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Ensaio de agressão: um método para estudar o comportamento agressivo do peixe-zebra em resposta a um espelho

April 30th, 2023

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Abstract

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Fonte: Way G.P., et al. Ensaios de ousadia, agressão e cardume para síndromes comportamentais do peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2016)

O artigo descreve um ensaio para estudar a agressividade do peixe-zebra. O método usa um espelho simples e observa a resposta comportamental do peixe-zebra em relação ao seu próprio reflexo no espelho.

Protocol

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Conduzindo o ensaio de agressão

  1. Realize o ensaio de agressão em um tanque retangular de 19 L medindo 30 cm x 15 cm x 10 cm. Equipe o tanque em divisórias opacas externas ao redor de três lados do tanque de agressão, deixando a frente exposta para visualização, para reduzir estímulos externos indesejáveis. Divida o tanque com marcações externas em quatro quadrantes retangulares iguais e fixe um espelho permanentemente (com calafetagem de silicone) dentro do quadrante inferior esquerdo, inclinado a 22,5° formando um triângulo retângulo contra o lado esquerdo do tanque.
  2. Certifique-se de que a temperatura da água no tanque de aclimatação e no tanque de agressão esteja dentro de 2 °C do rack da caixa. Para fazer isso, tenha água fresca e envelhecida pré-aquecida a 27,5-28,5 ° C pronta para adicionar ao tanque de agressão. nota: É importante trocar a água entre cada ensaio para eliminar pistas olfativas injustificadas.
  3. Transfira, por ventosa, um peixe focal do rack de alojamento para um tanque de aclimatação separado, onde ele se aclimatará por 10 min.
    nota: É importante reduzir o estímulo introduzido no peixe por meio do manuseio inadequado. Transfira indivíduos conforme descrito anteriormente. Especificamente, coloque manual e cuidadosamente um pequeno copo de plástico transparente no tanque de interesse. Sem perturbar o peixe tanto quanto transferi-lo usando uma rede, coloque lentamente o peixe no copo.
  4. Certifique-se de que a câmera de vídeo esteja pronta para gravar, confirmando se o tanque de ensaio de agressão (consulte a etapa 1.1) está em foco e, imediatamente antes de transferir o indivíduo para o tanque de agressão, pressione gravar no dispositivo. Transfira peixes focais via ventosa do tanque de aclimatação para o tanque de agressão.
    nota: É importante registrar antes de os peixes entrarem no tanque de agressão para rastrear a hora exata de entrada.
  5. Registre o tanque de agressão por 10 minutos e 30 segundos e, em seguida, coloque os peixes focais do tanque de agressão de volta no tanque de aclimatação.
  6. Ao assistir à gravação, aguarde 30 segundos após o peixe ter sido introduzido no tanque como um período adicional de aclimatação antes de pontuar comportamentos.
  7. Usando o sistema de pontuação JWatcher definido para comportamentos agressivos, quantifique os seguintes comportamentos por 10 min: Tempo gasto perto do espelho, número de abordagens do espelho, número de dardos, número de tentativas de mordida (abertura da boca na direção do espelho) e número de exibições laterais (ereção da nadadeira dorsal, peitoral, anal e caudal).
  8. Marque um único ensaio de agressão pelo menos duas vezes, até que o ensaio seja pontuado com alta concordância entre as iterações.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Tanque retangular de 19 L Aquele lugar de peixe 211932
Espelho Quadrado ArtMinds, Pacote de Valor 3" x 3" Michaels 10334162
Sistema de rack de peixe-zebra Aquaneering Inc ZS550
Lente Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO Corporação NikonNA
Câmera CCD Hitachi KP-D20APrescott's, Inc.NA
JwatcherNANA

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Zebrafish AggressionMirror AssayAggression TankAcclimation TankPosition TrackingBehavioral AssayAggressive BehaviorsWater TemperatureVideo RecordingBehavior Scoring

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