Princípios de Cromatografia em Coluna

A cromatografia em coluna é uma técnica bioquímica usada para separar compostos com base em suas propriedades físicas e químicas.

Tem dois componentes principais - a fase estacionária sólida ou a matriz e a fase móvel líquida ou o solvente.

A coluna embalada com matriz é carregada com uma amostra, como uma mistura de proteínas. O solvente é então usado para transportar a amostra através da coluna.

Dentro da coluna, a matriz atua como uma malha molecular filtrando as proteínas com base em seu tamanho ou interação com a matriz. As proteínas maiores tendem a viajar mais rápido do que as proteínas menores, resultando em uma separação baseada no tamanho.

Além disso, as proteínas em uma amostra podem interagir com a matriz. As interações fracas permitem que as proteínas passem rapidamente, enquanto as interações fortes retêm proteínas dentro da coluna.

Uma mudança gradual no pH ou força iônica do solvente altera as interações das proteínas com a matriz e ajuda a eluír as proteínas em frações separadas.