Isolamento do epitélio das papilas circunvaladas (CVP) do modelo de camundongo: um procedimento enzimático para separar o epitélio da CVP da língua do camundongo

Neste artigo

Resumo

Fonte: Shechtman, L. A. et al. Geração e Cultura de Organoides Linguais Derivados de Células-Tronco Gustativas de Camundongos Adultos. J. Vis. Exp. (2021)

Neste vídeo, descrevemos o isolamento do epitélio das papilas circunvaladas (CVP) de uma língua murina.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Isolamento do epitélio CVP

Eutanasiar os camundongos com asfixia por CO₂ de acordo com os regulamentos da IACUC, seguido por um método secundário aprovado, como toracotomia bilateral, luxação cervical, decapitação ou exsanguinação.
Use uma tesoura de dissecação grande e estéril para cortar as bochechas e quebrar a mandíbula. Levante a língua e corte o frênulo lingual para separar a língua do assoalho da cavidade oral. Corte ....

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Resultados

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Figura 1: Língua dissecada e epitélio de PVC descascado. (A) A língua é dissecada e a língua anterior é removida cortando-se logo anterior à eminência intermolar (linha tracejada), deixando a língua posterior, que inclui a PVC (caixa preta) (B) Uma agulha é inserida logo anterior à eminência intermolar (seta preta) e a mistura enzimática é injetada ab.......