ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

A.P. był wspierany przez Departament Obrony (HT9425-23-1-0351 i HT9425-23-1-0232), National Institutes of Health (R03CA282712), fundusze z Ovarian Cancer Alliance of Greater Cincinnati (PRIV0201 i PRIV0219) oraz grant badawczy UMGCCC American Cancer Society – IRG-18-160-16. A.P był również wspierany grantami z Instytutu Badań Klinicznych i Translacyjnych Uniwersytetu Maryland w Baltimore (ICTR), który jest częściowo finansowany przez National Center for Advancing Translational Sciences (NCATS) Clinical Translational Science Award (CTSA), UM1TR004926. Artykuł został również wsparty ze środków National Cancer Institute - Cancer Center Support Grant (CCSG) – P30CA134274. A.O. było częściowo wspierane przez grant NIH T32 GM158458.

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Kratzer, T. B., Wagle, N. S., Sung, H., Jemal, A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2026.">Cancer statistics, 2026.</a> CA Cancer J Clin. 76 (1), e70043 (2026).</li><li>Burges, A., Schmalfeldt, B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+diagnosis+and+treatment.">Ovarian cancer: diagnosis and treatment.</a> Dtsch Arztebl Int. 108 (38), 635-641 (2011).</li><li>Hong, M. K., Ding, D. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+diagnosis+of+ovarian+cancer:+a+comprehensive+review+of+the+advances,+challenges,+and+future+directions.">Early diagnosis of ovarian cancer: a comprehensive review of the advances, challenges, and future directions.</a> Diagnostics (Basel). 15 (4), 406 (2025).</li><li>Razaq, L., Dhali, A., Maity, R., Faisal, A. R., Hafeez, A. S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demographic+trends+in+mortality+due+to+ovarian+cancer+in+the+United+States,+1999-2020.">Demographic trends in mortality due to ovarian cancer in the United States, 1999-2020.</a> World J Clin Oncol. 16 (6), 108393 (2025).</li><li>Hu, X., Du, C., Du, D., Zhang, Y., Gao, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+cell+transcriptomic+analysis+reveals+molecular+mechanisms+of+chemoresistance+and+immune+microenvironment+remodeling+in+ovarian+cancer.">Single cell transcriptomic analysis reveals molecular mechanisms of chemoresistance and immune microenvironment remodeling in ovarian cancer.</a> Discov Oncol. 16, 2118 (2025).</li><li>Antunes, N., Kundu, B., Kundu, S. C., Reis, R. L., Correlo, V. M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+cancer+models:+a+closer+look+at+limitations+on+translation.">In vitro cancer models: a closer look at limitations on translation.</a> Bioengineering (Basel). 9 (4), 166 (2022).</li><li>Katt, M. E., Placone, A. L., Wong, A. D., Xu, Z. S., Searson, P. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+tumor+models:+advantages,+disadvantages,+variables,+and+selecting+the+right+platform.">In vitro tumor models: advantages, disadvantages, variables, and selecting the right platform.</a> Front Bioeng Biotechnol. 4, 12 (2016).</li><li>Lopez, E., Kamboj, S., Chen, C., Wang, Z., Kellouche, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+models+of+ovarian+cancer:+bridging+the+gap+between+pathophysiology+and+mechanistic+models.">In vitro models of ovarian cancer: bridging the gap between pathophysiology and mechanistic models.</a> Biomolecules. 13 (1), 103 (2023).</li><li>Zakarya, R., Howell, V. M., Colvin, E. K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+epithelial+ovarian+cancer+in+mice:+classical+and+emerging+approaches.">Modelling epithelial ovarian cancer in mice: classical and emerging approaches.</a> Int J Mol Sci. 21 (13), 4806 (2020).</li><li>House, C. D., Hernandez, L., Annunziata, C. M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+technological+advances+in+using+mouse+models+to+study+ovarian+cancer.">Recent technological advances in using mouse models to study ovarian cancer.</a> Front Oncol. 4, 26 (2014).</li><li>Tsang, S. I., Hassan, A. A., To, S. K. Y., Wong, A. S. T. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+for+ovarian+cancer+research.">Experimental models for ovarian cancer research.</a> Exp Cell Res. 416 (1), 113150 (2022).</li><li>Karakashev, S., Zhang, R. G. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+epithelial+ovarian+cancer+for+preclinical+studies.">Mouse models of epithelial ovarian cancer for preclinical studies.</a> Zool Res. 42 (2), 153-160 (2021).</li><li>Hernandez, L., Kim, M. K., Lyle, L. T., Bunch, K. P., House, C. D., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+ovarian+cancer+cell+lines+as+in+vivo+models+for+preclinical+studies.">Characterization of ovarian cancer cell lines as in vivo models for preclinical studies.</a> Gynecol Oncol. 142 (2), 332-340 (2016).</li><li>Wardrup, K. C., Hoffman, J., Pandya, M. J., Navarathna, N., Tulapurkar, M. E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ZNF217+promotes+ovarian+cancer+progression+by+impacting+multiple+pivotal+steps+in+the+metastatic+process.">ZNF217 promotes ovarian cancer progression by impacting multiple pivotal steps in the metastatic process.</a> NPJ Precis Oncol. 9, 392 (2025).</li><li>Magnotti, E., Marasco, W. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+latest+animal+models+of+ovarian+cancer+for+novel+drug+discovery.">The latest animal models of ovarian cancer for novel drug discovery.</a> Expert Opin Drug Discov. 13 (3), 249-257 (2018).</li><li>Bobbs, A. S., Cole, J. M., Cowden Dahl, K. D. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+and+evolving+ovarian+cancer+animal+models.">Emerging and evolving ovarian cancer animal models.</a> Cancer Growth Metastasis. 8 (Suppl 1), 29-36 (2015).</li><li>Ford, C. E., Werner, B., Hacker, N. F., Warton, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+untapped+potential+of+ascites+in+ovarian+cancer+research+and+treatment.">The untapped potential of ascites in ovarian cancer research and treatment.</a> Br J Cancer. 123 (1), 9-16 (2020).</li><li>Ghirardi, V., Fagotti, A., Ansaloni, L., Valle, M., Roviello, F., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+and+therapeutic+pathway+of+advanced+ovarian+cancer+with+peritoneal+metastases.">Diagnostic and therapeutic pathway of advanced ovarian cancer with peritoneal metastases.</a> Cancers (Basel). 15 (2), 407 (2023).</li><li>Puchalapalli, M., Zeng, X., Mu, L., Anderson, A., Hix Glickman, L., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NSG+mice+provide+a+better+spontaneous+model+of+breast+cancer+metastasis+than+athymic+nude+mice.">NSG mice provide a better spontaneous model of breast cancer metastasis than athymic nude mice.</a> PLoS One. 11 (9), e0163521 (2016).</li></ol>

