Method Article

Injeção do mouse parede da bexiga

DOI:

10.3791/2523

July 12th, 2011

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rato injeção parede da bexiga é uma abordagem útil para estudo de células da bexiga ortotopicamente-tronco e biologia do câncer. Este método de microcirurgia delicada pode ser dominada com técnica cuidadosa e prática.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rato injeção parede da bexiga é uma técnica útil para estudar fenômenos ortotopicamente bexiga, incluindo células-tronco, o músculo liso, e biologia do câncer. Antes de iniciar as injeções, a área cirúrgica deve ser limpa com água e sabão e solução anti-séptica. Equipamentos cirúrgicos devem ser esterilizadas antes do uso e entre cada animal. Cada rato é colocado sob anestesia isoflurano inalado (2-5% para a indução, 1-3% para manutenção) e sua bexiga exposta, fazendo uma incisão mediana abdominal com uma tesoura. Se a bexiga está cheia, é parcialmente descompactado pelo gentil espremendo entre dois dedos. A suspensão de células de interesse é intramurally injetado na parede da cúpula da bexiga usando uma agulha de calibre 29 ou 30 e 1 cc ou menor seringa. A ferida é então fechada com grampos de sutura eo mouse permitiu recuperar em uma almofada de aquecimento. Injeção de parede da bexiga é uma técnica de microcirurgia delicada que pode ser dominada com a prática.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Injeção do mouse parede da bexiga

Escolha da tensão do mouse, idade e sexo é ditada por necessidades experimental. Nós usamos ratos entre 8 e 12 semanas de idade, uma vez que esta é uma janela de maturidade imunológica antes de senescência. Como orientação geral, os ratos devem chegar pelo menos uma semana antes da manipulação experimental, a fim de evitar o stress induzido por fatores de confusão.

  1. Limpe a superfície da mesa cirúrgica com água e sabão.
  2. Limpe a superfície da mesa cirúrgica com Swipes Cide ou toalhetes anti-séptico.
  3. Autoclave instrumentos cirúrgicos limpos antes da sua utilização na cirurgi....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rato injeção parede da bexiga permite a implantação de células específicas em áreas definidas da parede da bexiga. Esta técnica tem amplas aplicações para os modelos do rato do cancro da bexiga, o músculo liso, e biologia das células estaminais. Por definição, mouse injeção de parede da bexiga facilita a introdução de câncer de bexiga ou de células-tronco em um local ortotópico assim que o seu crescimento e diferenciação pode ser estudado em um contexto fisiologicamente relevantes anatômicas. Na verdade, Dinney et al. d.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Não há conflitos de interesse declarados.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Agradecemos o apoio de uma bolsa-piloto do Fundo de Investigação Stanford Pediátrica e K08DK087895-01 do NIDDK.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome do reagente Companhia Número de catálogo
Isoflurano (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 ou 30 agulhas Hamilton 7803-06 ou 7803-07
100 seringa microlitro Hamilton 7656-01

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Mouse Bladder InjectionBladder Wall InjectionAbdominal IncisionCell Suspension InjectionWound Clip ClosureIsoflurane AnesthesiaSurgical Site SterilizationHistological AnalysisBladder Dome ExposureHamilton Syringe Use

Related Articles