Eletroforese Bidimensional em Gel

A eletroforese em gel bidimensional combina duas dimensões para a separação de proteínas: a primeira com base na carga e a segunda em massa.

A primeira dimensão usa o método de foco isoelétrico ou IEF. Aqui, a amostra de proteína é carregada em um gradiente de pH imobilizado ou tira de IPG.

Ao aplicar corrente elétrica, as proteínas se movem através do gradiente de pH na tira, imobilizando-se em seu ponto isoelétrico - o pH, onde as proteínas não carregam carga líquida.

Em seguida, a tira IPG é tratada com SDS e carregada em um gel de poliacrilamida para separação pela segunda dimensão usando SDS-PAGE.

Em uma direção perpendicular ao IEF, as proteínas se separam eletroforeticamente com base na massa.

As proteínas separadas são então visualizadas após a coloração.

A eletroforese em gel bidimensional é uma técnica de alta resolução que pode identificar proteínas semelhantes que diferem por até mesmo um resíduo de aminoácido carregado.

Além disso, pode detectar modificações proteicas dentro de uma célula ou organela durante diferentes condições e estágios de desenvolvimento.