Autorzy nie mają żadnych ujawnień do zgłoszenia.

Zdolność do naśladowania złożonych interakcji między komórkami nowotworowymi, mikrośrodowiskiem i czynnikami ogólnoustrojowymi sprawia, że modele myszy są doskonałym źródłem do badania postępu raka jajnika12. Oprócz poszerzania wiedzy o czynnikach wpływających na postęp raka jajnika i przerzuty, modele mysie in vivo odgrywają również ważną rolę w przedklinicznej ocenie małych cząsteczek oraz strategiach leczenia przerzutowego raka jajnika12,15</...

Pomimo znaczącego postępu w naszym rozumieniu czynników wpływających na postęp raka jajnika, rak jajnika pozostaje drugim najbardziej śmiertelnym nowotworem ginekologicznym w StanachZjednoczonych1. Z powodu braku widocznych objawów oraz braku wiarygodnych wczesnych markerów diagnostycznych, ponad 70 procent pacjentek z rakiem jajnika ma zaawansowaną chorobę przerzutową w wiekurozpoznania 2,3. Obecne terapie nie są skuteczne w leczeniu przerzutowego raka jajnika, w związku z czym 5-letnie wskaźniki przeżycia u pacjentów z chorobą w zaawansowanym stadium pozostają poniżej 30procent. Główną przyczyną braku sukcesów terapeutycznych jest pojawienie się chemiooporności5. Dlatego pilnie potrzebne jest zidentyfikowanie czynników napędzających przerzuty i chemiooporność w raku jajnika. Wypełnienie tej luki wiedzy będzie kluczowe dla opracowania skuteczniejszych strategii terapeutycznych ukierunkowanych na tę chorobę. Aby osiągnąć te cele, potrzebujemy modeli in vivo, które wiernie naśladują kluczowe etapy postępu raka jajnika.
Chociaż linie komórkowe raka jajnika oraz trójwymiarowe modele in vitro znacząco przyczyniły się do zrozumienia czynników wpływających na przerzuty i odpowiedź terapeutyczną, modele te mają kilka ograniczeń 6,7,8. Na przykład modele te nie uwzględniają różnych komórek nienowotworowych będących częścią mikrośrodowiska guza, ani nie rejestrują złożonych interakcji zachodzących w mikrośrodowisku guza 6,7,8. Ponadto niezwykle trudne jest badanie czynników systemowych i ich wpływu na postęp guza oraz odpowiedź na leki za pomocą modeli in vitro 6,7,8. Te ograniczenia modeli in vitro podkreślają potrzebę stosowania modeli in vivo, które wiernie naśladują różne etapy przerzutów raka jajnika, w tym złożone interakcje z innymi typami komórek i czynnikami w jego mikrośrodowisku.
Genetycznie modyfikowane modele myszy (GEMM) oferują platformę in vivo, w której guzy powstają spontanicznie w naturalnym mikrośrodowisku z nienaruszonym układem odpornościowym9. Jednak są czasochłonne, wymagające i kosztowne w produkcji i utrzymaniu10. Większość GEMM raka jajnika ma również długi okres opóźnienia rozwoju guza, co sprawia, że praca z nimi jest czasochłonna i kosztowna, nawet po wygenerowaniu10 mgieł. Modele do przeszczepów, takie jak modele ksenoprzeszczepu i allograftu, oferują dobrą równowagę między istotnością biologiczną a łatwością eksperymentalną i często są znacznie tańsze w produkcji niżGEMMs 11. Oprócz niższego opóźnienia niż GEMM, łatwość genetycznej modyfikacji komórek nowotworowych in vitro sprawia, że modele te są wygodne i odpowiednie do badania wpływu różnych czynników genetycznych na postęp guza10. Dzięki tym korzyściom modele nowotworów nadających się do przeszczepu stały się cennymi narzędziami zarówno do badań podstawowych, jak i translacyjnych w raku jajnika.
W niniejszym raporcie opisujemy protokół ustanowienia dwóch różnych modeli myszych guzów do przeszczepów, które są szeroko stosowane do badania przerzutowego raka jajnika: (1) model dootrzewnowkowy oraz (2) model ortotopowy lub wewnątrzbursalny. Oba modele można ustalić jako modele ksenoprzeszczepu lub allotransplantu. W modelu dootrzewnowym komórki nowotworowe są wstrzykiwane do jamy otrzewnej myszy. Wprowadzenie komórek raka jajnika do przestrzeni wewnątrzotrzewnowej odzwierciedla etap przerzutów raka jajnika, w którym przerzutowe komórki raka jajnika są usuwane z pierwotnego guza do jamy otrzewnej. Podobnie jak proces przerzutowy u ludzi, te przeszczepione komórki nowotworowe jajnika będą musiały dostosować