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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
NOTA: Os estudos comportamentais murinos são amplamente dependentes de sexo/idade/cepa e, portanto, é essencial coletar os pontos de tempo adequados e permanecer consistente entre os grupos experimentais. Fatores ambientais (por exemplo, cheiros, ruído, temperatura, umidade, iluminação, etc.) afetam muito o comportamento e a ansiedade em camundongos. Tente reduzir esses fatores ambientais o máximo possível.
1. Teste de campo aberto
NOTA: A frequência dos testes comportamentais pode ser semanal ou mensal, ou uma combinação dos dois (ou seja, semanalmente quando se espera ver a maior diferença e mensal em outros lugares). Antes do teste comportamental, os animais devem ser habituados à sala onde o teste será realizado por 10 a 15 minutos antes do início do teste. Certifique-se de que o equipamento de proteção individual adequado e todas as diretrizes das instalações locais sejam seguidos para os protocolos de teste comportamental.
NOTA: Nenhum treinamento antes do teste.
- Certifique-se de que o computador e o programa OFT estejam ligados, em execução e conectados corretamente à câmera ou à caixa de campo aberto. Clique no programa smartware, no ícone de campo aberto e em "OK". Escolha a fonte "conversor analógico digital" nas opções da câmera. Clique em "detecção" e certifique-se de que todo o espaço de campo aberto esteja visualizado e que as dimensões sejam 30 cm x 30 cm.
nota: O layout do equipamento pode variar dependendo das restrições de espaço, mas certifique-se de que o computador e o aparelho de campo aberto estejam próximos um do outro em uma sala bem iluminada para uma captura de vídeo adequada.
- Clique em "calibração", "instantâneo" e depois em "OK" para certificar-se de que o mouse está sendo detectado dentro dos limites do campo aberto. Clique em "tempo" para pré-definir um período de tempo para testar os mouses; Neste caso, defina 5 min.
- Insira os assuntos clicando no ícone "assuntos". Clique em "agendador" e destaque todas as cobaias e, em seguida, clique nas setas verdes duplas e "fase um, sessão um; " Isso trará todos os sujeitos para começar a coletar dados.
- Coloque o mouse no centro do campo aberto e clique no ícone "iniciar" para solicitar que o programa comece a gravar. Teste apenas um mouse por vez.
- Quando 5 minutos estiverem concluídos, o programa passará automaticamente para o próximo assunto. Nesse caso, remova o mouse que concluiu o teste e coloque o próximo assunto no campo aberto. Clique em "iniciar".
- Limpe o equipamento. Repita as etapas 1.3 a 1.4 para os assuntos de teste restantes.
- Para analisar os dados depois que todos os sujeitos passarem pelo teste, clique no ícone "analisar" no canto superior direito da tela. Clique em "analisar" novamente e depois em "relatório resumido". Opcionalmente, exporte os dados para um USB.