Microscopia de Contraste de Fase e Interferência Diferencial

As células vivas não coradas são transparentes e difíceis de ver sob um microscópio óptico. Os microscópios de contraste de fase e contraste de interferência diferencial ou DIC permitem sua visualização criando imagens de maior resolução e contraste mais nítido.

Quando uma amostra é iluminada em contraste de fase, alguma luz é difratada pelos componentes da célula, enquanto o restante passa diretamente. A extensão da difração depende dos índices de refração dos componentes celulares.

À medida que a luz difratada e a luz direta interferem, partes da amostra parecem brilhantes se as ondas estiverem em fase e escuras se estiverem fora de fase. Isso cria imagens de alto contraste de grandes organelas e seções de tecido fino.

Mudanças bruscas nos índices de refração produzem um halo ao redor da imagem.

Tais artefatos estão ausentes no DIC, que usa uma fonte de luz polarizada para modular as ondas de luz que passam pela amostra.

O contraste da imagem depende da taxa de mudança dos índices de refração em toda a amostra. Mudanças acentuadas geram imagens de alto contraste com um aparente efeito tridimensional.

O DIC ajuda a visualizar espécimes grossos, como fatias de cérebro, ovos ou embriões.