PCR - Reação em Cadeia da Polimerase

O objetivo da PCR, reação em cadeia da polimerase, é amplificar uma sequência genética. Neste exemplo, um gene de interesse será ampliado a partir de DNA purificado. Para realizar a amplificação, uma polimerase é necessária para sintetizar o novo DNA.

Um primer, uma pequena peça de DNA de fita simples que compartilha homologia com o gene de interesse, também é necessário. Finalmente, nucleotídeos únicos chamados trifosfatos de desoxinucleotide, ou dNTPs, são usados para fazer a nova vertente. A primeira etapa da PCR é aquecer a mistura, que desnatura o DNA.

Em seguida, a reação é resfriada e os primers irão se alinhar para sua região homóloga. Uma vez ligada, a reação é aquecida a uma temperatura ótima para a polimerase. A polimerase então reconhece o complexo primer de DNA e começa a síntese da nova vertente, usando os dNTPs na solução.

A reação é então aquecida e prossegue como descrito em em ciclos adicionais. Após o terceiro ciclo, existem, no total, oito cópias do gene. Após o quarto ciclo, dezasseis exemplares.

E no quinto ciclo, trinta e duas cópias. O número de cópias irá continuar a crescer exponencialmente. Depois de trinta ciclos, existem pouco mais de um bilhão de cópias.