Técnica necessária para visualizar o coração batendo em larvas e adultos Drosophila São apresentados. Cada fase da vida exige uma metodologia diferente.
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Artigo de método
Visualizar o coração batendo no Drosophila
Neste artigo
Resumo
Protocolo
Antes de começar a
Coração do adulto
- Recém preparar hemolinfa artificial (AH) solução contendo 108mm Na +, 5mM K +, 2mM de Ca 2 + 8mm, MgCl 2, 1 mM NaH 2 PO 4, 4 mM NaHCO 3, sacarose 10mM, trealose 5mM, HEPES 5mM (pH 7.1, todos os reagentes de Chemicals Sigma). A sacarose e trealose deve ser adicionado ao AH a partir de soluções estoque refrigerado imediatamente antes do uso, a fim de evitar a contaminação bacteriana.
- AH trazer à temperatura ambiente e oxigenar a solução por via aérea borbulhando por pelo menos 15 min.
- Puxe vários capilares fino....
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Discussão
O modelo de Drosophila provou ser uma poderosa ferramenta genética que tem sido utilizado para tratar uma variedade de questões científicas que vão desde desenvolvimento embrionário para a aprendizagem e memória. Recentemente, este organismo modelo versátil, tem sido usado para investigar a genética da função cardíaca na mosca. Uma série de tentativas para quantificar a fisiologia do coração em adultos Drosophila têm contado com observações feitas em moscas intacta através da cutícula abdominal. A maioria dessas abordag.......
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Agradecimentos
KO é apoiado por uma bolsa da American Heart Association.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Tesoura cirúrgica de mola microdissecção (curva) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5611 | Indicada para cortes gerais (Etapa 3) |
| Tesoura cirúrgica de mola microdissecção (reta) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5620 | |
| Pinça Dumont nº 55 | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Pinça Dumont nº 5 | Fine Science Tools | 11295-10 | |
| Capilares de vidro, 100ul | VWR international | 53432-921 | |
| Capilares de vidro, finos | Science Products | GB100T8P | |
| Pipetador | Sutter Equipment | P-97 | Funcionam tanto pipetadores horizontais quanto verticais |
| Tubo plástico | Tygon | 1/16” de diâmetro interno | para capilares de 100μl |
| Tubo plástico | Tygon | 1/32” de diâmetro interno | para capilares pequenos |
| Adesivo tecidual Histoacryl® | B. Braun Medical |
Referências
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M.
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Reimpressões e permissões
