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Todos os procedimentos envolvendo animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.
1.18Imagem F-FDG PET e TC em camundongos
CUIDADO: Use equipamento de proteção ao manusear a radioatividade. Siga todos os procedimentos regulamentares aplicáveis ao manusear a radioatividade.
- Coloque a gaiola com os camundongos a serem fotografados em uma cama quente a 37 ° C 1 h antes da injeção de 18F-FDG para reduzir o consumo de gordura marrom de 18F-FDG.
nota: Jejuar os camundongos por 4 a 16 h pode ajudar a reduzir o consumo miocárdico de 18F-FDG.
- Pese o mouse e registre seu peso.
- Anestesiar o camundongo usando 2 a 3% de isoflurano em oxigênio a 0,5 a 2 L/min por 2 a 3 min usando uma câmara de anestesia mantida a 37 °C. Certifique-se de que o camundongo foi anestesiado beliscando o dedo do pé; nenhuma reação será observada se o camundongo tiver sido anestesiado. Aplique pomada oftálmica nos olhos para evitar qualquer ressecamento durante a anestesia.
- Diluir 18F-FDG (meia-vida radioativa de 109 min) em solução salina estéril a uma concentração de injeção corrigida por decaimento ajustada de 70 - 75 μCi / 100 μL.
nota: Siga a dose de 18F recomendada pelo fabricante do scanner PET para obter imagens ideais do scanner.
- Extrair 70 - 75 μCi com uma seringa de insulina com uma agulha de 28 G, medir a dose de radioactividade utilizando um calibrador de dose e registar a medição e a hora. Coloque a seringa em um suporte de seringa de chumbo.
nota: A quantidade de 18F-FDG radioatividade em cada dose é medida com um calibrador de dose, que é calibrado em relação a um material de referência padrão, como o césio-137, de acordo com os protocolos do fabricante. O tempo da leitura também é registrado para determinar a correção do decaimento.
- Pique a extremidade distal da cauda do rato e meça a glicose no sangue do rato com um glicosímetro.
- Aqueça a cauda por 1 a 2 min com uma gaze embebida em água morna. Limpe a cauda com isopropanol a 70% para dilatar a veia da cauda pouco antes da injeção. Administre 100 μL de 18F-FDG (todo o volume da seringa) com uma injeção em bolus através da veia da cauda lateral e registre o momento da injeção. Meça a dose restante na seringa usando o calibrador de dose e registre a medição e o tempo.
nota: Haverá alguma quantidade de sonda na seringa. O uso de seringas de insulina é preferível às seringas conectadas a agulhas por meio de travas Luer devido à diminuição da quantidade da dose presa na seringa/agulha após a administração da injeção.
- Coloque o camundongo injetado na câmara de anestesia mantida sob isoflurano a 1,5 - 2% a 37 ° C para permitir que a sonda seja distribuída através da circulação sistêmica do camundongo por 1 h antes do PET scan.
nota: Pode ser benéfico esvaziar a bexiga antes da varredura para permitir uma visualização mais fácil dos tumores implantados nos flancos inferiores do camundongo.
- Após 1 h, coloque o camundongo em uma câmara de imagem sob anestesia com isoflurano do cone nasal e a 37 ° C, e prenda seus membros no lugar com fita adesiva em decúbito dorsal.
- Coloque a câmara de imagem no scanner PET/CT.
- Adquira as tomografias por emissão de pósitrons e tomografias computadorizadas conforme descrito no manual do scanner de PET/CT.
nota: As imagens PET são adquiridas por 600 s com uma janela de energia de 150 - 650 keV, reconstruídas usando a maximização da expectativa de máxima verossimilhança com correções para atenuação de fótons, normalização do detector e decaimento de radioisótopos (uma correção de dispersão não foi aplicada). As imagens de TC são adquiridas em modo contínuo por 50 s usando uma fonte de raios X de 50 kVp, 200 μA e um detector de tela plana, e são reconstruídas usando o algoritmo de Feldkamp.
- Após a conclusão do PET/CT, remova o camundongo da câmara de imagem e deixe-o se recuperar em sua gaiola.