się do wrogiego mikrośrodowiska otrzewnej, przyczepić się i napastować warstwę międzybłonową wyściełającą jamę otrzewną oraz tworzyć zmiany przerzutowe na narządach i tkankach wewnątrzotrzewnejowych, takich jak omentum, krezka, wątroba i przepona. W zależności od linii komórkowej nowotworowej użytej do wygenerowania modelu wewnątrzotrzewnego, guzom przerzutowym mogą towarzyszyć wodobrzusza, co jest obserwowane w zaawansowanych stadiach chorób u ludzi. Dlatego model dootrzewnowkowy jest szeroko stosowany do zrozumienia czynników napędzających przerzuty w raka jajnika i ich postęp w zaawansowane stadium choroby12. Modele te są również przydatne do określenia skuteczności nowych strategii terapeutycznych w leczeniu przerzutowego raka jajnika12. W modelu intrabursalnym lub ortotopowym komórki nowotworowe są wszczepiane do kaletki, błoniastej struktury otaczającej jajnik myszy. Model ten naśladuje wczesne stadia nowotworów jajnika i przerzutów. Na tym etapie komórki nowotworowe są nadal ograniczone do jajowodu i jajnika. To właśnie z tych miejsc komórki nowotworowe są wyrzucane do jamy otrzewnej, ostatecznie przerzutując do innych narządów. Dlatego model intrabursalny jest przydatny zarówno do badania wczesnych stadiów nowotworów jajnika, jak i zdarzeń prowadzących do późniejszych przerzutów przezkowelomowych przez jamę otrzewną12.
Tak więc, choć zarówno modele otrzewnej, jak i dookołourkowy są doskonałymi narzędziami do badania przerzutów i odpowiedzi terapeutycznej na raka jajnika, różnią się one konkretnym etapem procesu przerzutowego, który naśladują. Chociaż modele intrabursalne mogą naśladować postęp raka jajnika od wczesnych do późniejszych etapów procesu przerzutowego, ze względu na latencję związaną z tym procesem, są zwykle wykorzystywane do badania wczesnych przerzutów raka jajnika. W badaniach skupiających się na późniejszych stadiach przerzutów raka jajnika bardziej odpowiedni jest model dootrzewnowkowy. Ponadto model intrabursalny jest technicznie trudniejszy do ustalenia w porównaniu do modelu intraperitonealnego12. Ustanowienie modelu intrabursalnego wymaga dostępu do sali chirurgicznej wyposażonej w mikrochirurgiczny sprzęt, który pozwoli na precyzyjne wstrzykiwanie komórek nowotworowych do kaletki jajnika. Zdolność komórek nowotworowych do tworzenia guzów ("tempo pobierania" lub "tempo przeszczepu") jest również zazwyczaj niższa w modelach intrabursalnych niż w modelach dootrzewnych. Ponadto, ponieważ guzy nie są łatwo obserwowane po podaniu ortotopowych lub wewnątrzotrzewnowych zastrzyków, zazwyczaj stosuje się nieinwazyjną technikę obrazowania bioluminescencyjnego do monitorowania postępu guza. Dlatego zarówno modele dootrzewnowkowe, jak i dookołourkowe wymagają dodatkowego sprzętu umożliwiającego nieinwazyjne obrazowanie guzów12. Ostatecznie wybór modelu dla każdego badania zdecydują cele eksperymentalne, dostępność zasobów oraz umiejętności techniczne.
Niniejszy raport opisuje krok po kroku protokół ustalania modeli myszego ksenoprzeszczepu wewnątrzotrzewnowego i wewnątrzbursalnego z wykorzystaniem ludzkich linii komórkowych raka jajnika. Modele te można ustanowić poprzez przeszczepienie komórek do immunokompromitowanych szczepów myszy, takich jak NSG (NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ) lub Foxn1 nago (B6). Cg-Foxn1 nu/J). Ta sama metoda może być dostosowana do generowania modeli przeszczepów (syngeneicznych). Podczas tworzenia modeli alloczowych komórki nowotworowe jajnika myszy są wszczepiane do immunokompetentnych myszy o tym samym tle genetycznym. Ponieważ modele allotransplanttu są opracowywane z użyciem immunokompetentnych myszy, są one przydatne do badania, jak różne czynniki regulują mikrośrodowisko guza jajnika, rolę układu odpornościowego w postępie raka jajnika oraz skuteczność immunoterapii. Oprócz ustalenia modeli myszy z ksenograftem wewnątrzotrzewnowkowym i wewnątrzbursalnym, raport ten opisuje również, jak wykorzystać obrazowanie bioluminescencyjne do nieinwazyjnego monitorowania progresji guza w tych modelach.

