Eletrofisiologia do peixe-zebra adulto: um método para medir a atividade elétrica extracelular de neurônios in vivo

Resumo

Fonte: Johnston, L., et al. Registro eletrofisiológico no cérebro de peixe-zebra adulto intacto. J. Vis. Exp. (2013)

O protocolo descreve o procedimento para realizar eletrofisiologia em peixe-zebra adulto. Este método pode ser usado para medir a atividade neural in vivo.

Protocolo

1. Eletrofisiologia

1. Desligue a torneira de parada de intubação e desconecte rapidamente a trava Luer que conecta a base de intubação ao gotejamento de tricaína.
   1. Mova a configuração de intubação intacta para o microscópio de eletrofisiologia e conecte-a ao sistema de perfusão.
   2. Ligue a água do habitat e perfunda a uma taxa de 1 ml / min por ~ 1 hora, a fim de lavar a tricaína.
2. Usando um micromanipulador sob controle visual, posicione o eletrodo secundário de forma que a ponta do eletrodo possa ser inserida na narina do animal ou no mergulho atrás da mandíbula superior.
3. Insira a agulha do eletrodo primá....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Água do habitat			pH 7,0-7,4, condutividade de 400-450 μS; mantido por Instant Ocean e Bicarbonato de sódio
0,4% de Tricaine Tamponada	Sigma-Aldrich	E10521	pH 7,2-7,4; armazenado a -20 oC
Tubos de seringa Luer lock de 60 ml	Becton, Dickinson e Companhia	309653
Torneiras de 3 vias com conexões Luer
0,010 em fio de prata	Sistemas AM, Inc.
Suporte de eletrodo da série Q
Placa de Petri Fisherbrand 100 mm x 15 mm	Fisher Científico	NC9299146
34 G Agulha chanfrada	Instrumentos de precisão mundiais, Inc.	NF34BV
37 cm x 42 cm Kimwip	Profissional da Kimberly-Clark	TW31KEM
Tubo de 1/8 de diâmetro
Tubo de 1 mm de diâmetro
Microscópio (Leica MZ APO)	Outro microscópio pode ser usado