Method Article

Células padronização na opticamente transparentes Indium Tin Oxide Eletrodos

DOI:

10.3791/259

August 20th, 2007

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Non-incrustantes monocamada PEG silano foi dessorvida do eletrodos individualmente endereçáveis ​​ITO sobre vidro por aplicação de um potencial redutor. Eletroquímico através da remoção do PEG-silano camada de microeletrodos ITO permitiu a adesão celular a ter lugar de uma forma espacialmente definida, com padrões de celulares perto correspondente aos padrões de eletrodo.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

A capacidade de exercer o controle espacial e temporal preciso sobre as interações da superfície celular é um requisito importante para a montagem de multi-celular construções servindo como em imita vitro de tecidos nativos. Neste estudo, fotolitografia e corrosão úmida técnicas foram utilizados para fabricar individualmente endereçáveis ​​óxido de índio e estanho (ITO) eletrodos em substratos de vidro. Os substratos de vidro contendo microeletrodos ITO foram modificados com poli (etileno glicol) (PEG) silano para torná-los proteínas e células de resistência. Presença de moléculas de isolamento PEG na superfície do eletrodo foi verificada por voltametria cíclica empregando ferricianeto de potássio como uma molécula repórter redox. Importante, a aplicação do potencial redutor causado dessorção da camada de PEG, resultando em regeneração da superfície do eletrodo condutor eo aparecimento de típicas ferricianeto picos redox. Aplicação do potencial redutora também correspondeu à mudança das propriedades do eletrodo ITO a partir de células não-adesivo para celular adesiva. Eletroquímico através da remoção do PEG-silano camada de microeletrodos ITO permitiu a adesão celular a ter lugar de uma forma espacialmente definida, com padrões de celulares perto correspondente aos padrões de eletrodo. Micropatterning de vários tipos de células foi demonstrado nesses substratos. No futuro, o controle das propriedades biointerfacial oferecidas por este método permitirá que o engenheiro microambientes celular através do conjunto de três ou mais tipos de células em uma configuração geométrica exata sobre um substrato opticamente transparentes.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Parte I: Padronização dos eletrodos

  1. Limpo e desidratado ITO lâminas de vidro revestidas foram revestidas com fotorresiste positivo
  2. A superfície foi cozido a 100 ° C para remover solventes da resistência
  3. Após o cozimento, a superfície foi exposta à luz ultravioleta através de uma fotomáscara usando a Canon Máscara alinhador
  4. As regiões expostas foram retiradas em uma solução desenvolvedor
  5. A superfície era difícil cozido para remover qualquer solução desenvolvedor restantes
  6. As regiões ITO não protegido por padronização fotorresiste foram gravadas em uma distância etchant ácido
  7. Fotorresiste remanescen....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Neste vídeo, demonstramos o padrão de célula em eletrodos opticamente transparentes índio óxido de estanho. Após a fabricação dos eletrodos ITO usando fotolitografia, eles foram modificados com uma monocamada de células-resistivo de PEG silano. Este monocamada foi dessorvida usando eletroquímica na superfície de comutação de célula para célula-resistivo adesiva. Padronização de fibroblastos murinos 3T3 mostrou em seu vídeo. Temos também hepatócitos padronização, pilhas e células estreladas usando a mesma técnica. Além disso, fazendo vários .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Óxido de índio e estanhoOutrosDelta TechnologiesCB 40IN
PEG reagente de silanoGelest Inc.SIM6492.66
ReagenteÁcido ClorídricoSigma-Aldrich320331
ReagenteÁcido NítricoSigma-AldrichReagente de Etanol 258121
ReagenteAcetonaSigma-Aldrich459836
ReagenteAcetonaSigma-Aldrich650501
Reagentede ToluenoSigma-AldrichLinha
meios
de de de de celular murina ATCC dos fibroblastos de Sigma-Aldrich C3867 3T3 do reagente Invitrogen do colagênio de 34866

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lee, J. Y., Jones, C., Zern, M. A., Revzin, A. Analysis of Local Tissue-Specific Gene Expression in Cellular Micropatterns. Analytical Chemistry. 78, 8305-8312 (2006).
....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Indium Tin Oxide ElectrodesPhotolithography ProcessElectrochemical Cell AdhesionPEG Silane ModulationCell Patterning TechniqueOptically Transparent SubstratesTissue Engineering MethodsMicrofabrication ProtocolsElectrochemical StrippingFibroblast Adhesion Assay

Related Articles