<table><tbody><tr><td>0,22 um sterylny filtr strzykawkowy, 33mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-720-004</td><td></td></tr><tr><td>1 ml strzykawki TB</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>21G, igła 1 cal</td><td>BD</td><td>305167</td><td></td></tr><tr><td>30G, &frac12; igła calowa</td><td>BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>5-calowe zakrzywione kleszcze cienkie</td><td>Fisher Scientific</td><td>1631</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Szew monofilamentowy chłonny</td><td>Maxon<nas>TM&nbsp; < tam></td><td>6532-11</td><td></td></tr><tr><td>Gaz alkoholowy (70% izoprolyl alkohol)</td><td>Dukal Corp</td><td>80003156</td><td></td></tr><tr><td>Betadyna (1% roztwór jodu)</td><td>Produkty Purdue</td><td>367618150085</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen Inj, 50 mg/ml</td><td>Levafen</td><td>RXLEVA50-20INJ</td><td></td></tr><tr><td>Wirówka &nbsp;</td><td>Eppendorf</td><td>5702</td><td></td></tr><tr><td>D-lucyferyna</td><td>Syd Labs</td><td>MB000102-R70170</td><td></td></tr><tr><td>Mikrokleszcze rozcięte jubilerskie, cienka końcówka</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-953E</td><td></td></tr><tr><td>Maść do oczu</td><td>Medvet</td><td>11897</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki z cienkim końcem</td><td>Fisher Scientific</td><td>8940</td><td></td></tr><tr><td>Podkładka grzewcza</td><td>Sunbeam</td><td>731-500</td><td></td></tr><tr><td>Instrumenty rozcinające kleszcze z drobnymi punktami</td><td>Fisher Scientific</td><td>S08096</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka insulinowa 3/10ml</td><td>BD</td><td>328438</td><td></td></tr><tr><td>Izofurane</td><td>Fluriso</td><td>Fluriso250</td><td></td></tr><tr><td>IVIS</td><td>Perkin Elmer</td><td>IVISLMIII</td><td></td></tr><tr><td>Mayo – uchwyt na proste igły Heger</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-966</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny 1X PBS, bez wapnia i magnezu</td><td>Corning</td><td>21-040-CV</td><td></td></tr><tr><td>Sterylne końcówki bawełniane</td><td>McKeesson</td><td>24-106-1S</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny wskaźnik</td><td>Kendall</td><td>3033</td><td></td></tr><tr><td>Sterylna podpaska/ręcznik/osłona, bez efektów</td><td>Henry-Schein</td><td>100-9687</td><td></td></tr><tr><td>Potrójna maść antybiotykowa</td><td>Globe</td><td>4006-4SL</td><td></td></tr><tr><td>Trypsyna-EDTA (0,25%), czerwień fenolowa</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr></tbody></table>

