Cromatografia Líquida de Alta Eficiência: Introdução

Na cromatografia líquida de alta eficiência ou HPLC, a separação ocorre em uma coluna analítica preenchida com uma fase estacionária ligada à base de sílica.

A separação dos analitos ocorre com base nas interações entre a fase estacionária sólida e a fase móvel líquida.

A superfície da sílica também consiste em grupos silanol não reagidos, o que causa interações polares que levam ao rejeito.

Assim, os grupos silanol reagem com trimetilclorosilano para formar a fase estacionária com tampa final.

Uma coluna de proteção embalada com a mesma fase estacionária é colocada antes da coluna analítica para protegê-la contra contaminação e é substituída regularmente para aumentar a vida útil da coluna.

A polaridade da fase móvel desempenha um papel crucial na eluição dos analitos.

A cromatografia de fase normal usa uma fase estacionária polar e uma fase móvel não polar.

Em contraste, a cromatografia de fase reversa usa uma fase estacionária não polar e uma fase móvel polar.