Cromatografia em camada fina

Fonte: Lara Al Hariri da Universidade de Massachusetts Amherst, MA, EUA

1. Preparação de SoluçõesExpandir

   Aqui, mostramos a preparação laboratorial para 10 alunos trabalhando em duplas, com algum excesso. Por favor, ajuste as quantidades conforme necessário.

   • Antes de começar, coloque um jaleco, óculos de segurança e luvas de nitrilo. Você trabalhará com hexano, etanol e acetato de etila, que permeiam luvas finas de nitrilo em minutos, portanto, troque suas luvas imediatamente se houver algum solvente nelas.
   • Prepare soluções de ~1 mg/mL de éter butil fenílico, fenol, ácido benzóico, aspirina, cafeína e paracetamol. Use uma balança analítica ou uma micropipeta para medir aproximadamente 10 mg ou 10,7 μL de éter fenílico butílico em um frasco de vidro de 20 mL. nota: O éter butílico fenílico é um líquido à temperatura ambiente e deve ser manuseado em uma capela de exaustão.
   • Meça 10 mL de etanol, adicione-o ao frasco e rotule-o como '1 mg/mL de éter butílico fenílico em etanol'.
   • Prepare as outras cinco soluções, começando com fenol. Tara um frasco de vidro de 20 mL e meça 10 mg de fenol nele.
   • Em seguida, adicione 10 mL de etanol ao frasco e mexa a mistura com uma vareta de vidro até que o fenol esteja completamente dissolvido.
   • Tampe o frasco e rotule-o como '1 mg/mL de fenol em etanol'. Repita esse processo para preparar soluções de 1 mg/mL de ácido benzóico, aspirina, cafeína e paracetamol. Guarde os frascos no exaustor do instrutor ou em um espaço de trabalho comum.
   • Preparar as três soluções desconhecidas de analgésicos comercialmente disponíveis em etanol. As formulações de comprimidos podem variar, portanto, você pode pesar os comprimidos com antecedência para estimar a porcentagem de peso dos ingredientes ativos.
   • Use um pequeno almofariz e pilão para esmagar um comprimido de paracetamol em pó. Meça 10 a 15 mg do pó em um frasco de vidro de 20 mL.
   • Em seguida, adicione 10 mL de etanol absoluto ao frasco e mexa a mistura com uma vareta de vidro limpa por 1 – 3 min. Tudo bem se algum sólido permanecer no fundo do frasco.
   • Tampe o frasco e rotule-o como 'Desconhecido 1'. Descarte o pó restante e limpe e seque completamente o almofariz e o pilão.
   • Use 10 – 15 mg de um comprimido de aspirina triturado para fazer a solução desconhecida 2 e 30 – 40 mg de um comprimido triturado contendo uma mistura de paracetamol, aspirina e cafeína para fazer a solução desconhecida 3 da mesma maneira. Armazene as soluções desconhecidas com as soluções conhecidas.
   • Faça as misturas de solventes que os alunos usarão como eluentes. Prepare 100 mL de uma mistura de hexano a 60% e acetato de etila a 40%. Meça 60 mL de hexano e despeje em um béquer de 250 ou 400 mL. Adicione 40 mL de acetato de etila e mexa a mistura até que fique homogênea.
   • Rotule um frasco de 150 mL '60% hexano, 40% acetato de etila (v/v)' e use um funil para transferir a solução. Tampe a garrafa antes de colocá-la de lado.
   • Faça 100 mL de uma mistura de acetato de etila a 90% e hexano a 10%. Meça 10 mL de hexano e despeje em um béquer de 250 ou 400 mL. Em seguida, adicione 90 mL de acetato de etila e mexa bem a mistura.
   • Rotule um frasco de 150 ml como «acetato de etilo a 90%, hexano a 10% (v/v)». Transfira a mistura para a garrafa e tampe bem. Armazene os solventes e as misturas de solventes em um armário de inflamáveis.
2. Preparação do LaboratórioExpand
   • Preparar ou obter recipientes de resíduos para vidro, iodo e resíduos orgânicos não halogenados. Certifique-se de que cada pia de laboratório tenha um suprimento de toalhas de papel.
   • Conecte e teste uma pequena lâmpada UV de 254 nm em uma área compartilhada.
   • Configure uma placa de aquecimento em uma capela central, rotule um béquer de 500 mL como 'câmara de iodo' e coloque aproximadamente 1 a 2 g de iodo no béquer. Cubra-o com um vidro grande do relógio e coloque-o na placa de aquecimento.
   • Defina os seguintes artigos de vidro e equipamentos em cada estação de laboratório do aluno (sugerimos que os alunos trabalhem em pares):

     3 frascos de vidro com tampa de rosca de 50 mL

     3 cilindros graduados de 10 mL

     1 lápis

     1 Caneta de rotulagem

     1 Par de pinças

     1 Régua pequena com incrementos métricos

   • Rotule um frasco de 150 mL como '100% hexano', despeje cerca de 100 mL de hexano no frasco e tampe-o bem. Guarde o frasco de hexano e coloque as misturas de hexano e acetato de etila na coifa do solvente com o frasco de hexano puro.
   • Organize as seis soluções conhecidas e as três soluções desconhecidas em uma bancada compartilhada.
   • Coloque recipientes com capilares de vidro descartáveis, papéis de filtro de tamanho médio e placas TLC nas proximidades.
   • No início do laboratório, atribua aleatoriamente um composto desconhecido a cada grupo de alunos.
   • Quando alguns alunos estiverem na metade do primeiro desenvolvimento, aqueça o iodo a 110 °C na placa de aquecimento.
   • Após o laboratório, deixe o copo esfriar e descarte os resíduos de iodo adequadamente.