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As plantas transgênicas são produzidas pela introdução de um gene estranho no genoma de uma planta. Essas plantas podem ser desenvolvidas por vários motivos, incluindo resistência a vírus ou pragas, maior rendimento ou produção de proteínas terapêuticas.
Para produzir uma planta transgênica, um gene de interesse e seu promotor são introduzidos no protoplasto vegetal, uma célula vegetal sem parede celular, incubando ambos em um meio contendo polietilenoglicol.
O protoplasto recombinante é cultivado em meio estéril na presença de reguladores de crescimento e nutrientes.
As células do protoplasto crescem indefinidamente, produzindo uma massa de células indiferenciadas chamada calo. Algumas células do calo, chamadas células totipotentes, dão origem a novos brotos e raízes, que podem se desenvolver em uma planta totalmente nova.
Plantas transgênicas também podem ser criadas usando a bactéria Agrobacterium tumefaciens, uma bactéria gram-negativa encontrada no solo. Esta bactéria é um patógeno que normalmente causa doenças em plantas e contém um plasmídeo Ti que pode se integrar ao genoma de uma célula vegetal.
O plasmídeo Ti tem duas regiões de interesse - T-DNA ou região de DNA de transferência que pode ser inserida no genoma da célula hospedeira e na região de virulência para auxiliar na transferência de T-DNA para a célula hospedeira.
Este plasmídeo é modificado pela inserção de um gene desejado na região T-DNA e um gene de resistência a antibióticos para permitir o crescimento seletivo de organismos contendo plasmídeos. O plasmídeo recombinante é então inserido na bactéria aplicando um pulso elétrico para aumentar a permeabilidade celular e permitir a absorção do plasmídeo na bactéria.
O plasmídeo recombinante de Agrobacterium tumefaciens é cultivado em meio de cultura contendo antibióticos.
Partes da planta, como os nódulos cotiledonares de um tomateiro, são cortadas e incubadas no meio contendo bactérias.
As células vegetais feridas na borda do nó do tronco liberam compostos que atraem as bactérias. A bactéria infecta a planta e libera o plasmídeo recombinante, que então transfere o gene estranho para o genoma da célula vegetal.
Apenas as células transformadas com DNA recombinante e genes resistentes a antibióticos sobrevivem no meio contendo antibióticos.
As células transformadas agora formam um calo e se desenvolvem em uma nova planta transgênica carregando um transgene.
A tecnologia de DNA recombinante chamada transgênese é frequentemente usada para adicionar um gene estranho ou remover um gene prejudicial de um organ…
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