Bancário cérebro e amostragem sistemática de material biológico fornece a base para estereologia imparcial e maximiza o potencial de dados obtidos de cada espécime.
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Artigo de método
Banking cérebro: Fazer oa maioria de espécimes sua Pesquisa
Neste artigo
Resumo
Resumo
Estereologia imparcial é um método para estimar com precisão e eficiência o número de neurônios total (ou outro tipo de célula) em uma determinada área de interesse
Protocolo
Parte 1: Pré-processamento de tecido
- Tecido deve ser bem perfundidos com paraformaldeído, glutaraldeído ou formalina. Isto pode ser conseguido através de perfusão transcardial padrão normalmente utilizado para a colheita de outros órgãos. No presente estudo o assunto estava profundamente sedado com cloridrato de cetamina (10 mg / kg, im), sacrificados com uma overdose de pentobarbital sódico (25 mg / kg, iv) e perfundidos transcardially com 0,1 M PBS até que esteja completamente sangrar. Isso é seguido por uma solução de paraformaldeído 4% em PBS por 5 min (~ 1 litro).
- O cérebro deve ser stereotaxically bloqueado, retirados do crânio, pesado, e v....
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Discussão
Amostragem sistemática é um método barato pretende maximizar material de pesquisa. Esta estratégia de amostragem foi desenvolvido em conformidade com a legislação de estereologia imparcial que requer amostragem sistemática em toda a região. É fundamental que a ordem das secções para cada série é mantida. Em nosso laboratório temos utilizado com sucesso este método para operações bancárias tanto hamster e não-humanos seções cérebro dos primatas. Até agora, nós coletamos seções cérebro perto de 20 mil macacos vervet (.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a declarar.
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer Ikiel Ptito por seu contínuo apoio técnico.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Glicol etileno | Fisher Scientific | E178-4 | |
| Poli(vinilpirrolidona) | Fisher Scientific | BP431-500 | |
| Meio de inclusão Thermal Scientific | Fisher Scientific |
Referências
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M.
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Reimpressões e permissões
