Indução Cirúrgica da Instabilidade da Coluna Lombar em Modelo de Camundongo: Um Procedimento Cirúrgico para a Ressecção dos Processos Espinhosos Lombares e Ligamentos Conectados em Modelo Murino

Resumo

Fonte: Liu, S. et al. Um modelo de camundongo de instabilidade da coluna lombar. J. Vis. Exp. (2021)

Neste vídeo, descrevemos o procedimento cirúrgico para induzir instabilidade da coluna lombar em um modelo de camundongo, ressecando o processo espinhoso lombar L3 a L5 junto com os ligamentos supraespinhosos e interespinhosos.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Preparação pré-operação

1. Esterilização do instrumento: Esterilize os instrumentos cirúrgicos a vapor em autoclave (121 °C por 15 min) antes da cirurgia. Embale os instrumentos em um recipiente de metal e mantenha-os até que sejam usados na cirurgia.
2. Configuração da plataforma de cirurgia: Atribua uma área de bancada de pelo menos 60 cm x 60 cm para a operação. Limpe a superfície da área com álcool 75% e cubra com um pano médico descartável. Coloque um pacote de instrumentos cirúrgicos estéreis, reagentes e itens cirúrgicos em uma toalha médica descartável dentro do 1/3 superior da área. Deixe os 2/3 restantes da área limpos para operação cirúrgica. Adicione uma almofada quente embaixo da almofada cirúrgica para suporte térmico.
3. Preparação animal
   1. Coloque o animal (camundongos C57BL / 6J, machos, 8 semanas de idade) na câmara de indução. Ligue o vaporizador a um nível de indução de 4% para isoflurano e 4 L/min para oxigénio. Após o animal estar totalmente anestesiado, manter o anestésico com o cone nasal e a administração do anestésico em um nível de 1,5% para isoflurano e 0,4 L/min para oxigênio durante a cirurgia. Monitore a respiração do animal.
   2. Aplique pomada ocular de cloridrato de clortetraciclina para evitar o ressecamento da córnea durante a cirurgia.
   3. Raspe a área cirúrgica na superfície dorsal da região torácica inferior até o topo da região sacral usando um aparador de pequenos animais. Remova o pelo raspado com lenços umedecidos.
   4. Aplique o creme depilatório na área depilada e deixe lá por não mais de 3 min. Remova o creme com gaze e lave com 2 mL de soro fisiológico estéril a 0,9%.
   5. Coloque uma almofada cilíndrica cirúrgica feita sob medida (Figura 1A) sob o abdômen do camundongo para levantar a coluna lombar e facilitar a operação cirúrgica.

2. Exposição do terço lombar ao quinto lombar (L₃–L₅) processos espinhosos

1. Use o dedo indicador para tocar os processos espinhosos subcutâneos das vértebras lombares, que são mais para fora, e compare com as vértebras torácicas e as vértebras sacrais para identificar a região lombar.
2. Enxágue a pele com álcool 75%. Realize uma incisão na pele da linha média de 3 a 4 cm sobre a região da madeira desde a região torácica média até o quadril usando uma lâmina de bisturi para expor a fáscia.
3. Identifique a coluna lombar pela morfologia da fáscia posterior inserida nas pontas dos processos espinhosos. Em detalhes, a terceira fáscia lombar (L₃) à primeira fáscia sacral (S₁) é distinta de outras fáscias por suas formas em "V". A última ponta em "V" se conecta à primeira fáscia sacral (S₁) e a primeira ponta em "V" corresponde ao processo espinhoso L₃ (Figura 1B).
4. Faça as incisões do músculo paraespinhoso posterior ao longo dos processos espinhosos de L₃ a L₅ em ambos os lados lateralmente com uma lâmina de bisturi (Figura 1C). Controle a profundidade da incisão em direção às facetas para reduzir a hemorragia.
5. Separe as camadas musculares usando duas pinças oftálmicas para expor os processos espinhosos L₃ a L₅ e os ligamentos supraespinhosos.

3. Ressecção de processos espinhosos L ₃–L₅ junto com os ligamentos

1. Separe os processos espinhosos individuais cortando os ligamentos interespinhosos usando tesouras de Vênus (Figura 1D).
2. Ressecção os processos espinhosos L₃–L₅ junto com os ligamentos interespinhosos com tesouras de Vênus (Figura 1E).
3. Suturar a incisão da pele com trança de seda estéril (tamanho da sutura 5.0) sem recolocação dos músculos paravertebrais.
4. Aplique a pomada ocular com cloridrato de clortetraciclina no local da cirurgia.

Resultados

Figura 1: Exposição dos processos espinhosos L3–L5 e operação LSI. (A) Uma almofada cilíndrica feita sob medida é colocada sob o abdômen do camundongo. (B) Exposição das fáscias lombares e identificação dos processos espinhosos de L3 a S1 por formas em "V". (C) Incisões musculares paraespinhosas laterais em ambos os lados dos process...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Cloridrato de clortetraciclina pomada para os olhos	Fornecedor verificado - Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.	H31021931	Prevenir o ressecamento dos olhos, prevenir a infecção da ferida
Camundongos machos C57BL/6J	Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)	SCXK2018-0004	Modelo animal
Toalha médica descartável	Fornecedor verificado - Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.	20160090	Plataforma para operação cirúrgica
Equipamento de anestesia inalante	MARCA MÉDIA	Matrx 3000	anestesia
Isoflurano	Fornecedor verificado - Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.	1903715	anestesia
Cloridrato de lidocaína	Fornecedor verificado - Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.	H37022839	Alívio da dor
Agulha de sutura médica	Fornecedor verificado - Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	20S0401J	Sutura de pele
Pinça oftálmica	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Fábrica de instrumentos cirúrgicos	JD1050	Prenda a pele
Tesoura oftálmica (10cm)	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Fábrica de instrumentos cirúrgicos	Y00030	Incisão na pele
Trançado de seda	Fornecedor verificado - Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	11V0820	Sutura de pele
Aparador para animais de pequeno porte	Fornecedor verificado - Shanghai Feike Electric Co., Ltd.	Rolamento FC5910	depilação
Lâminas cirúrgicas estéreis (12#)	Fornecedor verificado - Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	35T0707	Incisão muscular
Creme depilatório Veet	RECKITT BENCKISER (Índia) Ltd	NA	depilação
Tesouras de Vênus	Equipamento médico Mingren	Comprimento: 12,5 cm	Corte o músculo e o processo espinhoso