Andrology. 12 (5), 1024-1037 (2024).</li>
<li>Silva, E. J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide+and+lipotheicoic+acid+differentially+modulate+epididymal+cytokine+and+chemokine+profiles+and+sperm+parameters+in+experimental+acute+epididymitis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide and lipotheicoic acid differentially modulate epididymal cytokine and chemokine profiles and sperm parameters in experimental acute epididymitis.</a> Sci Rep. 8 (1), 103(2018).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-Like+receptors+4+and+5+cooperatively+initiate+the+innate+immune+responses+to+uropathogenic+Escherichia+coli+infection+in+mouse+epididymal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Toll-Like receptors 4 and 5 cooperatively initiate the innate immune responses to uropathogenic Escherichia coli infection in mouse epididymal epithelial cells.</a> Biol Reprod. 94 (3), 58(2016).</li>
<li>Stammler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epididymitis%3A+Ascending+infection+restricted+by+segmental+boundaries%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Epididymitis: Ascending infection restricted by segmental boundaries.</a> Hum Reprod. 30 (7), 1557-1565 (2015).</li>
<li>Turner, T. T., Bomgardner, D., Jacobs, J. P., Nguyen, Q. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+segmentation+of+the+epididymal+interstitium+with+segmented+tubule+function+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Association of segmentation of the epididymal interstitium with segmented tubule function in rats and mice.</a> Reproduction. 125 (6), 871-878 (2003).</li>
<li>Barrachina, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CX3CR1+deficiency+leads+to+impairment+of+immune+surveillance+in+the+epididymis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">CX3CR1 deficiency leads to impairment of immune surveillance in the epididymis.</a> Cell Mol Life Sci. 80 (1), 15(2022).</li>
<li>Klein, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+tissue-specific+damage+caused+by+bacterial+epididymo-orchitis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Hum+Reprod%22%5BJournal%5D)">Differential tissue-specific damage caused by bacterial epididymo-orchitis in the mouse.</a> Mol Hum Reprod. 26 (4), 215-227 (2020).</li>
</ol>

Autorzy deklarują, że nie mają żadnych konfliktów interesów.

Przedstawiono tutaj dwie odrębne procedury chirurgicznego zastrzyku służące wywołaniu regionalnego zapalenia najądrza u myszy. Są one wykorzystywane do eksperymentalnych modeli najądrza, które celują w początkowy segment przez zastrzyk śródmiąższowy lub do ogona najądrza przez wskroczenie donaczyniowe do naczynia wstecznego. Szczegółowy i wizualny przewodnik zwiększa przejrzystość i dostępność tych protokołów, dążąc do zwiększenia ich powtarzalności.
Średnica przewodu najądrz...