klinicznie istotne modele nowotworów nadających się do przeszczepiania do badania przerzutowego raka jajnika i odpowiedzi terapeutycznej u myszy

Clinically Relevant Transplantable Tumor Models for Studying Metastatic Ovarian Cancer and Therapeutic Response in Mouse

Przerzutowy rak jajnika to niezwykle śmiertelny nowotwor ginekologiczny, który nie posiada skutecznych opcji leczenia. Opracowanie klinicznie przekładalnych metod terapeutycznych dla pacjentek z rakiem jajnika zależy od zrozumienia czynników wywołujących przerzuty raka jajnika. Podczas gdy większość guzów litych wykazuje przerzuty hematogenne, komórki raka jajnika rozprzestrzeniają się głównie drogą dootrzewną. Proces ten polega na odłączeniu i usuwaniu komórek nowotworowych z pierwotnego guza do jamy otrzewnej, które następnie zyskują właściwości pozwalające im opierać się anoikis i tworzyć wielokomórkowe agregaty. Agregaty te następnie przyczepiają się do i wnikają do międzybłonowej wyściółki otrzewnej, tworząc zmiany przerzutowe. Klinicznie istotne modele in vivo są niezbędne do zrozumienia, jak czynniki komórkowe i mikrośrodowisko guza wpływają na różne etapy procesu przerzutowego oraz do testowania nowych strategii terapeutycznych. Dwa modele myszy do przeszczepiania szeroko stosowane do badania przerzutów i odpowiedzi terapeutycznej raka jajnika to modele dootrzewnowkowe i intrabursalne. W tym raporcie opisujemy krok po kroku metodologię ustalania tych modeli oraz podkreślamy ich zalety i ograniczenia. Dodatkowo opisujemy, jak stosować obrazowanie bioluminescencyjne do nieinwazyjnego monitorowania progresji guza za pomocą tych modeli.

