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1. Preparação da placenta
- A placenta deve ser adquirido a partir da sala de parto o mais cedo possível após o parto para minimizar a formação de coágulos dessecação, e da deterioração geral do tecido.
- Cuidados devem ser tomados para garantir que a placenta não está exposta a fixação em formalina ou outro.
- Padrão BSL2 precauções para tecidos humanos devem ser mantidas e pessoal deve usar uma máscara, avental, luvas e proteção para os sapatos.
- Coloque a placenta em uma tigela grande de plástico ou metal que tem buracos precut para permitir a drenagem do fluido. Esta taça deve ser colocado dentro de uma tigela grande de aço inoxidável para evitar derramamento.
- Lavar a placenta com soro fisiológico morno.
- Para melhor visualização da placenta, use uma tesoura Metzenbaum para extirpar as membranas inter-twin amniótico sendo cuidado para não ferir a placenta em si. Deixe um manguito ½ cm de inter-twin de membrana no local. (Figura 1A).
2. Cateterismo dos vasos da placenta
- Identificar os cabos dos gêmeos respectivos. Os obstetras costumam identificar cada gémeo pelo número de grampos colocados em cada cabo. Certifique-se de confirmar que o cabo fornecido apresentando twin (A twin).
- Um de cada vez, mantendo o controle de qual cabo é que, cada transecto cordão logo abaixo os grampos (Figura 1B). Delicadamente o leite coagular fora dos vasos (Figura 1C). Na borda do corte do cordão haverá uma veia e pelo menos um, geralmente dois, artérias. Artérias são identificados pelo seu diâmetro relativamente menor (em comparação com a veia) e ao redor do manguito muscular (Figura 1D).
- Use um padrão de fio-guia radial arterial linha, 0,46 mm de diâmetro e 80 cm de comprimento (Arrow, Reading PA, EUA), com uma ponta macia para ter acesso a um orifício na extremidade arterial corte de cabo de gêmeos A (Figura 1E).
- O fio-guia deve ser colocado um mínimo de três centímetros dentro do vaso. Tensão contra suave sobre a parcela não-vasculares da borda do corte do cabo usando uma pinça Kelly facilita muito o avanço do fio. Transformando menor do cabo para endireitar os vasos tortuosos pode ajudar com o avanço do fio. Cuidados devem ser tomados para evitar passagens falsas.
- Utilizando a técnica de Seldinger thread, a 20 cm de comprimento 0,6-1,19 milímetros cateter de polietileno de diâmetro interno (Intramedic, Batavia IL, EUA) com uma extremidade chanfrada distal sem rodeios sobre o fio dentro da artéria (Figura 1F). Cuidados devem ser tomados para não deslocar o fio ao avançar o cateter. Remova o fio depois de cateter é assentado pelo menos 3 cm no vaso.
- Como alternativa, alguns grupos têm tido sucesso sem o uso de um fio-guia e direta canulação dos vasos umbilicais com cateteres de artéria umbilical. Embora, esta técnica funciona bem em nossas mãos o uso de um fio-guia diminuiu o tempo que nos leva a concluir o procedimento.
- Anexar um 18 G blunt ponta da agulha (BD Biosciences, Franlik Lakes, NJ, EUA) para a extremidade proximal do tubo. Assegurar a colocação adequada do cateter através da injeção de uma pequena quantidade de soro fisiológico dentro do vaso e observando limpeza das artérias distais. Varre dedo suave sobre os vasos enquanto está a injectar solução salina pode ajudar a facilitar a circulação de qualquer coágulos residual.
- Repita os passos com cuidado 2,3-2,6 para a veia de um gêmeo com atenção para evitar o desprendimento do cateter arterial.
- Amarre um pedaço de fita umbilical 1 cm distal do bordo de corte ao redor da medula e cateteres. Assegurar uma boa vedação para evitar o refluxo.
- Repita o passo 2,3-2,9 para o cabo do gêmeo B (a não-apresentação de twin) de tal forma que existem cateteres na artéria e veia umbilical de cada dupla presa com fita umbilical e ambos circulações foram infundidos com salina (Figura 2).
3. Injeção de tinta colorida para os vasos da placenta
- Patologia corante, suspensões de bário, gelatina ou de outros corantes viscoso pode ser usado para visualizar a vasculatura placentária. Escolha quatro cores contrastantes com a qual a injetar as artérias e veias de gêmeos A e B. As cores para a artéria e veia para cada dupla deve ser facilmente distinguíveis. Anastomoses superficiais deve ser detectada através da mistura de corante e à formação de uma cor (mistura) de diferentes facilmente detectável.
- Use uma seringa de 3 ml para a mão de injetar o corante A artéria do duplo com a baixa pressão. Suavemente varredura com um ou dois dedos ao longo dos vasos na direção do fluxo de corante para assegurar o preenchimento de toda a árvore vascular. Se uma anastomose vascular superficial é identificado, a oclusão manual do navio a alimentação pode ser empregado para permitir que o resto da cama maior resistência vascular para preencher (Figura 3A).
- Use uma seringa de 3ml separados à mão injetar a artéria do gêmeo B (Figura 3B).
- Repita os passos 3.2 e 3.3 para as injecções venosas.
- Se houver vazamento de corante a partir de um navio feridos reparação, deve ser realizada com uma sutura fina e um motorista de agulha. Tome cuidado para não sutura ligadura do vess todoel.
- Usando uma câmera de alta resolução digital de tirar uma imagem após cada injecção. Depois de todas as injecções são completos, retire a amostra da tigelas, lugar de encontro a um fundo de cor neutra e re-imagem (Figura 4). Documento o número e tipo de conexões observadas entre as circulações dos gêmeos.
4. Resultados representativos:
Artéria para anastomoses da artéria (AA) foram mostrados para ser "protetor", como eles estão associados com um risco significativo de redução da STT e com melhores resultados para ambos os gêmeos 5. A Figura 4 demonstra uma injeção MC placenta gêmea. Um AA tinha sido identificado por prospectivamente no útero de ultra-som Doppler. Este achado foi confirmado através da mistura de gêmeos arterial (amarelo) e twin B Um corante arterial (azul) em uma estrutura de comunicação arterial (verde, seta). Anastomose com a artéria da AV twin A (amarelo) e veias de gêmeos B (laranja) é também demonstrada (cabeça de seta). Figura 5 e 6 mostram fotografias de outros dois espécimes da placenta foi injetado.