Najądrze to męski narząd rozrodczy złożony ze słówki, składający się z pojedynczej, silnie skrętłej rurki, która łączy przewody odprowadzające z naczyniowodziem. Najądrze jest niezbędne do dojrzewania plemników (nabycia ruchliwości i zdolności zapłodnienia), koncentracji, transportu, przechowywania oraz ochrony aż do wytrysku 1,2. Klasycznie najądrze u gryzoni ma cztery obszary anatomiczne: segment początkowy, caput, corpus oraz cauda1 (Rysunek 1). Ponadto każdy obszar najądrza można podzielić na dodatkowe segmenty oddzielone przez przegrody łączące między miąższami, co wskazuje na obecność 10 segmentów w najądrzemyszy 3 (Rysunek 1).
Immunobiologia najądrza to rozwijająca się dziedzina badań ze względu na związek między zaburzeniami odporności a niepłodnością mężczyzn4. Badania z ostatnich dwóch dekad wykazały, że najądrze jest zasiedlone przez różne składniki układu odpornościowego, takie jak rezydujące typy komórek odpornościowych (np. fagocyty monojądrowe i limfocyty) oraz receptory rozpoznawające patogeny [PRR, np. receptory Toll-like (TLR) i receptory podobne do NOD] eksprimowane na kilku typach komórek nieimmunologicznych i immunologicznych, które razem tworzą dynamiczne, specyficzne dla regionu mikrośrodowiska najądrza5, 6,7,8,9. Te komponenty immunologiczne najądrza odgrywają kluczową rolę w podwójnej zdolności najądrza do koordynacji tolerancji immunologicznej wobec immunogennych plemników, jednocześnie szybko wywołując odpowiedzi immunologiczne na rosnące infekcje cewki moczowej i inne szkodliwe bodźce 4,10. Czynniki wpływające na tę złożoną równowagę immunologiczną w najądrze wymagają dalszych badań, ponieważ mogą one szkodzić funkcji najądrza, a tym samym negatywnie wpływać na płodność mężczyzn.
W tym kontekście choroby zapalne najądrza, zwane łącznie zapaleniem najądrza, są bardzo powszechne u mężczyzn w każdym wieku i stanowią istotne czynniki etiologiczne w męskiej niepłodności i niepłodności 4,11,12. Najądrze to piąta najczęstsza diagnoza urologiczna u mężczyzn w wieku od 18 do 50 lat, z ~60 000 przypadków rocznie tylko w USA, co daje 4,13. Wstępujące infekcje kanałowe z patogenami urogenitalnymi (np. Escherichia coli) lub chorobami przenoszonymi drogą płciową (np. Chlamydia trachomatis) są najczęstszą przyczyną najądrza 4,14. Większość pacjentów z zapaleniem najądrza odczuwa ból w ogonie najądrza, ale rzadziej w okolicy caput, co podkreśla kliniczne implikacje związane ze zdolnością najądrza do wywoływania specyficznych odpowiedzi regionowych na bodźce zapalne10. Zapalenie najądrza może powodować głębokie pogorszenie parametrów nasiennych (np. stężenia i ruchliwości plemników), wraz z wyraźną leukocytospermią w ostrej fazie choroby 4,12,15. Warto zauważyć, że znaczna grupa pacjentów z zapaleniem najądrza cierpi na przewlekłą oligozoospermię lub azoospermię, mimo skutecznej terapii farmakologicznej i remisji objawów16,17. Mechanizmy stojące u podstaw długoterminowego wpływu wyników najądrza na jakość plemników pozostają słabo poznane.
Próbki ostrego zapalenia najądrza u ludzi są rzadkie, ponieważ biopsje najądrza są przeciwwskazane ze względu na ryzyko niekontrolowanego rozprzestrzeniania się patogenów przez nakłucie, co może prowadzić do sepsy i uszkodzenia narządów, a także wycieku plemników do przedziału śródmiąższowego w wyniku pęknięcia przewodów4. W związku z tym modele zwierzęce najądrza stanowią istotne narzędzia do badania mechanizmów chorobowych, umożliwiając ocenę odpowiedzi zapalnych i wyników 4,12. W tym kontekście gryzonie (szczury i myszy) stanowią najczęściej wykorzystywane organizmy modelowe do badania zapalenia najądrza w kontrolowanych, eksperymentalnych warunkach 4,12. Różne modele bakteryjnego najądrza u gryzoni zostały opracowane w zależności od rodzaju patogenu (np. uropatogeniczny E. coli i C. trachomatis), drog zakażeń (np. wskroczenie kanałowe i śródmiąższowe), miejscowości zakażenia (np. segment początkowy i ogono najądrza) oraz przebiegu po wstrzyknięciu (np. godziny do dni)4,12.
Zastosowanie wzorców molekularnych związanych z patogenami (PAMP) stanowi cenne narzędzie do badania zapalenia najądrza, ponieważ umożliwia badanie mechanizmów patofizjologicznych choroby wywołanych przez różne cząsteczki związane z różnymi patogenami (np. bakteriami, wirusami i grzybami) poprzez aktywację specyficznych PRR, takich jak TLR i szlaki sygnalizacyjne 5,18,19,20,21 . Na przykład PAMP pochodzące ze ściany komórkowej bakterii Gram-ujemnych i Gram-dodatnich, takich jak lipopolisacharyd (LPS; agonistą TLR4) oraz kwasem lipoteichonowym (LTA; Agonista TLR2/TLR6), były odpowiednio stosowane do wywołania zapalenia najądrza różnymi drogami podania, w tym dożylnie, dootrzewnowkowo lub bezpośrednim zastrzykiem do regionów najądrza10. W tych warunkach wykazano, że zarówno LPS, jak i LTA wywołują reakcje zapalne w najądrzu u szczurów i myszy, związane z modulacją wyraźnej podgrupy mediatorów zapalnych oraz rekrutacją komórek odpornościowych w sposób specyficzny dla regionu i czasu19,20. W szczególności niedawno pojawiło się jako istotne modele do badania odpowiedzi bliższej i dalszej odpowiedzi najądrza na różne bodźce zapalne (bredne) w przedziale międzymiąższowym segmentu segmentu początkowego lub w luminalnym przedziale nasieniowodzie w kierunku najądrza ogonowosiecznego myszy jako istotne modele do badania odpowiedzi bliższej i dalszej najądrza na różne bodźce zapalne, co stanowi ramy do zrozumienia różnych środowisk immunologicznych narządu i ich wkładu w wyniki chorób4, 18,19.
Przedstawiono tutaj dwa różne protokoły eksperymentalne indukujące bezpośrednie bodźce zapalne w różnych obszarach najądrza myszy, mianowicie w segmentie początkowym i najądrze ogonowej, odpowiednio przy użyciu iniekcji śródmiąższowej i retrogradacyjnej wewnątrznaczyniowej. Łącznie te różne podejścia umożliwiają regionalne podanie PAMP oraz ocenę przeciwległych obszarów najądrza podczas stanu zapalnego.

