Microscopia Crioeletrônica

A microscopia crioeletrônica ou crio-EM examina amostras biológicas congeladas em temperaturas criogênicas abaixo de -150 °C.

Ao contrário do EM convencional, o crio-EM não requer a fixação e desidratação de uma amostra, o que ajuda a preservar o estado nativo das estruturas biológicas.

Os elétrons de alta energia usados no EM podem danificar as ligações químicas de uma amostra. O congelamento da amostra ajuda a evitar esse dano, permitindo imagens próximas à resolução atômica.

No cryo-EM, pequenas amostras biológicas em solução são vitrificadas, ou seja, congeladas rapidamente, em etano líquido. A vitrificação fixa a amostra em seu estado nativo em uma fina camada de água, e a água na amostra forma um estado semelhante ao vidro sem o aparecimento de cristais de gelo.

Amostras mais espessas, como células e tecidos, não podem ser vitrificadas em uma fina camada líquida. Portanto, essas amostras podem ser estudadas usando o método crio-EM de cortes vítreos. Neste método, uma amostra é primeiro vitrificada por congelamento de alta pressão e, em seguida, cortada em seções ultrafinas a -140 ° C antes de ser observada usando crio-EM.