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Artigo de método

In Utero injeção intraventricular e eletroporação de embriões de camundongos E15

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DOI:

10.3791/239

19 de julho de 2007

Neste artigo

Resumo

Intra-uterina in vivo de injeção e eletroporação do neocórtex embrionárias de camundongos fornece uma ferramenta poderosa para a manipulação de células progenitoras individuais que revestem as paredes do ventrículo lateral. Esta técnica é amplamente utilizada para estudar os processos envolvidos na corticogenesis por excesso de expressar ou derrubando genes e observando os efeitos sobre a proliferação celular, migração e diferenciação. Em comparação com as estratégias tradicionais de knockout, in-utero eletroporação fornece um meio rápido para manipular uma população de células durante uma janela específica temporal. Neste protocolo de vídeo destacamos a metodologia experimental para a preparação para a cirurgia os ratos, expondo os cornos uterinos através laporatomy, injetando DNA para os ventrículos laterais do embrião em desenvolvimento, electroporating DNA para os progenitores que revestem a parede lateral, e cuidar de animais pós-operatório . Nosso laboratório utiliza este protocolo para cirurgias em E13-E16 camundongos, no entanto, é mais comumente realizada no E15, como mostra este vídeo.

Divulgações

Os autores não têm nada a declarar.

Reimpressões e permissões

Etiquetas

Eletroporação in uteroCirurgia de Embrião de CamundongoInjeção no Ventrículo LateralMicroinjeção de DNANeocórtex EmbrionárioEntrega de DNA PlasmídicoTécnica de Sutura CirúrgicaAdministração de BuprenorfinaAnestesia com IsofluranoSistema de Eletroporação BTX