<table><tbody><tr><td>Chirurgiczne kleszcze z tępym końcem i ukośnie;</td><td>Bonther</td><td>xtycga1012</td><td></td></tr><tr><td>Skośne szczypce chirurgiczne</td><td>Bonther</td><td>pwghvv1012</td><td></td></tr><tr><td>Rozwiązanie Blue Evans</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E2129</td><td></td></tr><tr><td>Zacisk do pęsety buldoga &nbsp;</td><td>Bonther</td><td>jtkpqs1012</td><td></td></tr><tr><td>Chlorheksydyna</td><td>Rioqu&iacute; Mica</td><td>Riohex 0,25%</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgiczne kleszcze z krzywizną</td><td>Bonther</td><td>506e6e1012</td><td></td></tr><tr><td>Kształt elektrycznego trymera</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka Hamiltona</td><td>Hamilton</td><td>80400</td><td></td></tr><tr><td>Opaska do powiększania;</td><td>OptiVISOR</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Venco Animal Health</td><td>Ketalex</td><td></td></tr><tr><td>LPS&nbsp; z E. coli 055:B55</td><td>Invivogen</td><td>Tlrl-pb5lps</td><td></td></tr><tr><td>LTA od Staphylococcus aureus</td><td>Invivogen</td><td>Tlrl-pslta</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt na igły</td><td>Bonther</td><td>8pihbf1012</td><td></td></tr><tr><td>Szew chirurgiczny rozmiaru 5/0</td><td>Shalon Medical</td><td>n550cti20</td><td></td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna sterylna</td><td>-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Proste szczypce chirurgiczne</td><td>Bonther</td><td>ejaiuz1012</td><td></td></tr><tr><td>Ksylazyna</td><td>Syntec</td><td>Xilazyna</td><td></td></tr></tbody></table>

modele myszy zapalenia najądrza wywołanego przez wzorce molekularne związane z patogenem

