Mastectomia radical: remoção cirúrgica de toda a glândula mamária de um camundongo para estudar a progressão do câncer

Resumo

Fonte: Katsuta, E., et al. Gerando um modelo de câncer de mama metastático ortotópico murino e realizando mastectomia radical murina. J. Vis. Exp (2018).

Este vídeo descreve uma técnica de mastectomia radical, que é usada para a remoção cirúrgica de toda a glândula mamária de um camundongo para estudar a progressão do câncer.

Protocolo

1. Mastectomia

NOTA: O momento da mastectomia é muito importante. Se for feito muito cedo, a metástase pulmonar não ocorre. Se for feito tarde demais, o tumor primário invadiu os principais vasos sanguíneos, o que torna uma ressecção oncológica completa um desafio. Assim, vários pontos de tempo foram testados para mastectomia para determinar qual ponto de tempo produziu o equilíbrio apropriado na espera pela metástase antes que a ressecção se tornasse muito desafiadora. Depois de fazer isso em mais de 50 experimentos com camundongos, foi demonstrado que a mastectomia 8 dias após a inoculação das células cancerígenas (ou quando o tamanho do tumor atinge 5 mm) era o ponto ideal para atingir esse equilíbrio.

1. Anestesiar um camundongo com 2-4% de isoflurano e fluxo de oxigênio de 0,2 L / min até que os camundongos respirem calmamente (2-3 min) e injetar 0,05 mg / kg de buprenorfina em seu ombro por via subcutânea.
2. Contenha os membros do camundongo usando fita adesiva e esterilize sua pele usando clorexidina, iodo e etanol a 75%, usando cotonetes.
3. Faça uma incisão na pele de 5 mm 2 mm à esquerda da cicatriz cirúrgica que foi feita na inoculação inicial das células cancerígenas, usando a tesoura de microdissecção. Estenda a incisão em direção à raiz do membro anterior para remover o tumor, a pele, incluindo a cicatriz cirúrgica, e a lesão em contato com o tumor, bem como a bacia do linfonodo axilar, na qual na maioria das vezes não existe linfonodo visível no momento da mastectomia. Certifique-se de não danificar a veia axilar.
4. Feche os defeitos da pele por costura, usando suturas estéreis 5-0 não absorvíveis em forma de "Y".
5. Retorne o mouse para uma gaiola limpa e monitore até que ele se recupere e esteja se movendo livremente (após ~ 1–2 min). Se um animal não parecer estar bem de saúde dentro de 24 h após a cirurgia, administre buprenorfina (0,2 mg / kg).
6. Remova as suturas sob anestesia (com isoflurano a 2-4% e fluxo de oxigênio de 0,2 L/min) 7 dias após a cirurgia.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Tesoura de micro dissecação	Roboz	RS-5983	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Pinça Adson	Roboz	RS-5233	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Porta-agulhas	Roboz	RS-7830	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
5-0 suturas de seda	olhar	774B	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Esterilizante seco (Germinator 500)	Braintree Científico	GER 5287-120V	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia
Clipper	Wahl	Rolamento 9908-717	Para inoculação de células cancerígenas e mastectomia