Figura 1. (A) A membrana amniótica é cuidadosamente removido da superfície fetal da placenta MC compartilhada com tesoura Metzenbaum. (B) A borda limpa do cordão umbilical do gêmeo A é exposto por transecção proximal com Metzenbaum tesoura. (C) Clot é ordenhado da medula por compressão manual. (D) As artérias umbilical (pontas de seta) e veia (seta) do gêmeo A são identificados. (E) Após a colocação de uma pinça Kelly na porção avascular da superfície de corte do cabo de tração, um fio-guia é colocado na artéria umbilical do gêmeo A e gentilmente avançados através do vaso tortuoso. (F) Um pequeno cateter é então avançado sobre o fio-guia para o lúmen do vaso usando a técnica de Seldinger.

Cateteres figura 2. Foram colocados em uma artéria umbilical e na veia umbilical de cada gêmeo. Estes cateteres são seguros no lugar com laços de fita umbilical ao redor do cordão inteiro. O posicionamento correto de cada cateter foi confirmada e coágulos intraluminais foram apuradas pela injeção de soro fisiológico aquecido.

Figura 3. (A) A circulação arterial do gêmeo A é injetado com corante amarelo. Contrastar claramente passa através do equador vascular para a circulação arterial de gêmeos B. (B) A circulação arterial da B twin é injetado com tinta azul. Admixing do corante amarelo e azul resultados corante em corante verde dentro da AA demonstrou anastomose (seta).

Figura 4. A veia do gêmeo A (vermelho) e da veia do gêmeo B (laranja) foram injetados. A anastomose AA (seta) e uma anastomose AV, com fluxo direcionado de A para twin twin B, (cabeça de seta) são delineadas.

Figura 5. Exemplo de MC twin placenta que foram submetidos a terapia com laser após a injeção pós-natal. Artéria o gêmeo doador ea veia estão em, respectivamente, amarelo e verde. A artéria e veia destinatário estão em azul e laranja, respectivamente. Nenhuma conexão residual entre as circulações foram detectados.

Figura 6. Exemplo de MC twin placenta após a injeção. Artéria o gêmeo do lado esquerdo e veias são em amarelo e vermelho, respectivamente. O gêmeo artéria do lado direito e veias são em azul e laranja, respectivamente. Um AA (seta) e VV (seta) são visíveis na superfície da placenta.