Mouse Models of Epididymitis Induced by Pathogen-Associated Molecular Patterns

Najądrze najądrze jest bardzo powszechną chorobą w ambulatoryjnej klinice urologicznej i istotnym czynnikiem męskiej niepłodności. Infekcje bakteryjne, w tym bakterie przenoszone drogą płciową oraz powszechne uropatogeny, stanowią najczęstsze czynniki etiologiczne zapalenia najądrza. Niemniej jednak mechanizmy patofizjologiczne leżące u podstaw wystąpienia, naturalnego przebiegu i skutków bakteryjnego zapalenia najądrza pozostają słabo poznane. W tym kontekście modele gryzoni są cennym narzędziem do badania mechanistycznych reakcji najądrza na różne bodźce zapalne lub zakaźne. Badania na szczurach i myszach wykazały, że molekularne wzorce molekularne (PAMPs) powiązane z patogenami pochodzenia bakteryjnego, takie jak lipopolisacharyd (LPS) i kwas lipoteichoowy (LTA) bakterii Gram-ujemnej i Gram-dodatniej, wywołują ostre zapalenie w najądrzu najądrzym. Nasilenie tych reakcji zapalnych różni się w zależności od dotkniętego regionu najądrza i wiąże się ze słabymi parametrami plemników. Szczegółowo opisano dwa odrębne podejścia chirurgiczne wywołujące zapalenie najądrza u myszy poprzez wstrzyknięcie PAMP w przedziale śródmiąższowym segmentu początkowego lub w przedziale luminalnym nasieniowodzie w kierunku najądrza ogonowego, co pozwala na badanie reakcji zapalnych w okolicach bliższych i dalszych najądrza. Oczekuje się, że te eksperymentalne modele zapalenia najądrza umożliwią przyszłe badania mające na celu pogłębienie zrozumienia mechanizmów kontrolujących odpowiedzi najądrza na atakujące patogeny, otwierając nowe możliwości interwencji terapeutycznych łagodzących skutki zapalenia najądrza dla męskiej płodności.

Opisano tutaj dwa odrębne modele zastrzyków chirurgicznych dla bodźców zapalnych w segmencie początkowym (zastrzyk śródmiąższowy) oraz cauda auda gididymidis (zastrzyk donaczyniowy) u myszy. Pierwsza wywołuje reakcje zapalne w najedrze bliższym, natomiast druga w dalszym najądrze (distalnym).
Zastrzyk śródmiąższowy wykonuje się przez nacięcie w jamie brzusznej, z możliwością przeniesienia jądra i najądrza myszy z moszny do jamy ...

Opisano tutaj dwa odrębne modele chirurgicznych zastrzyków służących do wywołania bodźców zapalnych w segmencie początkowym (zastrzyk śródmiąższowy) oraz w cauda gididymidis (zastrzyk dotaczny) myszy. Metody te umożliwiają badania reakcji specyficznych dla regionu w różnych obszarach najądrza.

Modele myszy zapalenia najądrza wywołanego przez wzorce molekularne związane z patogenem

Epididymitis is a highly prevalent disease in the outpatient urologic clinic and a relevant factor in male infertility. Bacterial infections, including ...

