Dissecção do tecido do palato do modelo murino adulto: um procedimento cirúrgico para colher palato duro e palato mole da cavidade oral de camundongos adultos

Neste artigo

Resumo

Fonte: Xuan Ngo, Y. et al. Isolamento e Cultura de Queratinócitos Orais Primários do Palato de Camundongos Adultos. J. Vis. Exp.(2021)

Este vídeo demonstra um procedimento cirúrgico para dissecar o tecido do palato a partir de um modelo murino.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Dissecção do tecido do palato de camundongos adultos

Sacrifique um camundongo C57BL/6J adulto (macho ou fêmea) por luxação cervical, em conformidade com os regulamentos da instalação relacionados ao bem-estar animal.
1. Remova os pelos ao redor da boca com um barbeador. Usando uma tesoura, corte da bochecha em direção à mandíbula, em ambos os lados.
  nota: O rato precisa ser anestesiado antes do sacrifício. Uma mistura anestésica de medetomidina, midazolam e butorfanol é usada (ver Tabela de Materiais).
Use uma pinça para abrir bem a boca e absorver qualquer sangue usando um cotonete. Para desinfetar o palato, limpe o interior da boca com um cotonete contendo 10% de iodopovidona.
Para colher o palato do camundongo, primeiro use uma lâmina de bisturi cirúrgico para fazer uma incisão marginal de espessura total ao longo do lado do palato dos dentes superiores. Em seguida, dissecar cuidadosamente todo o palato usando um raspatório.
nota: Um raspatório é uma ferramenta usada para elevar um retalho mucoperiosteal (ver Tabela de Materiais) (Figura 1B).
Transfira rapidamente o tecido do palato para um tubo de 15 mL contendo 4 mL de meio completo + solução antibiótico-antimicótica. Mantenha os tecidos no gelo até que estejam prontos para a incubação.
nota: Para coleta de vários camundongos, os tecidos do palato podem ser mantidos no gelo por até 4 h.

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Resultados

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Figura 1: Visão geral do procedimento de dissecção e isolamento de queratinócitos orais de camundongos. (A) Representação esquemática da cavidade oral de camundongos. (B) Instrumentos usados para dissecar o palato e isolar queratinócitos orais de camundongos. (C) Imagem de campo claro do palato do camundongo. Barra de escala: 100 μm. ...