30 lipca 2008
Mikroskop świetlny jest podstawowym narzędziem dla biologa komórkowego, który powinien mieć dokładne zrozumienie jego działania, jak powinien być dostosowany do różnych zastosowań i jak powinien być utrzymywany zgodnie z wymaganiami, aby uzyskać maksymalną zdolność tworzenia obrazu i rozdzielczość. Elementy mikroskopu są szczegółowo opisane tutaj.
Mikroskopy świetlne są niezbędnymi narzędziami w badaniach biomedycznych. Elementy optyczne pozwalają na znacznie większą rozdzielczość obrazu niż oglądanie gołym okiem. Łącząc mikroskopię z cyfrowym przetwarzaniem obrazu, naukowcy mogą zwiększyć widoczność obrazu i dokonać precyzyjnych pomiarów ilościowych.
Ten film przeprowadzi Cię przez mikroskop, główne elementy i ich funkcje. Cześć, nazywam się Victoria Sanon Frolic i pracuję w Core Optical Imaging Facility w Centrum Nauk o Zdrowiu Uniwersytetu Teksańskiego w San Antonio. Dzisiaj pokażę Ci główne elementy Twojego mikroskopu życiowego i ich podstawowe funkcje.
Wybierzmy się więc na wycieczkę po Twoim mikroskopie. Przed użyciem mikroskopu najlepiej zapoznać się z jego elementami i ich funkcjami. Jest to mikroskop światła odwróconego Nikon eclipse TI wyposażony zarówno w mikroskopię światła przechodzącego, jak i epifluorescencyjną.
Kierunek wzdłuż osi mikroskopu będzie określany jako oś Z, a kierunki prostopadłe jako osi X i Y. Najpierw przyjrzymy się tubusowi korpusu okularu, części nosowej zawierającej obiektywy i stolikowi. Są to główne elementy tworzące obraz mikroskopu.
Elementy te są interfejsem między obserwatorem a mikroskopem. Chwytając podstawę tubusów okularów lornetki, można regulować odległość między źrenicami, zbliżając je do siebie lub oddalając od siebie. Pozwala to na wygodne oglądanie obojgiem oczu.
Jednocześnie ostrość okularu może być teraz regulowana dla każdego oka niezależnie. Powiększenie okularu zaznaczone jest na tubularze. Kamery są rutynowo montowane na mikroskopach w celu pozyskiwania obrazu.
Ten konkretny luneta wykorzystuje adapter z mocowaniem C do przymocowania kamery CCD do bocznego portu korpusu mikroskopu. Pokrętło na mikroskopie obraca się w celu ustawienia pryzmatu w celu skierowania obrazu tworzącego promienie świetlne z dala od okularów w kierunku kamery, która jest zamontowana na porcie kamery. Różne obiektywy, które decydują o większości powiększenia i rozdzielczości, są zamontowane na obrotowej końcówce nosowej.
Każdy obiektyw jest oznaczony specyfikacjami, takimi jak powiększenie, apertura numeryczna, wymagane medium zanurzeniowe, takie jak gliceryna olejowa lub grubość szkiełka nakrywkowego, oraz inne cechy specjalne, takie jak tryb oświetlenia, światło pozostawiające okular i noski nieostre lub rzutowane w nieskończoność. Tubus korpusu zawiera soczewkę z dodatnim ogniskowaniem, która ustawia ostrość światła obrazowania dla okularu lub aparatu. Teraz, gdy pokazałem Ci elementy tworzące obraz lunety, przyjrzyjmy się komponentom, które pomogą nam skupić się na obrazie i dokonać korekt w świetle przechodzącym.
Następnie przyjrzymy się etapowi próbki, który jest mechanicznym nośnikiem, który utrzymuje szkiełko próbki. Obracając pokrętła, możesz regulować próbki w kierunkach x i y. W konfiguracji mikroskopu odwróconego stolik jest zamocowany, a próbka jest ogniskowana poprzez przesuwanie obiektywów w górę iw dół wzdłuż AE Z za pomocą pokręteł kursu i precyzyjnej ostrości na korpusie mikroskopu.
Teraz przyjrzymy się elementom transiluminacji mikroskopu świetlnego, które zapewniają światło do wizualizacji twoich próbek. Po pierwsze, mamy lampę i obudowę, która zapewnia światło do oświetlenia próbki W przypadku mikroskopii świetlnej lampa jest zazwyczaj niskonapięciową żarówką halogenową z żarnikiem wolframowym, którą można regulować w celu kontrolowania natężenia światła. Za źródłem światła można umieścić migawkę, aby kontrolować czas świecenia.
Tuż po źródle światła następuje regulacja przysłony pola pola, membrana kontroluje obszar lub pole badanej próbki. Dalej znajduje się element znany jako kondensator, którego główną funkcją jest skupianie jasnego, równomiernego oświetlenia na próbce. Kondensator lub membrana irysowa znajdująca się na spodzie kondensatora kontroluje kąt świecenia stożka skraplacza próbki.
Regulacja tej przysłony steruje wielkością i aperturą numeryczną stożka świetlnego skierowanego w stronę preparatu, co skutkuje prawidłowym oświetleniem, kontrastem i głębią ostrości optycznej regulacji przysłony kondensatora skutkuje prawidłowym wypełnieniem przedniej soczewki soczewki obiektywu. Idealnie byłoby, gdyby ta regulacja była dokonywana dla każdego obiektywu, aby w pełni wykorzystać potencjał obiektywu. W przypadku oświetlenia fluorescencyjnego epi źródłem światła jest zazwyczaj ksenonowa lub rtęciowa lampa łukowa.
W naszym lunecie mamy lampę łukową na bazie rtęci, z którą należy obchodzić się ostrożnie, ponieważ mogą wybuchnąć. W przypadku niewłaściwej obsługi. Podczas montażu żarówki należy nosić rękawice, ponieważ odciski palców i zanieczyszczenia mogą tworzyć gorące punkty i powodować pękanie lampy, zdecydowanie zaleca się, aby nie uruchamiać lampy łukowej dłużej niż liczba godzin, na którą jest oceniana.
Ścieżka światła fluorescencyjnego obejmuje przysłonę polową i przysłonę. Podobnie jak w przypadku ścieżki światła transmisyjnego. Poza tymi membranami światło napotka zestaw filtrów, które wybierają szerokość pasma światła i kierują oświetlenie do obiektywu, aby dotrzeć do próbki w ścieżce oświetlenia epi, obiektyw działa zarówno jako kondensator, jak i obiektyw.
Właśnie pokazaliśmy Ci główne elementy Twojego mikroskopu świetlnego. Rozpocząłem od pokazania elementów tworzących obraz mikroskopu, a mianowicie okularów, obiektywu i kamery CCD. Następnie przejrzeliśmy manipulację stolikiem, pokrętła regulacji ostrości i kondensator.
Więc to wszystko. Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia z mikroskopią.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Mikroskop świetlny jest podstawowym narzędziem w badaniach biomedycznych, zapewniającym lepszą rozdzielczość obrazu w porównaniu z oka ludzkim. Ten artykuł szczegółowo opisuje główne komponenty mikroskopu świetlnego i ich funkcje, co jest niezbędne dla badaczy w tej dziedzinie.
Understanding light microscope components is foundational for reliable cellular imaging in early discovery workflows. Proper alignment and maintenance ensure reproducible image quality, supporting target validation and assay development. This knowledge reduces technical variability and enhances predictive confidence in preclinical models.
The light microscope supports discovery biology through hypothesis testing and pathway clarification, enabling early-stage biological de-risking.