Badamy wpływ stanu zapalnego na fizjologię najądrza w płodności mężczyzn. Precyzyjne, kompartmentalizowane wstrzykiwanie środków wywołujących stan zapalny bez uszkodzeń. Przewód najądrza w modelach myszy wymaga zaawansowanego połączenia umiejętności chirurgicznych i szkolenia.Na początek umieść znieczulone zwierzę w pozycji leżącej na polu operacyjnym. Za pomocą elektrycznego podkaszaka wykonaj trychotomię odwłoka myszy, aby całkowicie usunąć futro. Następnie użyj bezpłodnej bawełny nasączonej roztworem 0,25% chlorheksydyny.A potem z alkoholem do asepsy brzucha. Skalpelem w rozmiarze 15 wykonaj około czteromilimetrowego pionowego nacięcia po prawej stronie ściany brzucha. Teraz delikatnie rozdziel skórę za pomocą skośnych, tępych szczypiec chirurgicznych.Następnie, używając tego samego skalpela, wykonuj kolejne około czteromilimetrowe pionowe nacięcie na otrzewnej po boku pierwszego nacięcia. Ostrożnie unieś najądrze w jądrze z jamy brzusznej, delikatnie naciskając prawą stronę moszny. Za pomocą zakrzywionych szczypiec chirurgicznych delikatnie pociągnij białą tkankę tłuszczową w najedrzu, aby zlokalizować początkowy segment najedrza.Przy pomocy białej tkanki tłuszczowej najądrza odsłonić początkowy segment w miejscu nacięcia. Następnie ustawij strzykawkę Hamiltona z roztworem do wstrzykiwania pod kątem około 90 stopni równolegle do segmentu numer jeden segmentu początkowego. Ostrożnie włóż igłę w przestrzeń międzymiąższową, fazując ją w dół.Następnie umieść zakrzywione szczypce chirurgiczne w miejscu wbicia igły i delikatnie uszczypnij torebkę najądrza oraz igłę. Powoli naciskaj tłok strzykawki, aż cały roztwór bodziecowy zostanie wstrzyknięty. Utrzymując zakrzywione szczypce chirurgiczne na miejscu, ostrożnie wyjmij igłę i zwolnij zakrzywione szczypce chirurgiczne po około 30 sekundach.Następnie, używając białej tkanki tłuszczowej najądrza, delikatnie przeprowadź tkankę jądrową do jamy brzusznej. Zidentyfikuj otrzewną i zamknij ją, wykonując dwa szwy szwowe za pomocą uchwytu na igły i szwu chirurgicznego rozmiaru pięć-00, a nacięcie skórne zamknij dwoma szwami szwającymi. Po operacji obserwuj mysz, aby zapewnić odpowiednią rekonwalescencję po operacji.Po podaniu znieczulenia ułóż mysz w pozycji leżącej na polu operacyjnym. Połóż palec wskazujący i kciuk poniżej moszny, aby obpalpować i potwierdzić pozycję jąder oraz najądrza. W razie potrzeby delikatnie masuj boki brzucha w kierunku moszny, aby ustawić jądra i najądrze na właściwe miejsce.Za pomocą elektrycznego trymera wykonaj trichotomię moszny, aby całkowicie usunąć włosy i zdezynfekować miejsce sterylną watą nasączoną w roztworze chlorheksydyny 0,25%, a następnie alkoholem. Palcem wskazującym i kciukiem pod moszną delikatnie rozciągaj skórę moszny. Używając skalpela rozmiaru 15, wykonaj około dwumilimetrowego pionowego nacięcia na przyśrodkowej części moszny.Teraz delikatnie przesuń lewe jądro i najądrze z powrotem do jamy brzusznej, pozostając jednocześnie prawym jądrem i najedrzem w mosznie. Z palcem wskazującym i kciukiem umieszczonym poniżej prawego jądra i najądrza, delikatnie rozciągaj skórę moszny. Następnie, używając skośnych, tępych szczypiec chirurgicznych, ostrożnie otwieraj i zamykaj końcówki na wewnętrznej powięzi plemniczej, aby przerwać wewnętrzną powięzi plemną i tunikę pochwową.Następnie odciąż nacisk palca wskazującego i kciuka oraz wprowadź skośne szczypce chirurgiczne przez otwór tuniki pochwy w kierunku podstawy moszny. Za pomocą kleszczy ostrożnie wyciągnij dalszy tłuszcz najądrza, aby zlokalizować najądrze ogonowe. Teraz zlokalizuj nasienie i umieść proste kleszcze chirurgiczne pod nim.Załóż pęsetę buldoga na nasienie nasieniodawców, zapewniając wystarczającą przestrzeń między najedrzem ogonowu a zaciskiem. Następnie ustaw strzykawkę Hamiltona z wcześniej załadowanym roztworem do wstrzykiwania pod kątem około 10 do 15 stopni równolegle do nasieniowodosie, a igłę włóż w naczyniowodzie tak, że faza jest skierowana do góry. Delikatnie ściśnij proste szczypce chirurgiczne, aby uwolnić nasiewosie, i powoli wciśnij tłok strzykawki, aby wstrzyknąć cały roztwór bodziec.Teraz usuń proste szczypce chirurgiczne. Używając zakrzywionych szczypiec chirurgicznych, delikatnie ściśnij okolice miejsca wbicia igły, a następnie ostrożnie wyjmij igłę strzykawki. Po około 30 sekundach usuń zakrzywione szczypce chirurgiczne i pęsetę bulldoga i delikatnie odłóż naczyniowód do moszny.Następnie zidentyfikuj tunikę pochwową i zamykaj ją jednym ściegiem, używając uchwytu na igły i chirurgicznego szwu w rozmiarze 500. Palcem wskazującym delikatnie wpchnij prawe jądro i najedrze z powrotem do jamy brzusznej oraz przesuń lewe jądro i najedrze do moszny. Na koniec zamknij nacięcie skóry moszny dwoma szwami szwowymi za pomocą uchwytu na igły i szwów chirurgicznych rozmiaru 50 i obserwuj mysz, aby zapewnić prawidłową rekonwalescencję po operacji.Wstrzyknięcie śródmiąższowe w początkowym segmencie spowodowało, że wstrzyknięty niebieski barwnik Evansa był ograniczony głównie do pierwszego segmentu przez maksymalnie 30 minut po wstrzyknięciu, a następnie dyfundował do sąsiednich segmentów początkowego segmentu i najądrza caput. Iniekcja wewnątrznaczyniowa do naczyniowodosiewowego nasiewia uwięziła niebieski barwnik Evansa w lumencie segmentu 10 na maksymalnie 30 minut po wstrzyknięciu. Histologiczne mikrografie fotograficzne potwierdziły, że zastrzyki kontrolowane solą fizjologiczną nie zmieniły morfologii najądrza najądrza 72 godziny po leczeniu.Iniekcja z LPS śródmiąższowego w początkowym segmencie wywołała obrzęk śródmiąższowy, a intensywne infiltracje komórek odpornościowych śródmiąższowych, śródbłonkowych i śródświatłowych 72 godziny po leczeniu. Wstrzyknięcie LPS lub LTA do śródbłonka w ogono wywołało obrzęk śródmiąższowy oraz infiltracje komórek odpornościowych w przedziałach śródmiąższowych i śródświatłowych 72 godziny po leczeniu. Brak powtarzalnych modeli zwierzęcych badających lokalizowane zapalenie najądrza i jego wpływ na płodność mężczyzn.Bezpośrednie regionalne wstrzyknięcie substancji zapalnych wywołujących stan zapalny umożliwia precyzyjną analizę regionalnych odpowiedzi immunologicznych w wyniku najądrza.