Reprezentatywne dane z intraperytonealnego modelu raka jajnika z wykorzystaniem komórek OVCAR8 znakowanych lucyferazą u myszy nago Foxn1 z niedoborem odporności przedstawiono na Rysunku 4. Stabilna ekspresja lucyferazy w tych komórkach umożliwiła podłużne monitorowanie progresji guza za pomocą nieinwazyjnego obrazowania bioluminescencyjnego z wykorzystaniem obrazownika IVIS, zgodnie z opisem w sekcji III. Dożylna iniekcja 5 milionów komórek OVCAR8-lucyferaza do jamy otrzewnowej myszy nago Fo...

Przedstawiamy tutaj krok po kroku protokół określający modele nowotworów wewnątrzotrzewnowych i wewnątrzburzowych, aby badać postęp raka jajnika, przerzuty oraz odpowiedź terapeutyczną. Ponadto opisujemy, jak stosować nieinwazyjne obrazowanie in vivo oparte na lucyferazzie w tych modelach do monitorowania postępu guza u myszy.

Klinicznie istotne modele nowotworów nadających się do przeszczepiania do badania przerzutowego raka jajnika i odpowiedzi terapeutycznej u myszy

Metastatic ovarian cancer is an extremely lethal gynecologic malignancy that lacks effective treatment options. Development of clinically translatable ...

Nasze badania koncentrują się na identyfikacji czynników molekularnych, które napędzają progresję raka jajnika oraz oporność terapeutyczną. Model ten może być wykorzystany do badania wpływu różnych czynników na progresję raka jajnika, a także do testowania nowych strategii terapeutycznych. W pierwszej kolejności należy pozyskać hodowlę komórkową raka jajnika.Gdy komórki osiągną 80% do 85% konfluencji, odessać pożywkę z płytki hodowlanej. Przemyć przylegające komórki dwukrotnie sterylnym 1X PBS bez wapnia i magnezu. Odessać PBS z płytki hodowlanej.Do płytki hodowlanej dodać 0,05% trypsyny-EDTA. Przenieść płytkę z komórkami do inkubatora z dwutlenkiem węgla z płaszczem wodnym o temperaturze 37 °C stosowanego do hodowli tkankowych i inkubować od jednej do pięciu minut. Po odklejeniu się komórek do płytki hodowlanej dodać pożywkę zawierającą FBS w stosunku 6 mL pożywki na każdy 1 mL użytej trypsyny.Ostrożnie pipetuj ciecz w górę i w dół, aby odczepić komórki od płytki do hodowli tkankowej i rozbić je do postaci zawiesiny pojedynczych komórek. Zbierz komórki do probówki stożkowej i wiruj przy 400G przez pięć minut w temperaturze pokojowej. Po usunięciu nadsączu zawierającego trypsynę, r

clinically-relevant-transplantable-tumor-models-for-studying

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Badania nad rakiem

Eksperymentalny mysi model przerzutów do płuc i immunoterapii CTL do analizy oddziaływań komórek nowotworowych z limfocytami T in vivo.

Model mysi eksperymentalnej przerzutowości oraz immunoterapii z adoptywnym transferem limfocytów CTL

Ortotopowe modele zwierzęce raka jajnika lepiej odwzorowują przebieg choroby u ludzi, a tym samym zwiększają naszą wiedzę na temat progresji nowotworu i odpowiedzi guza na terapię. W modelu mysim wykonuje się wstrzyknięcie do wnętrza woreczka otrzewnej komórek nowotworu jajnika wykazujących ekspresję lucyferazy. Leczenie podaje się poprzez zgłębnik żołądkowy. Wzrost guza monitoruje się za pomocą systemu obrazowania in vivo.

