Abertura da barreira hematoencefálica mediada por microbolhas baseada em ultrassom de foco: uma técnica para criar aberturas transitórias localizadas na barreira hematoencefálica de camundongos por sonoporação

Resumo

Fonte: Haumann, R. et al. Um sistema de ultrassom focalizado e neuronavegação estereotáxica guiada por imagem de alto rendimento para abertura da barreira hematoencefálica em roedores. J. Vis. Exp. (2020)

Este vídeo descreve um método de interrupção temporária da barreira hematoencefálica (BHE) criando aberturas transitórias usando ultrassom focalizado mediado por microbolhas (FUS). Essas aberturas transitórias de BHE local podem eventualmente ser usadas para fornecer moléculas de drogas de tamanho maior diretamente no parênquima cerebral.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo participantes humanos foram realizados em conformidade com as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano e foram revisados pelo conselho de revisão institucional local.

1. Sistema de ultrassom focalizado

NOTA: A configuração descrita é um sistema de interrupção BBB construído internamente com base em componentes disponíveis comercialmente e inclui um cone personalizado impresso em 3D e uma plataforma estereotáxica destacável. O sistema é projetado modular, o que facilita as modificações de ....

Resultados

Figura 1: Configuração de ultrassom focalizado. (A) Representação esquemática da configuração do ultrassom focalizado. (B) Imagem da configuração do ultrassom focalizado. O sistema consiste em um transdutor montado de cima para baixo em um estágio linear 1D sobre um segundo estágio 2D para posicionamento 3D automático. O transdutor é construído em um cone de feixe ch.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Seringa luer-lock de 1 mL	Becton Dickinson	309628	Plastipak
Agulha de 19 G	Terumo Agani	8AN1938R1
Agulha de 23 G	Terumo Agani	8AN2316R1
Fita cirúrgica 3M Transpore	Ciência aplicada à vida	7000032707	Ou similar
Gerador de forma de onda arbitrária	Siglent		SDG1025, 25 mHz, 125 MSa/s
Stereotato automatizado	Construído internamente		O Stereotact com todos os elementos foi construído internamente
Bruker In-Vivo Xtreme	Bruker		Inclui software
Solução de NaCl tamponado	B. Braun Melsungen AG	220/12257974/110
Cloridrato de buprenorfina	Indivior UK limitd		0,324 mg
Enriquecimento de gaiolas: casa inteligente de celulose	Serviços biológicos
Filtro de carbono	Bickford	NC0111395	Omnicon f/air
Colher de cerâmica
Cotonetes
D-luciferina, sal de potássio	Biotecnologia de Ouro	SORTE-1
etanol	Farmácia VUmc		70% de sucesso
Evans Azul	Sigma Aldrich	E2129
Fresenius NaCl 0,9%	Fresenius Kabi		Nacl 0,9%, 1000 mL
Histoacrílico	Braun Cirúrgica		Histoacrílico 0,5 mL
Hidrofone	Acústica de Precisão
Seringa de insulina	Becton Dickinson	324825/324826	0,5 mL e 0,3 mL
Isoflurano	TEVA Pharmachemie BV	8711218013196	250 mL
Cetamina	Alfasan		10 %, 10 ml
Comida de rato: Teklad global 18% proteína dieta para roedores	Envigo	2918-11416M
Cateter Neoflon	Becton Dickinson	391349	26 GA 0,6 x 19 mm
osciloscópio	Tecnologias da Keysight		Infiniivision DSOX024A
Tubos de plástico	Greiner bio-one	210261	50 mL
Amplificador de potência	Eletrônica e Inovação Ltda	210L	Modelo 210L
Acoplador DC do pré-amplificador	Acústica de Precisão		Número de série: DCPS94
tesoura	Sigma Aldrich	S3146-1EA	Ou similar
Sedazina	AST Farma		2% de sucesso
Microbolhas SonoVue	Bracco		8 μl/ml
Água estéril	Fresenius Kabi		1000 mL
seringa			Várias seringas podem ser usadas
Temgésica	Indivior UK limitd		0,3 mg/ml
transdutor	Acústica de Precisão		1 MHz
Pinças	Sigma Aldrich	F4142-1EA	Ou similar
Gel de ultrassom	Laboratórios Parker Inc.	01-02	Aquasônico 100
Gel vidísico	Bausch + Lomb		10 gramas