mouse-models-epididymitis-induced-pathogen-associated-molecular

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia i infekcje

Źródło: Conover, M. S. i in., J. Ustanowienie i charakterystyka ZUM i CAUTI w modelu myszym. J. Vis. Exp. (2015)Ten film pokazuje procedurę montażu i wszczepienia cewnika transurethralnego u samicy myszy, po czym następuje szczepienie bakteryjne w celu wywołania zakażenia dróg moczowych związanych z cewnikami oraz badania interakcji gospodarza z patogenem wygenerowanym przez biofilm.

Zakażenie dróg moczowych związane z cewnikami w modelu mysim

Infekcja prostaty może być czynnikiem przyczyniającym się do pośredniczenia w bólu miednicy w przewlekłym zapaleniu gruczołu krokowego. Opisujemy procedurę przygotowania standaryzowanego inokulum bakteryjnego, wkraplania bakterii do cewki moczowej samców myszy oraz metodologii pomiaru allodynii dotykowej u myszy w czasie.

Pomiar dotykowej allodynii w mysim modelu bakteryjnego zapalenia gruczołu krokowego

Zakażenie gryzoniami Citrobacter stanowi cenny model do badania infekcji bakteryjnych jelit, jak również odpowiedzi immunologicznych gospodarza i zapalenia jelita grubego u myszy. Protokół ten określa pomiar integralności bariery, obciążenia patogenem i uszkodzeń histologicznych, co pozwala na dokładne scharakteryzowanie udziału patogenu i gospodarza w zakaźnym zapaleniu jelita grubego u myszy.

Mysi model Citrobacter rodentium: badanie udziału patogenów i gospodarza w zakaźnym zapaleniu jelita grubego

Neisseria meningitidis to specyficzny dla człowieka patogen, który infekuje naczynia krwionośne. W tym protokole ludzkie mikronaczynia są wprowadzane do myszy poprzez przeszczepienie ludzkiej skóry myszom z obniżoną odpornością. Bakterie w dużym stopniu przylegają do ludzkich naczyń, prowadząc do uszkodzenia naczyń krwionośnych i rozwoju wysypki plamistej zwykle obserwowanej u ludzi.