Obrazowanie in vivo i leczenie terapeutyczne w ortotopowym modelu raka jajnika u myszy

Aby zbadać wzrost guza oraz mikrośrodowisko nowotworowe in vivo, zastosowaliśmy syngeniczny i ortotopowy model raka jajnika u immunokompetentnych myszy. Przetransdukowaliśmy linię komórkową nowotworu mysiego (MOV1) białkiem fluorescencyjnym Katushka (MOV1KAT), a w niniejszej pracy przedstawiamy sposób jej ortotopowej implantacji do jajnika oraz obrazowanie in vivo.

Ortotopowy model surowiczego raka jajnika u immunokompetentnych myszy do obrazowania guzów in vivo i monitorowania odpowiedzi immunologicznych guza

Opisujemy nieinwazyjną platformę obrazowania zwierząt, która pozwala na wykrywanie, kwantyfikację i monitorowanie wzrostu i nawrotów raka jajnika. Ten model ksenoprzeszczepu dootrzewnowego naśladuje profil kliniczny pacjentek z rakiem jajnika.

Mysi model do nieinwazyjnego obrazowania w celu wykrywania i monitorowania nawrotu raka jajnika

Przerzuty raka jajnika charakteryzują się licznymi rozlanymi zmianami wewnątrzotrzewnowymi, tak że dokładne wizualne określenie obciążenia guzem jest trudne.  W niniejszym artykule opisano metodę ilościowego oznaczania obciążenia guzem przerzutowym in situ i ex vivo przy użyciu komórek nowotworowych znakowanych białkiem czerwonej fluorescencji (RFP) i obrazowania optycznego.

Kwantyfikacja przerzutów do raka jajnika do zatrzewnej

Opisany jest ortotopowy model pierwotnego guza raka piersi i chirurgiczne usunięcie pierwotnego guza w celu przedłużenia życia myszy w celu wytworzenia spontanicznych przerzutów. Wzrost i progresja guza są monitorowane i oznaczane ilościowo za pomocą obrazowania fluorescencyjnego lucyferazy.

Ortotopowy mysi model spontanicznych przerzutów raka piersi

Aby wyjaśnić wieloetapowy proces rozprzestrzeniania się raka jajnika w otrzewnej, obecne badanie przedstawia mysi eksperymentalny model pierwotnego rozwoju guza i przerzutów do otrzewnej poprzez ortotopową inokulację tymi komórkami nowotworowymi.<br...

Mysi eksperymentalny model pierwotnego rozwoju guza i przerzutów do otrzewnej za pomocą ortotopowej inokulacji komórkami raka jajnika

Implementacja ortotopowego modelu raka nerkowokomórkowego u myszy immunokompetentnych daje badaczowi klinicznie istotny system zdefiniowany przez obecność pierwotnego guza nerki i przerzutów do płuc u tego samego zwierzęcia. System ten może być stosowany do przedklinicznego testowania różnych metod leczenia in vivo.

Syngeniczny mysi model przerzutowego raka nerkowokomórkowego do ilościowej i podłużnej oceny terapii przedklinicznych

W tym protokole opisujemy mysi model niekompletnej chirurgicznej resekcji mięsaka tkanek miękkich do testowania terapii (neo)adjuwantowych.

Mysi model niekompletnie wyciętego mięsaka tkanek miękkich do testowania terapii (neo)adjuwantowych

Obecny protokół opisuje wstrzykiwanie komórek do kostniakomięsaka kości piszczelowej w celu wygenerowania modeli myszy z ortotopowym kostniakomięsakiem i przerzutami do płuc.

Wstrzyknięcie komórek kostniakomięsaka piszczelowego w celu wygenerowania ortotopowego kostniakomięsaka i mysich modeli przerzutów do płuc

University of Maryland Baltimore County.  Here we present a step-by-step protocol for establishing the intraperitoneal and the intrabursal tumor models to study ovarian cancer cancer progression, metasatsis, and therapeutic response. Further, we describe how to use luciferase-based non-invasive in vivo imaging in these models to monitor tumor progression in mouse.

Klinicznie istotne modele nowotworów nadających się do przeszczepiania do badania przerzutowego raka jajnika i odpowiedzi terapeutycznej u myszy

Przeglądaj więcej filmów