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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Imagem do camundongo grávida
- Coloque o mouse em decúbito dorsal na plataforma de monitoramento. O camundongo recebe continuamente isoflurano anestésico (entre 1,5–2,5%) e oxigênio (1 L/min) através do cone nasal. Prenda suavemente todas as patas nas almofadas de monitoramento da frequência cardíaca na plataforma.
- Aplique 1–2 mL de gel de transmissão de ultrassom no abdômen.
- Usando o estágio motor manual, posicione a sonda de ultrassom na parte inferior do abdômen.
- Localize a bexiga, que deve aparecer como uma olheira cheia de líquido apenas cefálica à abertura vaginal.
- Uma vez localizada a bexiga, mova a sonda muito lentamente cefálica para visualizar o útero grávido, que deve aparecer como uma forma cilíndrica com áreas redondas nos locais da gravidez. Isso pode ser descrito como pérolas em uma corrente.
- Assim que o útero grávido for identificado, comece a imagem 2D.
2. A imagem de ultrassom 2D (Figura 1)
- Uma vez identificado o útero grávido, comece no local da gravidez mais próximo da bexiga e mova lenta e sequencialmente o cefálico para determinar o número e a localização dos locais da gravidez.
- Se o rim, baço ou fígado forem visualizados, reposicione a sonda mais perto caudal (mais perto da bexiga), pois o usuário foi longe demais cefálico.
- Imagem do corno uterino contralateral da mesma maneira.
- Congele a imagem quando a armação do ultrassom estiver no centro do local de implantação/gravidez para salvar para análises e medições posteriores.
NOTA: Leva menos de um segundo para que a imagem seja congelada e salva para análise posterior.
- Meça a distância de implantação usando a reação de decidualização hiperecogênica como marcador, clicando manualmente na ferramenta "medir" primeiro e, em seguida, clicando na localização de um local de implantação. Em seguida, arraste o cursor para o próximo local de implantação e clique para desenhar uma linha que o computador relatará automaticamente sua distância. O software informará qual é a medição manual. Esta etapa não é computadorizada, mas depende do usuário para marcar a distância entre os locais decidualizados, desenhando uma linha entre os sites decidualizados, para os quais o programa fornecerá uma medida.
- Meça o tamanho da implantação, o tamanho do saco gestacional e o tamanho do pólo fetal.