Humanizowany model myszy do badania infekcji bakteryjnych ukierunkowanych na mikrokrążenie

Modele zwierzęce okazały się nieocenionymi narzędziami w definiowaniu mechanizmów specyficznych dla gospodarza i patogenu, które przyczyniają się do rozwoju przewlekłego stanu zapalnego. W tym miejscu opisujemy mysi model zakażenia jamy ustnej ludzkim patogenem Porphyromonas gingivalis i szczegółowo opisujemy metodologie oceny postępu stanu zapalnego w miejscach miejscowych i ogólnoustrojowych.

Mysi model przewlekłego stanu zapalnego wywołanego przez patogeny w miejscach lokalnych i ogólnoustrojowych

Zdolność do modelowania infekcji dróg moczowych (ZUM) jest kluczowa, aby móc zrozumieć patogenezę bakterii i zapoczątkować rozwój nowych terapii. Celem tej pracy jest zademonstrowanie mysich modeli eksperymentalnego ZUM i ZUM związanego z cewnikiem, które podsumowują i przewidują wyniki obserwowane u ludzi.

Ustalenie i charakterystyka UTI i CAUTI w modelu mysim

Mierzymy obwodowo-płciową wrażliwość mechaniczną i aktywację komórek tucznych u samców myszy C57BL/6, które przeszły paradygmat stresu we wczesnym okresie życia - separację noworodków od matek, w celu wywołania przedklinicznego modelu przewlekłego zapalenia gruczołu krokowego/przewlekłego bólu miednicy.

Ocena wrażliwości okołopłciowej i aktywacji komórek tucznych gruczołu krokowego w mysim modelu separacji noworodków od matek

Model inokulacji opuszki stopy jest cennym narzędziem do charakteryzowania indukowanych przez wirusy reakcji neurozapalnych in vivo. W szczególności zapewnia jasną ocenę kinetyki wirusa i związanych z nią procesów immunopatologicznych inicjowanych w obwodowym układzie nerwowym.

Model inokulacji opuszki stopy myszy do badania reakcji neurozapalnych wywołanych wirusem

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia jest jednym z najczęściej stosowanych mysich modeli stwardnienia rozsianego. W obecnym protokole myszy C57BL/6J obu płci są immunizowane peptydem glikoproteinowym oligodendrocytów mielinowych, co skutkuje głównie wznoszącym się niedowładem ogona i kończyn. W tym miejscu omówiono protokół indukcji i oceny EAE.

Modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane MOG35-55

Wcześniaki (poród &lt; 37. tygodniu) to pilny globalny problem zdrowotny z nieoptymalnymi opcjami profilaktyki i leczenia. Przedstawiamy myszy model wcześnianego porodu wywołanego infekcją bakteryjną pochwy oraz opisujemy, jak analizować wynikającą z tego chorobność i śmiertelność noworodków.

Modelowanie wznoszącej się infekcji pochwy, przedwczesnych porodów i noworodkowej zachorowalności u myszy

Protokół ten opisuje generowanie modelu mięśni prostaty wyhodowanego w 2D. Obejmuje dysocjację organoidów, zasiewanie komórek, różnicowanie, ocenę integralności nabłonka oraz zakażenie in vitro uropatogenicznym Escherichia coli. Model zapewnia dostępność wierzchołkową i nadaje się do badania interakcji gospodarz-patogen, przezwyciężając ograniczenia tradycyjnych trójwymiarowych systemów organoidalnych.

Opracowanie modelu opartego na organoidzie prostaty myszy do badania interakcji gospodarz-patogen

Poznaj modele chirurgiczne zapalenia najądrza u myszy, wykorzystujące iniekcję międzytkankową i wewnątrznaczyniową. Metody te umożliwiają badanie odpowiedzi zapalnych w różnych regionach najądrza.

Modele myszy zapalenia najądrza wywołanego przez wzorce molekularne związane z patogenem

Przeglądaj więcej filmów