Injeção ortotópica: implante de células cancerígenas específicas do tecido em um camundongo adulto

Resumo

Fonte: Katsuta, E., et al. Gerando um modelo de câncer de mama metastático ortotópico murino e realizando mastectomia radical murina.J. Vis. Exp.(2018).

O vídeo demonstra a técnica de inoculação ortotópica do câncer de mama em um modelo de camundongo. Esta técnica produz uma alta taxa de tumorigênese com menos variabilidade no tamanho e forma do tumor em comparação com a injeção subcutânea ou não cirúrgica.

Protocolo

1. Preparação de células (para 10 camundongos)

NOTA: As células devem ser inoculadas dentro de 1 h após serem destacadas do prato para evitar a diminuição da viabilidade celular. Especificamente, a suspensão celular deve ser misturada à mistura de proteínas gelatinosas dentro de 15 minutos após separar as células do prato para manter sua viabilidade.

1. Cultura de células 4T1-luc2, uma linhagem celular de adenocarcinoma mamário de camundongo que expressa luciferase, em meio RPMI 1640 com 10% de FBS em uma incubadora umidificada a 37 ° C em 5% de CO₂.
2. Lave as células 4T1-luc2 aderentes em um pra....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Tesoura de micro dissecação	Roboz	RS-5983	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
5-0 suturas de seda	olhar	774B F
Instituto Memorial de Roswell Park 1640	Gibco	11875093	Para cultura de células
Soro fetal bovino	Gibco	10437028	Para cultura de células
Tripsina-EDTA (0,25%)	Gibco	25200056	Para cultura de células
Esterilizante seco (Germinator 500)	Braintree Científico	GER 5287-120V	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Porta-agulhas	Roboz	RS-7830	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Pinça Adson	Roboz	RS-5233	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Clipper	Wahl	Rolamento 9908-717	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Matrigel	Corning	354234	Para inoculação de células cancerígenas